实验室仪器及装备销售工作总结

2020-08-16 来源:销售个人工作总结收藏下载本文

推荐第1篇:仪器销售工作总结

篇一:仪器市场年终总结 工作总结

如果让我用一个词来形容xxx年,用社会的普遍角度来说,那是‘xxx’。如果用一个词来形xxx公司,我还真不知道那个词是什么。因为,不是一个词,一句话,就可以诠释它的真正含义。回望我们共同走过的岁月,一路上,困难,成功,艰辛,喜悦,各种滋味,伴随着xxx公司迎来新的纪元。今年的销售业绩在整体上比去年都有所提升,这是一个好的发展趋势。毕竟,要想在一个行业,市场里发展下去,就心须有一个明显的上升势头,因为所谓的市场,就是一个筛子,留下发展能力比较强的,除去无竞争优势的。而我们只有不断地发展,不断地提升,不断地壮大,才能在这个行业中,取得成功的收获。

总结今年的工作,尽管有了一定的进步,但在很多方面还存在着不足。

首先;对于某些客户的想法的了解的还不够深入,不能十分清晰的向客户解释,对于一些大的问题不能快速拿出一个很好的解决问题的方法。在与客户的沟通过程中,过分的顺应客户的方向,而没有坚持自己的立场,以至于引起一连串的不良反应。例如:xxx单位的罗主任,在今年的xxx与xxx中,从开始的改品牌,发展到对我所报价格的怀疑,最后是不信任。其中的原因也主要是没有认真分析与权衡事情发展中的变化与遇到事情的应变能力。

其次:没有对时间进行合理性的利用。我一直没有认真的思考过,其实很多时候,我们都会觉得时间不怎么够用,原来只是一些小事情,耽误了整个事情的进展,如一份明天要给客户的报价单,一个要询问厂家的电话,一份要发出去的传真。如果报价可以在晚上做好,电话和传真可以花一个半天,连同一大堆零零星星的事,一起和处理掉。办事的效率与程序,并在这时,显得那么的有条不紊了。做起事来会比较轻松。

还有:在与客户沟通的过程中,因为对部分产品的价格、性能、参数,相关安装技术不是很清楚,不能把我们公司产品的情况十分清晰的传达给客户,了解客户的真正想法和意图,对客户提出的某项建议不能做出迅速的反应。从而错过了做成一单的成功机会。

最后:工作没有一个明确的目标和详细的计划,没有养成一个写工作总结和计划的习惯,销售工作处于放任自流的状态,从而引发销售工作没有一个统一的管理,工作时间没有合理的分配,工作局面混乱等各种不良的后果。

在不断的回顾与反思中,我发现作为一个业务员必面具备以下的几个基本要求:

(一)作为一个业务员,个人的开拓精神,工作认识,生活态度,与业务也有着密不可分的联系,要有爱岗敬业的强烈责任感和事业心。

(二)要具备专业知识和工作能力。增强自己的综合业务分析能力,学习和掌握产品技术知识,才能更好地应用于实际工作过程中。

(三)能认真、按时、高效率地做好公司领导及同事交办的其它工作。为了公司工作的顺利进行及同事之间的工作协调,除了做好本职工作,还要积极配合其他同事做好工作。

(四)热爱自己所从事的职业,能够正确认真的对待每一项工作事务,端正态度,认真遵守纪律,保证按时出勤,坚守岗位。不能靠着所谓的关系,就不遵守公司的各项规章制度,搞特权。

个人的销售金额,在简单直观的阿拉伯数字面前,带来的不仅是一个业绩的量化。如果说比去年,业绩差不多增加了一倍。可回头发觉,自己做得反而没有去年好,这就是一个价值,用通俗的话讲,所赚的利润不多。针对这一问题,我作了如下的市场分析:

1.现在xx地区的仪器市场品牌很多,局面也很混乱,现在我们公司的产品主要偏向国产。在本年销售产品过程中,牵涉问题最多的就是产品的价格,也就是利润问题。有些是因为价格而丢的单,面对关系好的客户,价格不是太别重要的问题,但面对采购数量比较多,或是省政府采购时,特别是多家公司在一起询价,砍价时,每个人都对产品的价位是非常敏感的。从今年的销售业绩来看,虽然比起去年,增长了很多,但利润却越做做少。去年做10万元,有1万元的利润,现在做15万,也只有1万元的利润。

2.从理论上讲,只要是原有的产品,就有一定的利润空间,因为我们都是因做了那些产品而慢慢发展起来的。但随着国产仪器的价格透明化,我们只能依靠一些进口产品才能够创造较好的利润增长点。在明年的市场策略中,可以在慢慢的产品结构调整阶段中,选择两个利润较好,市场需求较大的进口产品,从而淘汰一些质量不太好又不赚钱的国产品牌,是很有必要的。

3.我们现在的市场,一般以xx为主。有市场就有竞争,在发展飞快的今天,容不得我我们有丝毫的松懈。只有一步一个脚印,一年一个跨度,才能在这样的一个生存环境里站稳脚跟,慢慢发展,壮大。我们有必要重新探讨市场领域的内在情况。其实我们还有很多未涉及的领域,如职业类的技校,随着国家政策的改革,在科研方面的投入也在慢慢增长,我们可以适当地开发一下。至于是何种形势,我现在也未曾调查清楚,但在一个行业里,要想做大做好,必须具备敏锐的嗅觉和长远的战略目光。

做业务其实就是做人,有所追求,有所期望,就会有所收获。而业务中的相对论,指的大意可认识是对现阶段中业绩的满足感,和对周围环境的对比度。作为一个销售人员,也不是业绩少最可怕,可怕的是没有永攀高峰的无畏精神。同样是一生,同样是一个人,同样是没高学历,同样是没有先天的优势,为什么有的人成功了,有的人一辈子碌碌无为,是什么力量让这一切有着天上和地下的区别,那就是世界是最伟大的力量-选择的力量。那么,让我们在一起试着选择做一个成功的人吧,为了生活,价值,抱负,理想。

xxx年,是一个值得去期待与展望的一年。因为它意味着xxx公司将在又一来年中,伴着东方破晓的红阳,在xxx这块土地上,继续进行着奋力拼博的使命。有一种力量叫凝聚,有一种精神叫奉献,有一种态度叫专注,有一种人生叫永不止步。让我们一起努力吧!

对现公司的几点建议 ;

(一)xxx年规章制度应条款明确、言简意赅,明确业务员的区域、任务、费用、惩罚、奖励,对模凌两可的条款予以删除,不定期地对业务员进行考核。

二)公司可在员工共同讨论下修订有针对性的销售模式,使其适应市场环境,因地制宜,根据市场变化调整价格,以增加销售者的信心与公司业务量的提升。

(三)售后服务是公司品牌形象树立的手段之一。销售是一种长期循序渐进的工作,而产品缺陷普遍存在,所以业务员应正确对待产品的售后问题,因为这和用电脑一样,需要不定期地维护,出现了故障要解决一样。选择逃避那终不是一个做销售的人所会接受的。所以,我们有必要提高在售后服务人员的专业技能,可以利用一些空闲时间(如7月,8月份),分配各销售人员所擅长的仪器,加以强化调试,维修方面的能力。 xxx年的工作计划如下:

xx年自己计划在去年工作得失的基础上取长补短,重点做好以下几个方面的工作:

(一)依据xx年区域销售情况和市场变化,自己xx年计划将工作重点放在xxx,xxx,xxx, xxx,企事业单位等区域。

(二)对于老客户,和固定客户,经常保持联系,稳定与客户的关系,确保一定的业绩量。为了更好地做好销售,计划在确定产品品种后(主要是xxx,xxx产品),努力学习产品知识及性能、用途,以及售后方面的问题。 力求不断提高自己的综合素质。

(三)为确保在销售业绩上的更大突破,在平时就要积极搜集信息并及时汇总,力争在稳定原有的客户资源前提下,开发新的市场,以争取更大的收获。

(四)要不断加强业务方面的学习,上网查阅相关资料,与同行们交流,向他们学习更好的方式方法。和公司其他员工要有良好的沟通,有远见意识,多交流,多探讨,不断扩展增长业务领域。篇二:2011年测量仪器市场营销年终总结 2011年度销售工作总结与2012年销售计划 ——北京天力发科贸有限责任公司市场部姚海生

一、2011年工作总结·

(一)个人成长

2011年7月我有幸进入了天力发这个大家庭,在公司领导和同事的支持和帮助下,不断的锻炼和提高自己。眼看2011年即将成为过去,回顾与中技同行的这半年时间,感慨颇多。 我是今年6月份毕业的,刚走出校门就直接来到了北京。刚开始接触测量仪器行业,什么都不懂,对拓普康,徕卡,天宝等国际知名测量仪器公司都闻所未闻。那时候公司人还不多,每周六都在会议室讨论一周以来的成绩与问题,当各位同事分析渠道优势与劣势,以及一些操作流程的时候,我更是听得云里雾里。我进公司的时候,正好上一批的系统培训已经结束,晓礼哥让飞哥和通哥做我的师傅,给了我一本培训教材,让我先自己熟悉一下相关知识,由于缺乏实际经验,当时看起来很吃力,经常看的昏昏欲睡的感觉。一个星期之后,开始了学打电话,那时候一天打70多个电话,但效果不是很理想,也经常遇到客户的刁难和不屑,将近一个月都没有任何进展,当时心情相当沮丧,不知道是继续坚持下去,还是另谋出路,领导也多次找我谈话,给我鼓励。结果,在8月份的,终于开单了,接到了我来天力发的第一票货。接下来的几个月里,我陆续新增了一些客户,但跟其他同事比起来,进步还是慢了很多。

在天力发的这半年,是很充实的半年。在这里,我不仅仅是单纯的做业务,而是更加注重自身的提高。在天力发可以一边学习,一边提高,同时能把所学的东西迅速运用于实践中,遇到不懂的或者是自己无法解决的问题,都可以随时请教领导和同事,而他们都会毫不犹豫的帮助我,这也是我在这里感觉最快乐的地方。在这里,我有一种求知的欲望,比学生时代更强烈,因为这些东西都是我所急需的,是我在这里工作的价值。测绘行业,测绘仪器销售,从来都是有风险的。我一直在努力追求自身专业知识的提高,以寻求各种问题件的解决方法,提高自己的风险防范意识。在天力发的这半年,我谈不上成功,但工作磨练了我的毅力和耐性是我最大的收获。艰难困苦,玉汝于成。虽然我目前的业绩还不是很理想,但我相信后面的路程我会走的更好。

(二)测绘仪器行业分析

来公司半年来,大体上了解到了一些测绘仪器行业市场的信息: 1.日本测绘仪器

经过近百年的发展,世界上测绘仪器厂家经过优胜劣汰已留存不多了,特别是具有市场竟争力、能生产电子测绘仪器的厂家更是稀少,越来越朝少数几家集中,品牌最响的是老牌瑞士徕卡,销售量最大的则是日本拓普康,最全面的是美国天宝(兼井了德国蔡司、瑞典捷创力),其余的都在日本:索仕、尼康、宾得。gps厂家则主要有美国天宝、法国泰雷兹(兼井了美国阿士泰克和法国塞色尔)、瑞士徕卡、日本拓普康(兼井了美国加瓦特)、加拿大诺瓦泰。 日本拓普康公司的全站仪销售全球第一,兼并美国gsp公司仕瓦特而生产gps,在中国北京设厂生产全站仪,国内大部分大的测绘仪器经销商是其代理,在国内进口全站仪销量居第一,同时是世界著名的眼科仪器生产厂家。日本索佳公司是世界著名的测绘仪器专业厂家,1996年前测绘仪器产量居全球第一,当时水准仪产量最大,1996年以前在中国销售量居第一,1997年后走下坡路,但2003年开发出系列无合作目标全站仪。日本尼康公司是世界著名照相机品牌,测绘仪器从尼康照相机中分出,力量削弱,仪器档次比较高,过去中翰公司独家代理,后被美国天宝收购,其代理权正在变动之中日本宾得公司生产世界著名的宾得照相机,测绘仪器是其一小部分业务,原香港协励行总代理,后被励精思(中翰公司下属)总代理,在全国有销售网,现励精思同宾得合资在中国生产全站仪。瑞十徕卡公司前身为瑞士威特公司,生产著名t

2、t

16、t3经纬仪,在中国影明很大,仪器种类齐全,生产航测仪器,原gps实力很强,后被美国天宝等超过,现采用加拿大诺瓦泰oem主板生产cps,徕卡的中国总代理称为欧亚公司,在国内各省会有分公司。美国天宝公司的c ps销量全球第一,后兼并瑞典捷创力(世界上第一台测距仪生产厂)、德国蔡司(原世界著名的照相机和测绘仪器生产厂)、日本尼康,在中国由北尔麦格等份家代理cps、全站仪产品,中国尼康暂由中翰代理法国泰雷兹的cps产品部分由原法国塞色尔和美国阿士泰克合并而成,是世界上第二gps生产厂,在国内由北京天测、上海达恒代理。加拿大诺瓦泰公司是世界上生产gps的oem板的著名厂家,有双频c ps的ome板,徕卡、索佳采用此板在中国市场上,日本拓普康的测绘仪器(主要是全站仪)销得最好,全站仪)可销4500台,美国天宝的gps风头最劲,gps销售800多台,约1.6亿,徕卡占据全站仪中高端市场,销量也不错。 2.中国测绘仪器

中国的测绘仪器厂家异军突起,进入九十年代后期,已研制成功全站仪、电子经纬仪、测距仪等一系列测绘仪器产品,井逐步取代进口产品,其中水准仪、测距仪、电子经纬仪、测绘附件等已完全取代了进口,占据国内95%以上的市场,以至国外厂家几乎都不再生产此类产品,国内厂家中,北一光学仪器厂(简称北光),苏州第一光学仪器厂(简称苏一光)是有三十几年历史的老国营厂,以生产光学仪器主,是光学仪器最大的两个厂家。南方测绘仪器公司(简称南方)是后起之秀,一起步便从电子测绘仪器着手,率光研制出电子经纬仪、全站仪、gps等系列产品,成为国产化的领头人,而目势头很猛,现已在国内厂家中遥遥领先,超越了大多数国外厂家。

南方测绘仪器公司的生产厂由北京电子经纬与全站仪厂、武汉棱镜与激光仪器厂、常州测距仪器与全站仪厂、常州附件厂组成,全站仪、电经、测距、棱镜、附件产量与总销晕均居第一,在国内有30个省级分公司,100多个地级公司北京光学仪器厂(博飞公司)(北光)曾是国内最大的测绘仪器制造厂,曾同日本拓普康合资生产电经,后解体,在国内有8o多家代理商,在北方地区影明很大。苏州第一光学仪器厂(苏一光)曾是仅次于北光的国内第一的光学经纬仪生产厂,同日本optical公司合作生产无合目标全站仪,光学经纬仪、水准仪质量较好,在国内有8o多家代理商。天津赛特厂是国内自动安平水准仪重要生产厂.在国外销售量大.影明大。天津欧波厂是从天津赛特、森弘分离来的厂,量大,水准仪出口美国gst公司在国内水准仪产量较大,现与北京康光合作生产电子经纬仪,产量逐渐增大。天津森弘厂从天津二光厂、赛特厂分离出来,水准仪价格低、产量大。在国内影响大。常州测距仪厂曾同南方合作生产销售测距仪,曾是国内最大的测距仪厂,后开发出电子经纬仪、全站仪在各种产品中,中国的水准仪、电子经纬仪最成熟,达到批量出口的水平,唯一还有一定差距的是全站仪,但已很接近。因此,目前在中国,进口与国产基本处在均势状态,但看趋势,南方测绘将脱颖而出独领风骚。 3.国产gps gps方面国内形成南方与中海达两家国产厂商。南方于1995年开发了中国第一台静态gps,1997年大量生产静态gps、动态rtd ,1998年开发出中国第一台双频rtk。广州中海达是1999年成立的专业gps公司,2000至2002年发展较快,后把重点放在发展海上测量仅从台数和中低端市场而己.国产产品已可与进口的抗衡.但中高端产品仍有一定差距,非一两年能赶上中国测绘仪器优劣势分析为什么说中国测绘仪器能打进国际市场而最终成为国际品牌呢?有以下几个原因决定中国测绘仪器一定能行! 1.测绘仪器属于制造业,中国有天然的优势。众所周知,中国已经成为世界的制造基地,测绘仪器也不例外,劳动力及运作成本的低廉使中国测绘仪器产品价格具有绝对的优势,而测绘仪器又是属于光机电为一体的高科技产品,难度大,市场小,大公司不愿意,小公司干不来,只有中国,才有可能做到水平高成本低又好又便宜的产品,事实也是如此,中国测绘仪器已很接近进口水平如同家电中的海尔、科龙与日本的松下、东芝相比,价格仅是他们的一半,优势很明显 2.中国自身市场巨大,足以养大国内企业。与许多国家不同的是,中国自身市场巨大,今后潜力更是可观,因此自身的市场就可以让国内企业养大,练强壮了再出国门竟争,这样更有把握,不像我国台湾地区和两欧等地,自身市场较小,市场要求又高,因此很容易一出来就夭折

3.中国产品已“与狼共舞”多年,练就了一定本领。由于中国市场的诱惑,国外厂家“该来的都来了”,而中国的厂商十几年前就开始与进口的竟争,特别近几年,中国的仪器逐渐占据上风,根本就不惧怕进口的产品,现已由守转攻,迫使进口的也不断降价,甚至在中国设厂,如拓普康、宾得已分别在北京、上海设厂生产全站仪,但是南方公司已做好竟争的准备.严阵以待 4.中国的产品已在国际市场小

试牛刀。在国内竟争同时,中国测绘仪器已被动或主动地走向国际市场,早在上世纪九十年代中期,中国的水准仪、脚架附件就大批量出口,现在占据欧美一半以上的市场,这些技术含量不高的产品已被中国占据了优势,国外已很少厂家生产了。进入二十一世纪以来,中国的电子经纬仪、扫平仪、全站仪已崭露头角,小批量地销往美国、两欧、为南亚等地,销售量逐年上升。2003年,南方公司已主动参加德国测绘仪器展览会,产生小小的轰动,今年,还将参加美国、日本、德国三大国际展览,相信会有更大的影响力。

从与外商的交流,与进口产品的对比,通过国际市场的考察,对自身还是充满信心,觉得不出五年,中国产品完全可以达到进口的水平,完全可以在国际上大展身手.知己知彼百战不殆,通过对测绘仪器行业市场的分析,希望以后的工作能有实质性的效果。

(三)工作中的不足与改进

跟其他同事相比,在天力发,我所取得的成绩是微不足道的,通过反思这段时间的得失,我认为自己在工作上还存在很大不足。

2、最近事情比较多,没有合理规划时间,工作条理性不强,就这样浪费了很多时间。有时候很多事情集中到一块了,感觉手忙脚乱,不知道从哪里下手,结果东一下西一下,什么都没做好,还没有效率。

3、在客户询价方面,没有引导客户去看报价表。自己在这方面也存在很大惰性,没有根据客户类型,制作具有针对性的报价表。

4、客户询价之后,没有及时跟进。经常是客户一个星期或更长时间之前询价,由于没有整理这些记录,结果客户要出货都不知道,没有及时主动联系客户,这样就跟很多机会失之交臂。

5、工作抓不到重点。有时候为了完成公司规定的拜访量,放下很多原来计划好的工作,结果预定的工作没完成,电话效果又不好。在这一点上,感觉是在被动的工作。

针对以上不足,我决心从下面这几个方面去改进:

首先,加强与客户的沟通与联系。拜访量还是要继续保持,但也要抽出一部分时间联系意向客户,随时掌握其最新动态,缩短与客户之间的距离。针对有过询价的客户,可以采取经常回访的方式,增进与客户的沟通与交流。

其次,尝试通过各种方式开发新客户,不能仅仅局限于电话和拜访,还可以尝试网络推广,或者是通过扫楼等方式。

再次,坚持今日事今日毕,并在下班前做好明天的规划。在上一份工作的时候,公司要求我们每天都要写工作总结,其中有一项就涉及“昨日计划完成状况”和“明日计划”,这样总结就具有针对性,哪些事完成了,哪些事还有待改进,都一目了然,纵然第二天事情多,也不会找不到头绪。

第四,针对不同客户类型,制作一份合理的价格表,引导客户自己查价格。这样一来方便客户,也节省了我们自己很多时间。

最后,增强自己工作的主动性,做事情要分清主次,尽量不受外界其他因素的干扰。同时,还要多与同事沟通,学习他们的优点,弥补自己的不足。

二、2012年工作规划

凡事预则立,不预则废2012年马上就要到来,应公司及个人发展的需要,我对自己在新的一年的目标和任务做了详细的规划。

(一)业绩规划

2012年元月份,国外圣诞节刚结束,又面临国内的春节,各个单位基本处于封帐期,不好出单,但是可以积极挖掘意向 2月初是中国的春节,国内大量厂商都已放假,发货量回落,篇三:2014年销售年终总结(医疗器械生产企业员工) 2014年销售年终总结

来到市场部工作已有半年了。在这半年的的时间中,公司领 导、部门领导、公司同事给予了我很大的支持和帮助,使我很快了解并熟悉了自己负责的业务,同时也体会到了市场部人员作为公司核心部门工作的艰辛和坚定。这段时间以来,在领导和同事们的帮助和指导下,通过自身的努力,各方面取得了一定的进步,现将我的工作情况作如下简要汇报。

一、销售业绩状况

在实习期以及实习期结束的这段时间里,在销售任务上没有给公司创造任何价值,没有完成市场部规定的每月销售任务。

二、工作成绩状况

1、在产品认识上

通过这段时间,一切从零开始,熟悉适应了公司环境,熟悉了解了***产品的用途、型号、材质、特点等,以及产品在目前市场中的基本情况。***目前在医院里没有普及使用,客户和医院对***产品的了解知之甚少,由于产品原材料等因素导致产品价格高,但是由于其产品有特点和优势,客户和医院对***产品都比较感兴趣,对此类新产品、优质产品未来的合作充满期盼;

2、在客户开发上

通过这段时间,每天通过网络寻找客户信息,网上、电话拜访客户,加强与客户交流合作,做好每日客户拜访记录情况,客户资源有了很大的积累,并有部分客户正在开发医院中,为下一步客户成交奠定了基础。如海南***科技、潍坊**医疗器械等公司目前都在医院开发过程中;

3、在医疗耗材招标上

通过这段时间,关注全国省市、医院医疗耗材招标,参与协助医疗耗材投标工作,寻找有合作意向的经销商参与投标工作,为产品中标后操作医院做准备。如2015年**市耗材招标,***和***产品已中标,**市***器械和***医疗器械选为公司配送商,并同时操作医院。2015年**肿瘤医院耗材招标正在进行中,***和***已授权****商贸参与投标,对方公司经理对产品比较满意,托人找肿瘤医院院长介绍公司产品,业务已带彩页和样品去医院走临床。2015年**市耗材招标正在进行中,已有公司对投标产品感兴趣,愿意帮忙递交标书,年前完成产品报价等相关事情;

三、销售工作中存在的主要问题

经过这段时间的努力,在销售工作中也发现了自身很多存在的问题。

1、对产品的熟悉程度还不够

在客户开发过程中,发现自身对公司产品的熟悉程度还不够,如产品的供货价、进医院建议价、产品详细使用方法等。尤其是对同类产品在市场中的情况以及与自己本公司产品在价格、质量等方面上的区别了解的还不够;

2、与客户沟通技巧不够成熟在客户开发过程中,发现自身在与客户沟通技巧方面需要加强,经过部门领导的指点和帮助,这方面也有了明显的改进和提高;

四、明年以及今后的计划

1、努力完成每月销售任务

通过之前积累的客户资源以及以后不断开发的新客户,加强客户拜访沟通,充分利用好每天宝贵的工作时间,不断开发新客户及时回访老客户,签订合同,完成每月销售任务;

2、提高业务能力

通过平时与客户的沟通交流,发现问题解决问题,不断提高与客户的沟通技巧,提升自身的业务能力;

3、熟悉产品、熟悉市场

在平时的工作中,通过自身学习以及通过向客户介绍产品,不断熟悉产品、熟悉市场,了解产品医保报销、医院操作流程等情况,随时能解决客户提出的任何问题;

4、开发产品中标市场

目前***和***产品已在铁岭中标,对目前有意向的客户及时跟进沟通,并不断开发新的有意向客户开发当地医院。对**肿瘤医院和**市耗材投标进展及时跟进,并时刻关注各地区、各省市耗材招标活动;

5、完成公司领导交办的其他工作

服从公司领导安排,协助完成公司其它部门工作,加强公司部门之前的沟通。

以上是我个人任职市场部工作以来的小结,也是我个人2014年的销售工作总结,不足之处,请领导指正。

销售部:*** 2014年12月29日

推荐第2篇:仪器销售工作总结

工作总结

如果让我用一个词来形容xxx年,用社会的普遍角度来说,那是‘xxx’。如果用一个词来形xxx公司,我还真不知道那个词是什么。因为,不是一个词,一句话,就可以诠释它的真正含义。回望我们共同走过的岁月,一路上,困难,成功,艰辛,喜悦,各种滋味,伴随着xxx公司迎来新的纪元。今年的销售业绩在整体上比去年都有所提升,这是一个好的发展趋势。毕竟,要想在一个行业,市场里发展下去,就心须有一个明显的上升势头,因为所谓的市场,就是一个筛子,留下发展能力比较强的,除去无竞争优势的。而我们只有不断地发展,不断地提升,不断地壮大,才能在这个行业中,取得成功的收获。

总结今年的工作,尽管有了一定的进步,但在很多方面还存在着不足。

首先;对于某些客户的想法的了解的还不够深入,不能十分清晰的向客户解释,对于一些大的问题不能快速拿出一个很好的解决问题的方法。在与客户的沟通过程中,过分的顺应客户的方向,而没有坚持自己的立场,以至于引起一连串的不良反应。例如:xxx单位的罗主任,在今年的xxx与xxx中,从开始的改品牌,发展到对我所报价格的怀疑,最后是不信任。其中的原因也主要是没有认真分析与权衡事情发展中的变化与遇到事情的应变能力。

其次:没有对时间进行合理性的利用。我一直没有认真的思考过,其实很多时候,我们都会觉得时间不怎么够用,原来只是一些小事情,耽误了整个事情的进展,如一份明天要给客户的报价单,一个要询问厂家的电话,一份要发出去的传真。如果报价可以在晚上做好,电话和传真可以花一个半天,连同一大堆零零星星的事,一起和处理掉。办事的效率与程序,并在这时,显得那么的有条不紊了。做起事来会比较轻松。

还有:在与客户沟通的过程中,因为对部分产品的价格、性能、参数,相关安装技术不是很清楚,不能把我们公司产品的情况十分清晰的传达给客户,了解客户的真正想法和意图,对客户提出的某项建议不能做出迅速的反应。从而错过了做成一单的成功机会。

最后:工作没有一个明确的目标和详细的计划,没有养成一个写工作总结和计划的习惯,销售工作处于放任自流的状态,从而引发销售工作没有一个统一的管理,工作时间没有合理的分配,工作局面混乱等各种不良的后果。 在不断的回顾与反思中,我发现作为一个业务员必面具备以下的几个基本要求:

(一)作为一个业务员,个人的开拓精神,工作认识,生活态度,与业务也有着密不可分的联系,要有爱岗敬业的强烈责任感和事业心。

(二)要具备专业知识和工作能力。增强自己的综合业务分析能力,学习和掌握产品技术知识,才能更好地应用于实际工作过程中。

(三)能认真、按时、高效率地做好公司领导及同事交办的其它工作。为了公司工作的顺利进行及同事之间的工作协调,除了做好本职工作,还要积极配合其他同事做好工作。

(四)热爱自己所从事的职业,能够正确认真的对待每一项工作事务,端正态度,认真遵守纪律,保证按时出勤,坚守岗位。不能靠着所谓的关系,就不遵守公司的各项规章制度,搞特权。

个人的销售金额,在简单直观的阿拉伯数字面前,带来的不仅是一个业绩的量化。如果说比去年,业绩差不多增加了一倍。可回头发觉,自己做得反而没有去年好,这就是一个价值,用通俗的话讲,所赚的利润不多。针对这一问题,我作了如下的市场分析: 1.现在xx地区的仪器市场品牌很多,局面也很混乱,现在我们公司的产品主要偏向国产。在本年销售产品过程中,牵涉问题最多的就是产品的价格,也就是利润问题。有些是因为价格而丢的单,面对关系好的客户,价格不是太别重要的问题,但面对采购数量比较多,或是省政府采购时,特别是多家公司在一起询价,砍价时,每个人都对产品的价位是非常敏感的。从今年的销售业绩来看,虽然比起去年,增长了很多,但利润却越做做少。去年做10万元,有1万元的利润,现在做15万,也只有1万元的利润。 2.从理论上讲,只要是原有的产品,就有一定的利润空间,因为我们都是因做了那些产品而慢慢发展起来的。但随着国产仪器的价格透明化,我们只能依靠一些进口产品才能够创造较好的利润增长点。在明年的市场策略中,可以在慢慢的产品结构调整阶段中,选择两个利润较好,市场需求较大的进口产品,从而淘汰一些质

量不太好又不赚钱的国产品牌,是很有必要的。 3.我们现在的市场,一般以xx为主。有市场就有竞争,在发展飞快的今天,容不得我我们有丝毫的松懈。只有一步一个脚印,一年一个跨度,才能在这样的一个生存环境里站稳脚跟,慢慢发展,壮大。我们有必要重新探讨市场领域的内在情况。其实我们还有很多未涉及的领域,如职业类的技校,随着国家政策的改革,在科研方面的投入也在慢慢增长,我们可以适当地开发一下。至于是何种形势,我现在也未曾调查清楚,但在一个行业里,要想做大做好,必须具备敏锐的嗅觉和长远的战略目光。

做业务其实就是做人,有所追求,有所期望,就会有所收获。而业务中的相对论,指的大意可认识是对现阶段中业绩的满足感,和对周围环境的对比度。作为一个销售人员,也不是业绩少最可怕,可怕的是没有永攀高峰的无畏精神。同样是一生,同样是一个人,同样是没高学历,同样是没有先天的优势,为什么有的人成功了,有的人一辈子碌碌无为,是什么力量让这一切有着天上和地下的区别,那就是世界是最伟大的力量-选择的力量。那么,让我们在一起试着选择做一个成功的人吧,为了生活,价值,抱负,理想。 对现公司的几点建议 ;

(一)xxx年规章制度应条款明确、言简意赅,明确业务员的区域、任务、费用、惩罚、奖励,对模凌两可的条款予以删除,不定期地对业务员进行考核。

二)公司可在员工共同讨论下修订有针对性的销售模式,使其适应市场环境,因地制宜,根据市场变化调整价格,以增加销售者的信心与公司业务量的提升。

(三)售后服务是公司品牌形象树立的手段之一。销售是一种长期循序渐进的工作,而产品缺陷普遍存在,所以业务员应正确对待产品的售后问题,因为这和用电脑一样,需要不定期地维护,出现了故障要解决一样。选择逃避那终不是一个做销售的人所会接受的。所以,我们有必要提高在售后服务人员的专业技能,可以利用一些空闲时间(如7月,8月份),分配各销售人员所擅长的仪器,加以强化调试,维修方面的能力。 xxx年的工作计划如下:

xx年自己计划在去年工作得失的基础上取长补短,重点做好以下几个方面的工作:

(一)依据xx年区域销售情况和市场变化,自己xx年计划将工作重点放在xxx,xxx,xxx, xxx,企事业单位等区域。

(二)对于老客户,和固定客户,经常保持联系,稳定与客户的关系,确保一定的业绩量。为了更好地做好销售,计划在确定产品品种后(主要是xxx,xxx产品),努力学习产品知识及性能、用途,以及售后方面的问题。 力求不断提高自己的综合素质。

(三)为确保在销售业绩上的更大突破,在平时就要积极搜集信息并及时汇总,力争在稳定原有的客户资源前提下,开发新的市场,以争取更大的收获。

(四)要不断加强业务方面的学习,上网查阅相关资料,与同行们交流,向他们学习更好的方式方法。和公司其他员工要有良好的沟通,有远见意识,多交流,多探讨,不断扩展增长业务领域。篇二:2014年销售年终总结(医疗器械生产企业员工) 2014年销售年终总结

来到市场部工作已有半年了。在这半年的的时间中,公司领 导、部门领导、公司同事给予了我很大的支持和帮助,使我很快了解并熟悉了自己负责的业务,同时也体会到了市场部人员作为公司核心部门工作的艰辛和坚定。这段时间以来,在领导和同事们的帮助和指导下,通过自身的努力,各方面取得了一定的进步,现将我的工作情况作如下简要汇报。

一、销售业绩状况

在实习期以及实习期结束的这段时间里,在销售任务上没有给公司创造任何价值,没有完成市场部规定的每月销售任务。

二、工作成绩状况

1、在产品认识上

通过这段时间,一切从零开始,熟悉适应了公司环境,熟悉了解了***产品的用途、型号、材质、特点等,以及产品在目前市场中的基本情况。***目前在医院里没有普及使用,客户和医院对***产品的了解知之甚少,由于产品原材料等因素导致产品价格高,但是由于其产品有特点和优势,客户和医院对***产品都比较感兴趣,对此类新产品、优质产品未来的合作充满期盼;

2、在客户开发上

通过这段时间,每天通过网络寻找客户信息,网上、电话拜访客户,加强与客户交流合作,做好每日客户拜访记录情况,客户资源有

了很大的积累,并有部分客户正在开发医院中,为下一步客户成交奠定了基础。如海南***科技、潍坊**医疗器械等公司目前都在医院开发过程中;

3、在医疗耗材招标上

通过这段时间,关注全国省市、医院医疗耗材招标,参与协助医疗耗材投标工作,寻找有合作意向的经销商参与投标工作,为产品中标后操作医院做准备。如2015年**市耗材招标,***和***产品已中标,**市***器械和***医疗器械选为公司配送商,并同时操作医院。2015年**肿瘤医院耗材招标正在进行中,***和***已授权****商贸参与投标,对方公司经理对产品比较满意,托人找肿瘤医院院长介绍公司产品,业务已带彩页和样品去医院走临床。2015年**市耗材招标正在进行中,已有公司对投标产品感兴趣,愿意帮忙递交标书,年前完成产品报价等相关事情;

三、销售工作中存在的主要问题

经过这段时间的努力,在销售工作中也发现了自身很多存在的问题。

1、对产品的熟悉程度还不够

2、与客户沟通技巧不够成熟

在客户开发过程中,发现自身在与客户沟通技巧方面需要加强,经过部门领导的指点和帮助,这方面也有了明显的改进和提高;

四、明年以及今后的计划

1、努力完成每月销售任务

通过之前积累的客户资源以及以后不断开发的新客户,加强客户拜访沟通,充分利用好每天宝贵的工作时间,不断开发新客户及时回访老客户,签订合同,完成每月销售任务;

2、提高业务能力

通过平时与客户的沟通交流,发现问题解决问题,不断提高与客户的沟通技巧,提升自身的业务能力;

3、熟悉产品、熟悉市场

在平时的工作中,通过自身学习以及通过向客户介绍产品,不断熟悉产品、熟悉市场,了解产品医保报销、医院操作流程等情况,随时能解决客户提出的任何问题;

4、开发产品中标市场

目前***和***产品已在铁岭中标,对目前有意向的客户及时跟进沟通,并不断开发新的有意向客户开发当地医院。对**肿瘤医院和**市耗材投标进展及时跟进,并时刻关注各地区、各省市耗材招标活动;

5、完成公司领导交办的其他工作 服从公司领导安排,协助完成公司其它部门工作,加强公司部门之前的沟通。

以上是我个人任职市场部工作以来的小结,也是我个人2014年 的销售工作总结,不足之处,请领导指正。

销售部:*** 2014年12月29日篇三:2011年测量仪器市场营销年终总结 2011年度销售工作总结与2012年销售计划

——北京天力发科贸有限责任公司市场部姚海生

一、2011年工作总结·

(一)个人成长 2011年7月我有幸进入了天力发这个大家庭,在公司领导和同事的支持和帮助下,不断的锻炼和提高自己。眼看2011年即将成为过去,回顾与中技同行的这半年时间,感慨颇多。 我是今年6月份毕业的,刚走出校门就直接来到了北京。刚开始接触测量仪器行业,什么都不懂,对拓普康,徕卡,天宝等国际知名测量仪器公司都闻所未闻。那时候公司人还不多,每周六都在会议室讨论一周以来的成绩与问题,当各位同事分析渠道优势与劣势,以及一些操作流程的时候,我更是听得云里雾里。我进公司的时候,正好上一批的系统培训已经结束,晓礼哥让飞哥和通哥做我的师傅,给了我一本培训教材,让我先自己熟悉一下相关知识,由于缺乏实际经验,当时看起来很吃力,经常看的昏昏欲睡的感觉。一个星期之后,开始了学打电话,那时候一天打70多个电话,但效果不是很理想,也经常遇到客户的刁难和不屑,将近一个月都没有任何进展,当时心情相当沮丧,不知道是继续坚持下去,还是另谋出路,领导也多次找我谈话,给我鼓励。结果,在8月份的,终于开单了,接到了我来天力发的第一票货。接下来的几个月里,我陆续新增了一些客户,但跟其他同事比起来,进步还是慢了很多。

在天力发的这半年,是很充实的半年。在这里,我不仅仅是单纯的做业务,而是更加注重自身的提高。在天力发可以一边学习,一边提高,同时能把所学的东西迅速运用于实践中,遇到不懂的或者是自己无法解决的问题,都可以随时请教领导和同事,而他们都会毫不犹豫的帮助我,这也是我在这里感觉最快乐的地方。在这里,我有一种求知的欲望,比学生时代更强烈,因为这些东西都是我所急需的,是我在这里工作的价值。测绘行业,测绘仪器销售,从来都是有风险的。我一直在努力追求自身专业知识的提高,以寻求各种问题件的解决方法,提高自己的风险防范意识。在天力发的这半年,我谈不上成功,但工作磨练了我的毅力和耐性是我最大的收获。艰难困苦,玉汝于成。虽然我目前的业绩还不是很理想,但我相信后面的路程我会走的更好。

(二)测绘仪器行业分析

来公司半年来,大体上了解到了一些测绘仪器行业市场的信息: 1.日本测绘仪器

经过近百年的发展,世界上测绘仪器厂家经过优胜劣汰已留存不多了,特别是具有市场竟争力、能生产电子测绘仪器的厂家更是稀少,越来越朝少数几家集中,品牌最响的是老牌瑞士徕卡,销售量最大的则是日本拓普康,最全面的是美国天宝(兼井了德国蔡司、瑞典捷创力),其余的都在日本:索仕、尼康、宾得。gps厂家则主要有美国天宝、法国泰雷兹(兼井了美国阿士泰克和法国塞色尔)、瑞士徕卡、日本拓普康(兼井了美国加瓦特)、加拿大诺瓦泰。

日本拓普康公司的全站仪销售全球第一,兼并美国gsp公司仕瓦特而生产 gps,在中国北京设厂生产全站仪,国内大部分大的测绘仪器经销商是其代理,在国内进口全站仪销量居第一,同时是世界著名的眼科仪器生产厂家。日本索佳公司是世界著名的测绘仪器专业厂家,1996年前测绘仪器产量居全球第一,当时水准仪产量最大,1996年以前在中国销售量居第一,1997年后走下坡路,但2003年开发出系列无合作目标全站仪。日本尼康公司是世界著名照相机品牌,测绘仪器从尼康照相机中分出,力量削弱,仪器档次比较高,过去中翰公司独家代理,后被美国天宝收购,其代理权正在变动之中日本宾得公司生产世界著名的宾得照相机,测绘仪器是其一小部分业务,原香港协励行总代理,后被励精思(中翰公司下属)总代理,在全国有销售网,现励精思同宾得合资在中国生产全站仪。瑞十徕卡公司前身为瑞士威特公司,生产著名t

2、t

16、t3经纬仪,在中国影明很大,仪器种类齐全,生产航测仪器,原gps实力很强,后被美国天宝等超过,现采用加拿大诺瓦泰oem主板生产cps,徕卡的中国总代理称为欧亚公司,在国内各省会有分公司。美国天宝公司的c ps销量全球第一,后兼并瑞典捷创力(世界上第一台测距仪生产厂)、德国蔡司(原世界著名的照相机和测绘仪器生产厂)、日本尼康,在中国由北尔麦格等份家代理cps、全站仪产品,中国尼康暂由中翰代理法国泰雷兹的cps产品部分由原法国塞色尔和美国阿士泰克合并而成,是世界上第二gps生产厂,在国内由北京天测、上海达恒代理。加拿大诺瓦泰公司是世界上生产gps的oem板的著名厂家,有双频c ps的ome板,徕卡、索佳采用此板在中国市场上,日本拓普康的测绘仪器(主要是全站仪)销得最好,全站仪)可销4500台,美国天宝的gps风头最劲,gps销售800多台,约1.6亿,徕卡占据全站仪中高端市场,销量也不错。 2.中国测绘仪器

中国的测绘仪器厂家异军突起,进入九十年代后期,已研制成功全站仪、电子经纬仪、测距仪等一系列测绘仪器产品,井逐步取代进口产品,其中水准仪、测距仪、电子经纬仪、测绘附件等已完全取代了进口,占据国内95%以上的市场,以至国外厂家几乎都不再生产此类产品,国内厂家中,北一光学仪器厂(简称北光),苏州第一光学仪器厂(简称苏一光)是有三十几年历史的老国营厂,以生产光学仪器主,是光学仪器最大的两个厂家。南方测绘仪器公司(简称南方)是后起之秀,一起步便从电子测绘仪器着手,率光研制出电子经纬仪、全站仪、gps等系列产品,成为国产化的领头人,而目势头很猛,现已在国内厂家中遥遥领先,超越了大多数国外厂家。 3.国产gps gps方面国内形成南方与中海达两家国产厂商。南方于1995年开发了中国第一台静态gps,1997年大量生产静态gps、动态rtd ,1998年开发出中国第一台双频rtk。广州中海达是1999年成立的专业gps公司,2000至2002年发展较快,后把重点放在发展海上测量仅从台数和中低端市场而己.国产产品已可与进口的抗衡.但中高端产品仍有一定差距,非一两年能赶上中国测绘仪器优劣势分析为什么说中国测绘仪器能打进国际市场而最终成为国际品牌呢?有以下几个原因决定中国测绘仪器一定能行! 1.测绘仪器属于制造业,中国有天然的优势。众所周知,中国已经成为世界的制造基地,测绘仪器也不例外,劳动力及运作成本的低廉使中国测绘仪器产品价格具有绝对的优势,而测绘仪器又是属于光机电为一体的高科技产品,难度大,

市场小,大公司不愿意,小公司干不来,只有中国,才有可能做到水平高成本低又好又便宜的产品,事实也是如此,中国测绘仪器已很接近进口水平如同家电中的海尔、科龙与日本的松下、东芝相比,价格仅是他们的一半,优势很明显 2.中国自身市场巨大,足以养大国内企业。与许多国家不同的是,中国自身市场巨大,今后潜力更是可观,因此自身的市场就可以让国内企业养大,练强壮了再出国门竟争,这样更有把握,不像我国台湾地区和两欧等地,自身市场较小,市场要求又高,因此很容易一出来就夭折

3.中国产品已“与狼共舞”多年,练就了一定本领。

由于中国市场的诱惑,国外厂家“该来的都来了”,而中国的厂商十几年前就开始与进口的竟争,特别近几年,中国的仪器逐渐占据上风,根本就不惧怕进口的产品,现已由守转攻,迫使进口的也不断降价,甚至在中国设厂,如拓普康、宾得已分别在北京、上海设厂生产全站仪,但是南方公司已做好竟争的准备.严阵以待 4.中国的产品已在国际市场小 试牛刀。在国内竟争同时,中国测绘仪器已被动或主动地走向国际市场,早在上世纪九十年代中期,中国的水准仪、脚架附件就大批量出口,现在占据欧美一半以上的市场,这些技术含量不高的产品已被中国占据了优势,国外已很少厂家生产了。进入二十一世纪以来,中国的电子经纬仪、扫平仪、全站仪已崭露头角,小批量地销往美国、两欧、为南亚等地,销售量逐年上升。2003年,南方公司已主动参加德国测绘仪器展览会,产生小小的轰动,今年,还将参加美国、日本、德国三大国际展览,相信会有更大的影响力。 从与外商的交流,与进口产品的对比,通过国际市场的考察,对自身还是充满信心,觉得不出五年,中国产品完全可以达到进口的水平,完全可以在国际上大展身手. 知己知彼百战不殆,通过对测绘仪器行业市场的分析,希望以后的工作能有实质性的效果。

(三)工作中的不足与改进

跟其他同事相比,在天力发,我所取得的成绩是微不足道的,通过反思这段时间的得失,我认为自己在工作上还存在很大不足。

直处于沉睡状态,或许这是我开发客户速度缓慢的原因之一。

2、最近事情比较多,没有合理规划时间,工作条理性不强,就这样浪费了很多时间。有时候很多事情集中到一块了,感觉手忙脚乱,不知道从哪里下手,结果东一下西一下,什么都没做好,还没有效率。

3、在客户询价方面,没有引导客户去看报价表。自己在这方面也存在很大惰性,没有根据客户类型,制作具有针对性的报价表。

4、客户询价之后,没有及时跟进。经常是客户一个星期或更长时间之前询价,由于没有整理这些记录,结果客户要出货都不知道,没有及时主动联系客户,这样就跟很多机会失之交臂。

5、工作抓不到重点。有时候为了完成公司规定的拜访量,放下很多原来计划好的工作,结果预定的工作没完成,电话效果又不好。在这一点上,感觉是在被动的工作。

针对以上不足,我决心从下面这几个方面去改进: 首先,加强与客户的沟通与联系。拜访量还是要继续保持,但也要抽出一部分时间联系意向客户,随时掌握其最新动态,缩短与客户之间的距离。针对有过询价的客户,可以采取经常回访的方式,增进与客户的沟通与交流。

其次,尝试通过各种方式开发新客户,不能仅仅局限于电话和拜访,还可以尝试网络推广,或者是通过扫楼等方式。

再次,坚持今日事今日毕,并在下班前做好明天的规划。在上一份工作的时候,公司要求我们每天都要写工作总结,其中有一项就涉及“昨日计划完成状况”和“明日计划”,这样总结就具有针对性,哪些事完成了,哪些事还有待改进,都一目了然,纵然第二天事情多,也不会找不到头绪。

第四,针对不同客户类型,制作一份合理的价格表,引导客户自己查价格。这样一来方便客户,也节省了我们自己很多时间。

最后,增强自己工作的主动性,做事情要分清主次,尽量不受外界其他因素的干扰。同时,还要多与同事沟通,学习他们的优点,弥补自己的不足。

二、2012年工作规划 凡事预则立,不预则废2012年马上就要到来,应公司及个人发展的需要,我对自己在新的一年的目标和任务做了详细的规划。

(一)业绩规划 2012年元月份,国外圣诞节刚结束,又面临国内的春节,各个单位基本处于封帐期,不好出单,但是可以积极挖掘意向 2月初是中国的春节,国内大量厂商都已放假,发货量回落,篇四:天瑞仪器2011年度销售总结大会圆满闭幕

副总经理王耀斌在“2012年度销售思路报告”中,详细解读了公司2012年度销售工作思路、政策措施、模式调整、目标分解等。报告指出,2012年度,将逐步调整现有销售管理模式,完善销售体系、实现销售目标。

会议同时听取《事业部新模式运行报告》、《川渝区域5s运营报告》,报告详细阐述了2011年度,环保事业部及川渝5s店的运营成效、管理构成、存在问题、发展方向等事项。

新产品知识培训于22日-24日举办。产品培训会气氛火热,销售人员结合自己工作中遇到的各类技术问题,踊跃提问、积极探讨。

大会现场

产品培训现场,销售人员认真作笔记篇五:2013年度仪器管理工作总结 2013年度仪器管理工作总结

一个学年以来,我校仪器室工作在校长的精心指导下,依据学校目标管理方案,树立效率和超前意识,大力强化目标管理,努力创造条件,提高了管理水平,突出了仪器的使用管理环节,走科学化、规范化管理之路,使我校实验室工作从此走上了一个正规合理的台阶。现将2013年的仪器管理工作总结如下:

一、抓管理是负责人和管理员服务教育教学义不容辞的职责

1、实验室工作档案管理更加规范。为规范实验室的管理,整理好各种资料,实验室把每年的工作档案做进一步的整理和充实,装订成册、分类存放,便于查阅,充分发挥了档案在实验室工作中的作用。

2、严格制定教学仪器、设备借还制度,按照学校要求,学校领导的指示,我校始终以《教学仪器借还制度》为准则,各任课教师使用仪器需及时登记,用后督促归还,并检查仪器的使用情况,校外人员必须经校领导批准方可借用。

3、定期检查和维护,我们对教学器材实行定期检查和维护,每月进行一次,每学期期末清查一次。夏季气温高,空气湿度大,每周检查一次,开橱开窗通风,将易上潮的仪器进行晾干,以防霉变和生锈。损坏的仪器能维修的及时维修,保证不耽误教学需要。

4、严格仪器管理制度,每次使用仪器都必须登记,所有仪器要按要求贴有大类标签,各种教学器材存放整齐、有序,符合要求。

二、队伍是基础,管理是关键,使用更是关键的关键 不论是仪器的配备,还是仪器的管理,最终的落脚点还是在提高

学生的整体素质。

1、组织完善实验教学计划为实验教学提供了有力地保证。学校为开展好实验教学,专门安排分管领导进行专项检查,遇到问题现场办公,就地解决。每学期初,我们都依据教材的变化情况,修订实验教学计划,鼓励教师自制教具,以便更好地适应新形势下实验教学的需要。

2、积极配合任课教师,给他们准备好所用的仪器和材料,使他们能按时上课。对掌握不准的实验预先试做一下,看是否成功,然后再在课堂上做,以确保实验成功率。

3、狠抓实验教学的开出率和合格率。为促进素质教育的开展,培养学生的动手操作能力,学校狠抓了实验教学的开出率和合格率,及时检查学生的实验情况,保证实验教学高效地完成。

4、继续做好实验室安全工作。定期地对实验室工作进行检查,及时消除安全隐患。 总之,本学年仪器管理为学生带来学习上的帮助,管理制度与以前相比更加完善、更加科学。

推荐第3篇:实验室、仪器室工作总结

2017-2018年度第二学期永昌镇马珣教学点

实验室工作总结

本学期,在学校领导的检查、督促下,在新课程标准的指导下,学校实验室管理又得到了进一步的加强,切实保证了实验教学的开展,提高了科学课教学质量,培养了学生的科学探究潜质,使学生的科学素养得到了进一步的提高。

1、透过教研组组织科学教师认真学习新课程标准,认真学习实验仪器的规范使用,确保实验老师能够正确、熟练地使用好每件仪器,确保了实验的开出率和成功率。同时在实验过程中,教师能够指导学生进行规范操作,并同时做好实验记录。实验后,能够严格按照实验制度,整理好实验仪器,做好实验室的清洁卫生工作,使实验室经常处于开放、正常的使用状态。

2、实验是学生进行科学学习的重要途径,因此,为了让学生的实验质量有所提高,我们科学教师就认真钻研教材、大纲,认真学习新课程标准,认真学习自然教学改革的动向,以培养学生的动手潜质和创新精神为主,充分体现了让学生自主探究实验的潜质,培养了学生多方面的潜质。此外,我们科学老师互相听课,虚心学习先进经验,给自己充电,不断提高自身素质。

3、在教学过程中,科学教师充分利用仪器室的仪器,正因这些仪器能够让学生很好地进行操作,但是在操作过程上,由于有些仪器的经常使用,难免会出现各种误差及损坏,因此我们的科学指导教师就及时对仪器进行维护,排除故障,使仪器的作用得到了最大程度的发挥。同时我们自制了简易用的仪器来代替一些没有配备的实验仪器,也取得了良好的效果。

4、在实验教学过程中,教师善于总结学生的实验状况,让学生充分动手实验或设计实验,给学生充足的时间,让学生获得比较多的科学知识,对学生的实验过程及实验设想进行充分了解,并及时把这些活动以实验报告的形式进行记录。

5、各个科学教师按照实验目录要求进行实验,器材不足的主要用简易的自制教具完成,使得本学期实验开出率达100%。

在实验室管理方面,虽然取得了一定的成绩,但还存在着许多不足,有些仪器不能得到充分利用,对于实验仪器的操作使用还不能到达十分正确的程度,没有将实验室的最佳功能发挥出来,因此在以后的教学过程中,我们要改变这些缺点,充分发挥实验室的最佳效应,让实验室真正为教师和学生服务。

推荐第4篇:实验室、仪器室工作总结

实验室、仪器室工作总结

(2011-2012学年度第二学期)

本学期自己仍担任学校实验室、仪器室管理员,为进一步提高小学实验的管理水平和能力,以及实验室、仪器室材料实现科学化、分类、分档、档案管理,加强实验水平和实验效果,更好,更全面地实施素质教育,推进教育发展。为了按课程标准开齐开足实验教学课程,引导学生基本能亲手完成各个实验,形成一定实验技能,培养科学的实践,实验、观察能力。主要做了以下工作:

1、实验室、仪器室工作在校长及教导主任直接管理下,实验管理员具体管理实验室工作。

2、其管理具体工作为: (1)拟定科学教学计划,各年级科学教学工作须按计划进行实验教学,实验教学需填写演示实验计划、分组实验计划、演示实验单、分组实验单等表格。

(2)在进行实验教学前准备好实验所需仪器,材料,教师对每组实验有充分准备,精心设计实验步骤和实验过程,方法,写出相应实验方案,以保证实验的科学性,安全性及效果。

(3)在引导学生进行分组实验时,要求学生准备好相关的实验材料,以确保学生在实验中有物可做,并指导学生观察,讨论,得出相应的结论,完成实验教学。

(4)指导学生进行分组实验后,指导学生完成实验报告单(试验记录),并认真审阅,引导学生在实验、观察中养成科学的自然观和相应的实验能力。

(5)在实验教学、教研方面,以全体科学任课教师为组,进行相应的科学教学与实验教学研究,以不断提高科学学科教师的教学与实验能力。

3、材料归档

(1)按时将各类材料分类装订后归档,并按时填写相应试验开出数、开出率,完成实验室材料的归档管理,做到科学、规范,便于查阅。

(2)在材料归档的过程中注意材料的质量与数量应答相应要求。

4、实验室、仪器室器材管理

实验室管理人员除应管理好材料收发、入档工作外,还应管理好实验室的器材,仪器要及时上缴仪器室入柜管理。

(1)仪器(实验器材)的每日发放和收回工作,并作好相应发放,收回记录及损坏,修理等相应记录。

(2)作好相关实验器材的申报,采购,申购等工作。

(3)每周组织学生打扫实验室、仪器室,并处理好实验室,仪器室的用电,设备,器具的保管、管理、安全工作,以防意外事故发生。

5、其他相关工作

(1)加强自制教具在教学中的重要作用

本学期我们倡导师生共同开辟科学教学园地,收集材料,自己动手制作教具,改善实验条件。同时在实验教学中提倡“动手做”,让学生真正的参与科学探究的全过程,培养学生动手操作能力、创新能力。

(2)重视发挥电教手段,优化组合

科学教学中要优化组合教学手段,努力提高投影、录象、录音等电教手段在教学的使用率,丰富学生的感性认识,在培养和提高学生的思维能力的过程中发挥积极的辅助作用。

总之,本学期为了适应新课程标准的教学需要,激发每一们科学教师的教学热情,有创造性的进行教学研究,提高科学学科的教学质量做了上述工作。

史述红 2012.7.10

推荐第5篇:实验室仪器操作规程

101-A型电热鼓风干燥箱仪器操作规程

1、技术指标:最高工作温度:250℃

调温范围:室温~250

2、仪器使用环境要求:5℃-30℃

3、操作程序:

(1)通电前检查绝缘电阻须≥0.5MΩ,检查线路有无短路、断路现象 (2)合上闸刀开关,接通电源后,将控温仪选择盘设定所需温度,使其刻度相对,开启恒温1和加热2开关,控温仪表绿灯亮,红灯灭,炉丝通电,此时箱内开始升温。同时可打开鼓风开关,使其工作。随着炉温上升,温度指示针能及时显示测量温度值。当达到测定值时,仪表红灯亮,绿灯灭,切断加热电源,温度逐渐下降,将之设定值时,控温仪表又转至绿灯亮,箱内升温,周而复始,可使箱内温度保持在设定值附近

(3)初始加热时,由于热惯性,尽管炉丝臆断电,但箱内温度还会上升,故每次开机前最好把设定值设定在所需温度的80%左右,待几次开关动作后再把设定值定在所需值,既可避免开机的升温过冲现象(100℃之内冲击值一般不超过10℃)

(4)红绿灯交替半小时,观察插入排气空中温度计指示值是否与仪表指针或显示的温度是否相符。此时干燥先进入正常工作状态

(5)恒温时刻关闭加热2开关,只留恒温1一组炉丝工作,以免功率过大影响恒温灵敏度。

(6)试验室不宜开启箱门,箱内达到高温时开启箱门会是玻璃骤冷而破裂 (7)干燥箱连续工作时根据试品要求关闭电视,以延长电视寿命 (8)试品恒温完毕,关闭开关,同时拉下闸刀开关

4、维护与保养:

(1)该箱安放在室内干燥及水平处 (2)使用完毕,经常保持清洁

(3)在供电线路中安装闸刀开关,供此箱专用,并使箱体良好接地

5、注意事项:

(1)勿放入挥发性物品,以免发生爆炸 (2)鼓风机连续工作不能超过5h(如超过12h,需间隔1-2小时使用) (3)勿损坏漆层,以免仪器设备腐蚀

标准恒温恒湿养护箱

1、仪器型号:YH-40B

2、技术指标:控制湿度>90%

控制温度20℃

控制精度±1℃

3、仪器使用环境要求:5℃-30℃

4、操作程序: (1)将水箱注满水

(2)将温度选择键设置需温度

(3)接通电源,打开电源开关,工作正常后装入试块等进行养护 (4)放水时将箱后胶管摘下即可防水

5、维护与保养:

6、注意事项:严禁水箱无水,以导致烧坏加湿器

水泥标准稠度及凝结时间测定仪(维卡仪)操作规程

1、仪器型号:

2、技术指标:滑动部分总重量:300±1g 滑动部分最大行程:70mm

3、仪器使用环境要求:10℃-30℃

4、操作程序:

(1)使用前需将滑动部分注入少许润滑油,并检查是否能上下自由滑动。 (2)标准稠度的测定:将拌制好的水泥净浆装入以置于玻璃底板上的试模中,用小刀插捣,轻轻振动数次,刮去多余的净浆,抹平后迅速将试模和底板移到维卡仪上,并将其重心定在试杆下,降低试杆直至与水泥净浆表面接触,拧紧螺丝后,突然放松,使试杆垂直自由的沉入水泥净浆中。在试杆停止沉入或释放试杆30s时记录试杆距底板之间的距离,升起试杆后,立即擦净,整个操作应在搅拌后

的1.5min内完成。以试杆沉入水泥净浆并距离底板6mm±1mm的水泥净浆为标准稠度净浆。其拌和水量为该水泥的标准稠度用水量(P),按水泥质量的百分比计。

(3)初凝结时间的测定:试件在湿气养护箱中养护至加水后30min时进行第一次测定。测定时,从湿气养护箱中取出圆模放在试针下,降低试针与水泥净浆表面接触,拧紧螺丝后。突然放松,试针垂直自由地沉入水泥净浆。观察试针停止下沉或释放试针30s时指针的读数当试针沉至距离底板4mm±1mm时,为水泥达到初凝状态,由水泥全部加入水中至初凝状态的时间为水泥的初凝时间,用min来表示。

(4)终凝时间的测定:为了准确观测试针沉入的状况,在终凝针上安装了一个环形附件。在完成初凝时间测定后,立即将试模连同浆体以平移的方法从玻璃板取下翻转180℃,直径大端向上,小端向下放在玻璃板上,再放入湿气养护箱中继续养护,临近终凝时间每隔15min测定一次,当试针沉入试体0.5mm时,即环形附件开始不能在试体上留下痕迹时,为水泥达到终凝状态,由水泥全部加入水中至终凝状态时间为水泥的终凝时间,用min来表示。

(6)测定应注意:在最初测定的操作时应轻轻扶持金属柱。使其徐徐下降,以防试针撞弯,但结果以自由下落为准,在整个测试过程中试针沉入的位置至少要距

试模内壁10mm,临近初凝时间每隔5min测定一次,临近终凝时间每隔15min测定一次,到达初凝或终凝时应立即重复测一次,当两次结论相同时才能定为到达初凝或终凝状态。每次测定不能让试针落入原针孔,每次测定完毕须将试针擦净并将试模放回湿气养护箱内,整个测试过程要防止试模受振。

5、维护与保养:定期检查紧固件,发现松动,应及时拧紧,每次做完试验后所用配件应擦洗上油,防腐不得生锈。

6、注意事项:

水泥电动抗折仪操作规程

1、仪器型号:KZJ5000-1

2、技术指标:最大负荷:11.7MPA

5000N

示值误差<1%

3、仪器使用环境要求:10-30℃

4、操作程序: (1)接通电源。

(2)调整零点(调速配重铊,使游铊在“0”位上:主杠杆处于水平)。 (3)清除夹具上表面粘着杂物将试体放入抗折夹具内,并调整夹具将试件夹紧使主杆产生一个仰角(此仰角的大小根据试件存放天数和操作经验决定)。 (4)按动启动按钮指示灯亮(红)电机带动丝杆转动,游铊移动加载,当加到一定数值时,试体折断主杠杆右端定位针压合微动开关电机停转,即可在主尺刻度上读取抗着强度的数值。

(5)按压游铊上的按钮推动游铊回到“0”位上。 (6)试验完毕将仪器擦拭干净。

5、维护与保养:

(1)每次使用完毕应盖好,防止灰尘侵入 (2)仪器不应再有腐蚀气体和强磁场环境使用

(3)电动抗试验机的刀子和刀垫应定期用无水酒精蘸湿稠布擦拭防止刀刃接触部位沾染灰尘和油污

6、注意事项:

(1)指示灯不亮检查熔丝是否烧断

(2)电动抗折试验机主杠杆摆动不灵活,应查各刀是否落在刀座的V型刀垫中间

(3)游铊按钮失灵应检查游铊按钮部分是否有螺丝松动,或弹簧失效

电子天平操作规程

1、仪器型号:JM-BJS5001

2、技术指标:最大称重:5000g

可读性:0.01g

重复性:0.02g

线性:±0.02g

天平尺寸:Φ160

3、仪器使用环境要求:15℃-30℃

4、操作程序: (1)普通称重:

①在每次使用前,上电预热最少15分钟 ②清除秤盘上物体

③按TARE键,将天平清零

④如需称其他称重单位,按【UNIT】知道屏幕所指示的需要称重单位出现 ⑤在秤盘上放置待测物

⑥待OK指示稳定后读取重量度数 (2)使用容器称量:

①将容器放在秤盘上

②按【TARE】清零

③待OK指示出现后,将待测物体放在容器内 ④待OK指示出现后,读取待测物重量 (3)计件模式:

①按【TARE】将天平清零,如需要有容器称重话,将容器放在秤盘上,按【TARE】清零

②按【COUNT】天平显示QTY10,按【COUNT】键选择计件系数。计件采样系数有

10、

25、50、100表示计件采样的件数。采样越多,精度越高。按下【COUNT】件可循环选择

③按所选的采样系数,将同等件数的样品放在秤盘上或容器内,按【UNIT】键、天平显示试样件数。此时天平进入计件状态,显示屏单位为PCS ④将需要计件的物品放在秤盘上或容器内,当OK指示后即可度数 (4)百分比称重: ①按【TARE】将天平清零

②在秤盘上放置基准物品,待天平读数稳定后,按【PER】 ③移去基准物,天平显示0.000或0.000 ④将待测物放在秤盘上

⑤等到LED显示器显示OK指示后读取天平读数,此时现实的读数为相对于基准物品的百分比

⑥按【UNIT】后返回到普通称重模式 (5)检重模式

①设置合格物品的上下限值并启动检重模式 ②按【TARE】将天平清零 ③将待测物放在秤盘上

④观察天平显示,天平显示【LOW】表示所称物品重量低于下限值,天平显示【HIGH】表示所称物品重量高于上限值,天平显示【OK】表示所称物品重量在合格范围

5、维护与保养:

(1)日常维护:取下秤盘,完全擦出上面的污点和灰尘,不要使用水,建议使用酒精

(2)校准砝码:

①将天平接通电源,最少预热30min ②按【TARE】将天平清零

③按【CAL】键,天平显示全量程,按下【TARE】键显示半量程

④在天平秤上放置该型号半量程的标准砝码,按【CAL】进行外部半量程标准砝码校准。天平显示【ACAL】后显示半量程读数

⑤按【CAL】键,天平显示全量程,在天平秤盘上放置全量程的标准砝码后按下【CAL】键,天平显示【ACAL】后显示出全量程读数

6、注意事项:

(1)天平工作环境温度波动不能太大,不能超过5℃/H (2)首次使用或校准之前,应通电预热至少25min

雷氏煮沸箱操作规程

1、仪器型号:FZ-31

2、技术指标:时控精度误差<2%

升温时间:30min

试件容量:36个雷氏夹

3、仪器使用环境要求:10-30℃

4、操作程序:

(1)先将煮沸箱的四芯插入程序控制器上插座。 (2)接上电源,按电源开关,指示灯亮。

(3)先按着设定按钮,调置3.00然后放开调时按钮,即(两火一零)在调置3.30将设定按钮放开,本机设定信号开始程序工作,按\"工作\"按钮仪器开始升温。

(4)仪器停止工作后,应关闭电源开关,约5分钟后放掉水,打开箱盖冷却到室温时取出试件,待箱内余留水分自然蒸发后再盖上箱盖。

5、维护与保养:

(1)仪器增加水量180mm时以水温为20℃确定,如果水温低于或高于20℃,可通过减少加水量调节,也可通过程控上手动开关拔至ON位置,进行预热水温接近20℃加热完毕后,将开关拔至OFF (2)箱内未加水时,严禁仪器工作

6、注意事项:

(1)仪器工作时,请勿打开箱盖以免烫伤 (2)使用时应使主机控制器均可可靠接地

水泥胶砂搅拌机操作规程

1、仪器型号:JJ-5

2、技术指标:搅拌叶宽度135mm 壁厚1.5mm

搅拌锅容量5L

3、仪器使用环境要求:10-30℃

4、操作程序:

(1)接通电源,按机器右后方的控制箱上所标\"启动\"开关,搅拌筒的旋动方向必须同标记方向一致。

(2)砂罐内装入1350g标准砂,搅拌锅内装入水225g、水泥450g,将搅拌锅装入支座的定位孔中,顺时针转动锅至锁紧,再搬动手柄使搅拌锅向上移动处于搅拌工作定位位置。

(3)自动操作:将扭子开关1K拨至自动位置,按下程控器启动按键即自动完成一次工作。其程序是:低速60秒(其中后30秒同时加砂)→高速30秒→停止90秒(其中后5秒报警)→高速60秒→(其中后5秒报警)→结束。 (4)手动操作:将扭子开关拨至手动位置,本机即转动,根据试验需要,可任意控制低速和高速的转动时间,任意控制加砂时间的早、晚、长、短。扭子开关2K控制低速和高速。扭子开关3K控制加砂和停。

(5)达到搅拌时间后,按“停止”按钮。

(6)使用完毕,切断电源,彻底清除搅拌叶片及搅拌筒内残余砂浆,清扫散落及飞溅在机器上的砂浆及脏物。

5、维护与保养:

(1)每次使用完毕应擦拭仪器

(2)本机无外部加油孔,传功箱内涡轮付、齿轮付及轴承等运动部件每季加黄油一次,加油时、打开传动箱时即可,支座与立柱导轨之间,升降机构之间应经常滴入黄油,每年保养一次,将本机全部清洗加注润滑油和润滑脂

6、注意事项:机器运转时如遇到金属撞击噪声,应先检查搅拌叶与搅拌锅是否正常

雷氏夹测定仪操作规程

1、仪器型号:LD-50

2、技术指标:仪器测定范围:±25mm

3、仪器使用环境要求:

4、操作程序:

(1)雷氏夹弹性要求检验:将测定仪上的弦线固定于雷氏夹一指针根部,另一指针根部挂上300g砝码,在左侧标尺上读数。

(2)膨胀值测定:将沸煮箱中取出的带试件的雷氏夹放于垫块上,指针朝上,放平后在上端标尺读数,然后根据GB1346—89计算膨胀值。

5、维护与保养:

(1)垫块上不得有锈斑污垢等物

(2)用完后除标尺图防锈油并妥善保管,避免生锈和碰伤

6、注意事项:定期检查左壁架与支架杆的垂直度和各紧固件,是否松动

水泥细度负压筛析仪操作规程

1、仪器型号:FYS150B

2、技术指标:筛析测试细读:80μm

筛析控制时间:2min

工作负压可调范围:30±2r/min

3、仪器使用环境要求:温度10℃-35℃

4、操作程序:

(1)筛析试验前,调节数显式时间控制器,使其定时120S,再把负压筛放在筛座上,盖上筛盖打开电源,调节负压至4000-6000Pa范围内。

(2)称取试样25g置于洁净的负压筛中,盖上筛盖,再次启动仪器,连续筛析,在此期间如有试样附着在筛盖上,可轻敲筛盖,使试样落下,当筛析满120S后仪

器自动停止。

(3)筛毕用天平称筛余物重量。

5、维护与保养

(1)每次使用后,应用刷子从试验筛筛网两面较轻刷净。并把筛网对着阳光或灯光检查合格后把试验筛保存在干燥的容器或者塑料袋内。

(2)当试验筛堵塞时,可将其反置在筛座上,盖上筛盖进行反吸,然后再用刷子刷清,必要时也要把吸尘器吸管从旋风筒上拔下来,直接对着筛网进行抽吸,同时再用刷子刷净。若筛网堵塞严重,可先把试验筛放在水中浸泡了一段时间在刷洗。

(3)仪器使用完毕后关闭电源开关,并用抹布将仪器外表面擦抹干净。 (4)若发现收尘瓶中的水泥细粉快满时,应将收尘瓶从旋风筒上拔下来到掉后再装上去。

(5)吸尘器应注意定期清灰,以保持收尘袋清洁,确保负压值达到国标要求, 取下吸尘器时先将吸尘器电源插头从箱体内的插座上拔下,如此便能把吸尘器从箱体内的插座上拔下,如此便能把吸尘器从箱体内拿出来进行清灰了。

6、注意事项:仪器连续使用时间过长时需停机散热,以延长吸尘器电机寿命。

水泥胶砂流动跳桌操作规程

1、仪器型号:NLD-3

2、技术指标: 圆盘跳动落距:10±0.1mm

自停次数:30次

跳动时间:每秒一次

3、仪器使用环境要求:15℃-30℃

4、操作程序: (1)使用前接通电源。

2、将按规定配制好的水泥胶砂,分两层装入模内,进行捣压。

3、捣压完毕,取下模套,用制平刀将之刮平后将截圆锥模垂直向上轻轻提起,打开电机开关,电机开始转动。

4、跳动完毕,用分度值0.02mm的卡尺测量水泥胶砂底部扩散的直径与相对垂直的两直径的平均值为该水泥在该水量时的胶砂流动度,用mm表示。

5、仪器用完后,用湿布擦洗干净,然后将截圆锥模、模套、搞棒滑部分涂油,防止生锈使滑动自由。

5、维护与保养:

6、注意事项:

水泥净浆搅拌机操作规程

1、仪器型号:NJ-160

2、技术指标:公转:62±5r/min(慢)

140±5 r/min(快)

停:15s

公转:125±10r/min(慢) 285±10 r/min(快)

3、仪器使用环境要求:10-30℃

4、操作程序:

(1)先将三位开关(1K、2K)都置于停,再将时间程控器插头插入面板的“程控输入”插座,然后方可接通电源。

(2)打开电源,检查搅拌叶片运转方向是否正确。 (3)将控制面板上的控制开关扳至所需要位置。

(4)拌合时,先用湿布将搅拌锅及搅拌叶片擦干净,将装有试样的搅拌锅放到搅拌机锅座上,升至搅拌位置,开动机器。

(5)自动操作:把1K开关置于自动位置,即完成慢搅120秒、停10秒后报警5秒共停15秒、快搅120秒的动作,然后自动停止。每次自动程序结束后,必须将1K置于停,以防停电后程控器误动作。

(6)手动搅拌操作:把1K开关置于手动位置,再将三位开关2K置于慢、停、快、停,则分别完成各个动作,人工计时。

(7)停机后,取出搅拌锅,倒出试样,关闭电源,清洗机器。

5、维护与保养:

(1)每次使用完毕应擦拭仪器,擦干后套上护罩,防止落入灰尘 (2)本机采用分体式,如有损坏,更换非常方便

6、注意事项:机器运转时如遇到金属撞击噪声,应先检查搅拌叶以及时间继电器,均应调整间隙和搅拌时间

水泥胶砂振实台操作规程

1、仪器型号:ZS-15

2、技术指标:振动台振幅:15mm±0.3mm

振动频率:60次/60s±2s

3、仪器使用环境要求:10-30℃

4、操作程序:

(1)打开电源,检查振实台运转是否正常。

(2)停机后,在控制面板上设定本试验所要求的工作时间。 (3)将下料漏斗放在试模上方,卡紧在振实台的中心。

(4)将搅拌好的胶砂分两次均匀地装入下料漏斗中,开动振实台。 (5)振动完毕后,取下试模漏斗,关闭电源,清洗振实台。

5、维护与保养:

(1)每次使用完毕应擦拭仪器及时清理水泥砂浆,并擦干净 (2)控制器注意防潮

6、注意事项:

(1)计时器的接近开关与凸轮间的距离应保持在1-1.5mm,长期使用时应注意防止松动,以免出现故障

(2)工作时,卡具要锁紧以免出现故障

标准养护室温湿度控制系统操作规程

1、仪器型号:FHBS-60

2、技术指标:雾化量3kg/h

3、仪器使用环境要求:温度5℃-50℃

电源电压波动小于额定电压±10%

4、操作程序: (1)湿度参数设定

按下【湿度设定键】5s以上,上排显示“SET r”下排显示“HA 000”表示进入湿度参数设定程序 ①湿度上限【去湿】设定

【HA 000】表示进入湿度上限(去湿)的设定,按移位键(湿度设定键)和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ②湿度下限【加湿】设定

【HA 000】表示进入湿度下限(加湿)的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ③湿度上限回差值的设定

【HA 000】表示进入湿度上限回差值的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ④湿度下限回差值的设定

【HA 000】表示进入湿度下限回差值的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ⑤湿度测量误差的修正

【OE 00】表示进入湿度测量误差的修正,这要根据标准湿度值和实际测量值的误差进行修正,修正范围“-9.9——9.9”按移位键和▲▼键修正误差值,按确认键存入修正结果,同时进入下一级参数的设定 ⑥定时加湿关闭时常的设定

【OFF 000】表示进入定时加湿关闭时常的设定,按移位键和▲▼键设定为需要的时长,(单位为分钟,控制范围0—999分钟任选),按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ⑦定时加湿工作时长

【on 000】表示进入定时加湿工作时常的设定,按移位键和▲▼键设定为需要的时长,(单位为分钟,控制范围0—999分钟任选),按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 (2)温度参数的设定

按下【温度设定键】5s以上,上排显示“SET t”下排显示“HA 000”表示进入温度参数设定程序 ①温度上限【制冷】设定

【HA 000】表示进入温度上限的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ②温度下限【加温】设定

【HA 000】表示进入温度下限的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ③温度上限(制冷)回差值的设定

【HA 000】表示进入温度上限回差值的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ④温度下限(加温)回差值的设定

【HA 000】表示进入温度下限回差值的设定,按移位键和▲▼键,设定为需要的数值,按确认键存入此值,同时进入下一级参数的设定 ⑤温度测量误差的修正

【OE 00】表示进入温度测量误差的修正,这要根据标准温度值和实际测量值的误差进行修正,修正范围“-9.9——9.9”按移位键和▲▼键修正误差值,按确认键存入修正结果,同时进入下一级参数的设定

5、维护与保养:

(1)加湿器定期清洗换能片,当使用一段时间后水垢会沉积在换能片表面建议20天左右清洗一次

(2)定期清洗净水器滤芯,及时清洗滤芯污物。如长时间使用滤芯被污物阻塞,需要更换新的滤芯

3、注意事项:

上下限警报回差参数,温度湿度上下限警报回差是相同的

(1) 上限警报回差HAO:在实际控制时,当实际测量值大于“HA+HAO”时仪表即进入上线报警状态,当实际测量值小于“HA-HAO”时仪表才能解除上限警报

(2)下限警报回差LAO:在实际控制时,当实际测量值小于“LA+LAO”时仪表即进入下线报警状态,当实际测量值大于“LA-LAO”时仪表才能解除上限警报

混凝土含气量测定仪操作规程

1、仪器型号:HC-7L

2、技术指标:容积:7000ml

3、仪器使用环境要求:

4、操作程序:

(1)装混凝土拌合物分3层装入,每层到时候高度约1/3容器高度;每层装料后由边缘向中心均匀地插捣25次,捣棒应插透本层高度,再用橡皮锤沿量钵外壁击打10-15次,是插捣棒留下的插孔填满。最后一层装料应避免过满 (2)把仪器水平方式,用刮刀把多余的混凝土拌合物刮去,使其表面光滑无气泡,用洁布擦干净钵边缘,盖好盖,均匀拧紧固定上盖和量钵的卡子

(3)打开注水阀,拧开排气阀,用注水器从注水口注水,至水从排气口平稳流出,一边继续注水一边关闭注水阀,然后关闭排气阀和微调节气阀

(4)拧开手泵,用手泵打气加压使指针指到稍稍超过初压点位置,4-5s后用手指轻轻敲打表盘外侧,使指针稳定地指到初压点上,如果加压使指针真超过太多可以用微调阀配合手泵使指针稳定在初压点上,拧紧手泵

初压点:注水测定时读黑色刻度盘初压点为:表盘右下方0点一下1的位置

无注水测定时读红色刻度盘初压点为:表盘右下方0点位置

(5)平稳地按下平衡手柄,使气室里的压缩空气往钵里流动,4-5s,再按一下平衡阀手柄,用手指轻轻弹击表盘的边缘使指针稳定下来,此时表针所指示的既是所要测定含气量

(6)打开排气阀排出量钵内压力,松开卡子倒出量钵内的混凝土并清理干净。 (7)使用完后,拧松微调阀,排出气室内压力空气,使表针退回到垂直向下位置,否则会缩短仪器的使用寿命影响测量精度。用水将注水口的量钵内外的混凝土冲洗干净,然后用油棉纱擦干净放置。

5、维护与保养:

使用完毕后使表的指针回到垂直向下位置

6、注意事项:先排除钵内压力之后,再排除气室内压力。避免量钵内水泥浆导流近气室,导致仪器损坏

混凝土贯入阻力仪操作规程

1、仪器型号:HG-80

2、技术指标:

3、仪器使用环境要求:20±3℃

4、操作程序:

5mm的筛从拌合物中筛取砂浆、并拌和均匀,将砂浆分别装入三只砂浆筒中(150mm立方体试模)经振捣或插捣35次使其密实砂浆表面应低于筒口约10mm编号后至于温度20±3℃的环境中以待试验,在其他较为恒定的温度中进行试验时,应在实验结果中加以说明,实验用砂浆允许按混凝土中砂浆的配合比称料,用人工或机械充分拌合制取,从混凝土拌合完毕起经2h开始灌入度测试。 在测试前5mm再将砂浆筒底一侧垫高约500mm,使筒倾斜,吸取表面泌水,测试时砂浆筒至于测试平台上,按动置零键,是表盘显示为零,然后将测针端部与砂浆表面接触,按动手柄,缓慢加压经10s使测针灌入砂浆深度25mm是按动锁定键,即为灌入压力,工作完成后再按置零件。每支砂筒每次测1-2个点,此后每隔1h测一次,或根据需要规定测试的时间间隔,测点间距应大于20mm再临近初凝及中凝时应适当缩短测试时间加密测点、如此反复进行至灌入阻力大于28Mpa为止,测试过程中,根据砂浆的凝固情况参考表格规定更换测针 灌入阻力Mpa 测针载面积mm²

5、维护与保养:

6、注意事项:一次充电连续用48小时

0.2-3.5 100

3.5-20 50

20-28 20

混凝土渗透仪操作规程

1、仪器型号:HP-4.0

2、技术指标:允许最大压力4MPA/cm²

试模尺寸:175×185×150

3、仪器使用环境要求:0℃-80℃

4、操作程序:

(1)试件养护至试验前1d取出,将表面晾干并擦拭干净,然后将所用的密封材料(石蜡与火漆的重量比4:1, 石蜡与松香的重量比5:1,也可以用沥青材料)放在平底小铁盘内进行加热融化。待完全溶化有,将时间侧面放在熔化后铁盘内进行均匀滚涂一层

(2)用螺旋加压器或压力机将涂有密封材料的事件压入预热的抗渗透试件套内(预热温度50℃),要求试件与套件的底面压平为止,待试件套稍冷却后即可除压力

(3)排除渗透仪管路系统中的空气,并将密封好的试件安装在渗透仪上 (4)当6个试件中有三个试件端面呈渗水现象,即可停止试验,记下当时的水压,如加至规定压力,在8h内6个试件中表面渗水的试件不超过2个时,或加压到1.2mpa,并经过8h持压渗水试件任不超过2个时,也应停止试验,记下此时的水压力

(5)试验过程中,如发现水从试件周边渗出,则应重新查封

5、维护与保养:

(1)齿轮箱内应注入一定量的机油,是齿轮浸入机油内1.5公分为宜(仪器出厂时已注入),正常使用情况下每年更换一次

(2)水泵的活塞及两个导柱,每天工作前加机油润滑一次,以期延长水泵寿命 (3)每次实验完毕后,应将压力容器管道阀内的水通过排污阀排尽 (4)试模及试模座擦净,并涂防锈油脂保护 (5)停用期间加盖防尘罩保护

6、注意事项:

(1)本机具有防误操作记忆功能,试验结束或实验中,需变换上下限压力时,先设定好上下限压力,在显示系统压力时,切断电源后再按通,即可改变上下限压力

水泥混凝土振动台操作规程

1、仪器型号:ZHJ-A

2、技术指标:振动频率:2860c/min 振幅0.3-0.6mm

振动器功率:0.55kw

3、仪器使用环境要求:温度10℃-35℃

4、操作程序:

(1)接通电源,首先检查仪器运转是否正常。

(2)将装满水泥混凝土的试模,紧固在振动台表面上。

(3)开动振动台,直至水泥混凝土表面出现乳状水泥浆时为止(振动过程中随时添加混凝土使试模常满)。

(4)振动结束后,将试模搬至合适位置,关闭电源,清洗振动台。

5、维护与保养:

(1)振动器轴承应经常检查,并定期拆洗,更换润滑油,是轴承保持良好的润滑,延长振动器的使用寿命

(2)振动台应有可靠的接地线、确保安全

6、注意事项:振动台在振实过程中,混凝土制品应牢固的紧靠在震动台面上、所需振实的制品放置要与台面对称,使负荷平衡,振实制品的紧固装置,可根据需要自行设置

砼搅拌机操作规程

1、仪器型号:HJW-60

2、技术指标:进料容量:96L

出料容量:60L

搅拌均匀时间≤45s

3、仪器使用环境要求:温度10℃-35℃

4、操作程序:

(1)启动前先检查旋转部分与料筒是否有刮碰现象。 (2)清理料筒内杂物。

(3)启动前应将筒体限位,方能启动。 (4)清除金属或其它杂物,装入砼材料。

(5)根据搅拌时间调整定时,必须在断电情况下调整。

(6)按起动按钮,主轴便带动搅拌铲运转,达到调整时间后自动停车。 (7)卸料时应先停机,打开锁定销,搬动手柄使料筒旋转到一定位置,再使锁紧销定位旋转主轴,使拌和料排出筒外。

(8)拌和料排净后手动使筒体复位,将搅拌筒用锁定销定位。 (9)清洗料筒。

5、维护与保养:

(1)根据使用情况对轴承部件定期进行润滑,定期检查机器的密封情况,图有松动应及时拧紧,经常检查控制系统是否接触良好和干燥

(2)搅拌机长使是用后,铲片与搅拌桶会磨损,根据磨损情况进行调整或更换

6、注意事项:在搅拌过程中切勿将手和棒状物插入桶内以免发生危险

万分之一电子天平操作规程

1、仪器型号:JF2004

2、技术指标:秤盘尺寸:Φ90mm

最小读数:±0.0001g

称量室尺寸:155×185×225

3、仪器使用环境要求:温度5℃-40℃

湿度50-60%

4、操作程序: (1)校准

校准前将天平预热1小时。 称盘空载:

按【ON/OFF】健开显示;显示自检方式;约1秒左右,显示“0.0000” 按【CAL】 键进入校准方式; 显示“CAL in”等待下一显示

显示“CAL dn”时将天平右下侧手柄轻轻向外拉,拉不动时为止。此时已将砝码加到称量机构上

显示“CAL„”等待下一显示

显示“CAL up”将手柄轻轻向里推,推不动为止 显示“CAL„”等待下一显示 显示“CAL end”

1s后,显示“0.0000” 天平进入称量状态,可以进行称量 (2)一般称量

①按【on/off】键,显示自检方式,1s后显示“0.0000”

②将物品放到秤盘上,轻轻地关上防风门,显示稳定符后读取称量值 ③取下物品后,显示“0.0000” (3)使用容器称量

①将容器放到秤盘上,显示容器质量,按【TARE】键,除掉容器重量显示“0.0000” ②将物品放入容器中。显示稳定符后读取称量值

③称量结束后,将秤盘上的所有物品放下,按【on/off】关显示,显示待机符 (4)增重称量

称量两种以上物品在混合钱各自的重量,使用增重称量 ①将容器放到秤盘上,先是容器重量

②按【TARE】键,显示“0.0000”,容器内加入第一种物品。显示到标定重量时,停止添加

③按【TARE】键,除掉显示的重量,再次显示“0.0000”。向容器内加入第二种物品,显示这次假如物品的重量。显示到标定重量时,停止添加;按上述步骤继续操作,直到完成为止 (5)减量称重

①将装有物品的容器放到盘上,显示总重量“86.7300”,按【TARE】键,除掉显示的重量,显示“0.0000”

②从容器内向外提取物品,显示被提取物的负重量值。显示到标定重量时,停止提取

(6)底钩称重

将天平称量室(带有玻璃罩部分)外移出工作台的边,已将秤盘中心移出为准。这是天平底部有一圆形塑料盖

将塑料取下,内有一带口的底钩称量装置,在底钩的孔上穿一细线,将天平放在有孔的工作台上,将底钩口对正工作台上的孔,实现穿过工作台上的孔,在线的下端系一盘状容器

①按【TARE】键,显示“0.0000”,将物品放入容器中 ②记下物品在空气中的重量 A=10.0000g ③按【TARE】键,除掉显示的重量,显示“0.0000”

④将物品连同容器一起浸入10℃的水中,显示被排出水的重量值 B=-0.46619g ⑤计算被排出水的体积:C=0.4662cm³

计算比重:10.0000g÷0.4662cm³=1.45g/cm³ 根据结果可判定物品是“铂”

5、维护与保养:不要将天平长时间曝露在高温或有粉尘的环境下

用完天平后最好将其罩上,以免灰尘进入

清洁前应将电源线拔下,不要用腐蚀性清洁剂

6、注意事项:当天平从一较冷环境移到另一暖环境时,空气中的水分会在天平内部凝结,以至影响称重的精准性。应将天平在室温下不插电放置2h,然后再插上电源

电动钢筋标距仪操作规程

1、仪器型号:BJ-10

2、技术指标:打印标距:5mm 10mm 尺寸外形:630×230×300mm

3、仪器使用环境要求:10℃-30℃

4、操作程序:

(1)首先确定标距。调整标距的方法是松开打印总成两侧的固定螺丝,锥杆套移向左端为10毫米,移向右端为5毫米再把螺丝紧固。

(2)提起锥杆提升手柄把钢筋调直放入V形槽内(罗纹钢直线边向上)紧固好。 (3)落下手柄旋转左端的小车轮,使锥杆处于最低处,调整高度调节手柄使锥尖接触钢筋后再继续下调1—2毫米,以确保锥头有足够的打入钢筋的余量。 (4)提起手柄接通电源,把方向开关拨到左行位置,开启电源开关。电源指示灯亮,如果打印总成在中途位置,工作指示灯也亮。同时打印总成行至最左端自动停止,工作指示灯灭。

(5)落下锥杆,把方向开关拨到右行位置,按一下右行按钮待电机正常运行后,松开按钮,打印总成行至最右端,自动停止。

(6)提起锥杆,松开紧固螺丝,取出钢筋,打印完毕。再把方向开关拨到左行位置,按一下左行按钮,电机运行后,松开按钮,打印总成行至最左端自动停止,以保持下一次工作的准备状态。

5、维护与保养:用完后涂防锈油并妥善保管,避免生锈和碰伤

6、注意事项: (1)使用前可靠接地

(2)左行时必须提起锥杆,且严格按照操作方法去操作,一旦误操作,将损坏电机电器

电子秤操作规程

1、仪器型号:

2、技术指标:

3、仪器使用环境要求:

4、操作程序:

1、使用电子秤前,请先温机15-20分钟,打开电源时,称盘上请勿放置任 何东西。

2、将电子秤置于平坦桌面上,调整脚螺旋使电子秤水平。

3、开电源开关,电子秤自动显示\"0\",开机后,可直接按\"单位

转换\"健来选择需要的单位,电子秤会记忆所选用的单位,待下次开机会直接出现开机前的单位状态。

4、将物品放在称盘中心,且称物不超出称盘范围,以保证其准确度,待重 量显示稳定后,所显示的数值便是物品重量。

5、需要扣重时,将包装容器置于称台上,待重量显示稳定后,按\"扣重健\"。将待称物品放在容器内,则电子秤将显示物品之净重。

6、所称物品超出感量后,蜂鸣器发出叫声,应立即取下物品,尽量避免所称之物超出量程。

推荐第6篇:仪器校准实验室

仪器校准实验室 测量仪表精确性

您有停下来思考过关于每条使用的仪表矫正的重要性吗?你可能没有意识到,但我们确实有很多要读数及测量的设备。就如同每家的水表、天然气表、电表,超市里的磅秤、燃油泵、甚至是赌场的游艺机都需要完美、准确的数值。 这些仪表的精确性对每位客户都至关重要。(毕竟,没人希望他的油泵以负荷10加仑运行计量,而它其实只分配了9.5加仑)大型公司对这也很感兴趣。制药公司及食品公司需要精确测量各锅炉配料量,而供应商和制造商应当准确地测量读数,以确保发送及接收适量的原材料。

当然,政府也非常重视仪表的校正,而这主要是由于税收问题。如果加油站或事业单位给客户提供低于或高于常规的价格,政府行政部门就很难估算、协调并征收税款。因此,在每个国家,政府筹建的计量实验室负责校正所有与财政相关的仪表设备。

计量实验室

计量,是一门科学测量的学问。尽管,制造商对产量、校准负责,遵从设备要求,计量实验室必须证实制造商说明书上关于仪器仪表的准确度。以配备专用控制系统及实时数据库的专业测试站,记录并存储测试数据。控制系统调控测试站,以精确的步骤逐条执行,以便证实制造商说明书中的精准度。控制系统也必须详细记录每条测试,并评估每台仪表校准。

计量是产品质量的重要保证,计量是客观评价产品优劣的最终技术手段,计量校准是控制生产过程工艺参数,确保加工质量的主要技术措施。计量校准,作为ISO9001认证及审厂的重要内容已日益被工厂重视。

我们遇到许多客户,由于公司选择计量校准服务机构时未能全面考核该机构的资质、能力以及其技术匹配性,受某些计量机构业务人员的误导或过分看重校准费用,选择一些名不符实的计量机构,一方面因数据缺乏科学性而误了质量大事,另一方面更因其校准结果不被相关审厂机构或客户所认可而误了订单,损失不可谓不重,教训不可谓不大!

站在企业的立场上,如何选择计量机构呢?以下三个方面都很重要:计量机构的资质及能力,计量机构的设备资源及参数精度,计量机构的服务水平及配合度。

1.计量机构的资质及认可项目:

一看其是否取得CNAS认可及其他方面的认证;

二看其CNAS认可项目是否覆盖贵司仪器校准范围,同样是一份CNAS认可证书,但对应的能力认可范围有多有少;

三看其技术人员是否有校准资格证;现在体系外审和客户审厂越来越注重校准证书上是否带有CNAS LOGO?无CNAS LOGO的证书只相当于一份普通的证书或报告,结果不具有公信力。

四看其注册资金。某些计量机构的注册资金只有几十万元,要考虑到如果弄丢或者弄坏贵司一台贵重仪器时,能否赔偿得起?

2.计量机构的设备资源及参数精度:

一看其设备清单,具有那些仪器及标准件,是否覆盖贵司仪器要求;

二看其参数是否满足贵司仪器的技术精度要求。

3.计量机构的服务水平及配合度:

一、看其提供的报告,所校准的参数、取点/通道是全面符合检定规程要求;

二、看其技术人员的学历、职称及科研能力;

三、看服务期限,能否提供现场校准、仪器取送、加急服务等配套服务;

四、看能否提供一站式服务,如分包、维修、培训、咨询、产品测试、认证代理等;

五、看其程序文件是否完备,如《投诉处理程序》、《不符合检测和校准工作的控制程序》、《改进控制程序》、《纠正措施控制程序》等。

另外,按照《中华人民共和国计量法实施细则》第十一条、第十二条,以及国家质量技术监督局《关于企业使用的非强检计量器具由企业依法自主管理的公告》,一般工厂的仪器校准是从品管的角度出发而进行的溯源活动,而非国家强制要求

的检定活动(不属于贸易结算、安全防护、医疗卫生、环境检测等的强检范畴),故贵司有权自由选择政府或其他校准机构服务,而非政府执法行为。

企业计量工作方面的原始记录主要有:

(1)企业所使用计量器具(包括标准器),检验设备的检定记录,校准、维修记录,合格证书及测试报告;

(2)各类计量检测记录,原始报表记录;

(3)主要工艺过程控制和产品质量主要参数检测记录等。

企业还应建立计量管理、技术档案。主要有:

(1)计量机构和人员清册;

(2)计量器具台帐;

(3)计量器具发放帐和借用帐;

(4)年(月)度计量工作计划、总结;

(5)计量标准和仪器技术资料(包括随机技术文件资料);

(6)自行设计的量、检具图样、技术文件等;

(7)上级计量部门下发的文件;

(8)各类历史记录卡(计量器具履历卡)等。

凡计量标准器和大型精密计量仪器、检验设备,需按台(件)建立档案。档案内应装有:计量仪器说明书,检定(或校准)合格证,历史记录卡,修理记录,各类有关计量标准以及使用维护记录等。

企业的计量管理、技术档案和原始记录均应指定专人(或兼职)负责妥善保管。并制定有保管、借阅、归还制度,明文规定保管期限及销毁办法。

计量器具校准规程

校准规程

1目的

2适用范围

3引用标准

4环境要求

5校准用基准物质(设备)

6仪器校准步骤

7相关记录

一些仪器校准比较多的单位为便于管理,采取了突出重点、兼顾一般的ABC分类管理方法。

A类测量设备,量虽然不多,但使用的位置和用途非常重要,作为重点管理。

B类测量设备,数量比较多,但在准确度等级和位置的重要程度方面都不高,可进行一般性管理。

C类测量设备,数量也比较多,但基本都是一些监视类仪表,准确等级较低,确认时采取一次性检定或校准的方法,损坏后更换,不用实行周期检定,可对其进行简要的管理。

ABC类管理目前在企业内使用广泛,如和标记管理结合起来加以辨别,只需在标记上印有明显的A、B、C字样即可。

A、B、C管理的分类方法是:

(1)A类测量设备

◆企业的最高计量标准和用于量值传递的测量设备,经认证授权的社会公用计量器具,列入强制检定目录的工作测量设备。

◆企业用于工艺控制、质量检测、能源及经营管理,对计量数据要求高的关键测量设备。

◆准确度高和使用频繁而量值可靠性差的测量设备。

(2)B类测量设备

◆企业生产工艺控制、质量检测有测量数据要求的测量设备。

◆用于企业内部核算的能源、物资管理用的测量设备。

◆固定安装在生产线或装置上,测量数据要求高,但平时不允许拆装、实际校准周期必须和设备检修同步的测量设备。

◆对测量数据准确可靠有一定要求,但测量设备寿命较长,可靠性较高的测量设备。

◆测量性能稳定,示值不易改变而使用不频繁的测量设备。

◆专用测量设备、限定使用范围的测量设备以及固定指示点使用的测量设备。

(3)C类测量设备

◆企业生产工艺过程、质量检验、经营管理、能源管理中以及在流程生产线和装置上固定安装的,不易拆装而又无严格准确度要求的,仅起显示作用而无量值要求的指示用测量设备。

◆测量性能很稳定,可靠性高而使用又不频繁的,量值不易改变的测量设备。

◆国家计量行政部门明令允许一次性使用(如玻璃直尺校准)或实行有效期管理的计量设备(如水表)。

推荐第7篇:中药实验室仪器

中药鉴别、分离、分析所需仪器

鉴别仪器

一般为光谱和色谱仪器 1 高效液相色谱仪

2 紫外可见分光光度计

(已有752型)近年来,紫外、可见色谱法鉴别中药比较常见。

4 此外,还有差热分析仪、X射线衍射仪、扫描电镜、核磁共振分析仪等,这些仪器一般价格昂贵。

质量控制

1 紫外-可见分光光度计

(该仪器是中药及其制剂质量分析中比较常用的仪器,具有灵敏度高、精密度好、操作简单等优点) 目前试验室已经拥有一台725型紫外-可见分光光度计,此外扫描型的分光光度计也应用较多,条件允许的情况下。

2 高效液相色谱仪:中药样品中含有的成分绝大多数都可以在高效液相色谱仪中检测,因此,高效液相色谱仪在中药分析、鉴别等应用最广。

3近红外光谱分析仪:(操作简单、分析迅速、实时反映被测对象状态,不破坏样品、不需对样品进行预处理。) 4 气相色谱仪 (主要用于挥发性成分测定)

5 原子吸收光谱仪 (它能测定几乎全部金属元素和一些半金属元素,主要用于中药及其制剂中微量元素的测定;还有重金属测定。) 6 荧光分光光度计 :(主要用于中药及其制剂中胺类、甾体类、维生素、蛋白质、氨基酸和酶等的分析;还有中药及其制剂中微量、痕量物质的分析。) 提取分离常用仪器

1 旋转蒸发仪 (回收试剂、浓缩溶液,实验室已有此设备) 2 水循环真空泵 (辅助设备。实验室已有) 3 真空干燥箱 (干燥设备,已有)

4 电热恒温鼓风干燥箱 (干燥设备,实验室已有) 5 真空冷冻干燥箱 (干燥设备,价格昂贵,能耗较高) 6 制备型高效液相色谱仪

推荐第8篇:实验室仪器设备管理

实验室仪器设备管理办法

第一章 总则

第一条

根据教育部《高等学校仪器设备管理办法》(教高[2000]9号)文件精神,结合学校仪器设备管理的实际情况,制定本办法。

第二条

本办法所称仪器设备是指利用财政资金购置、国家调拨、自筹、接受捐赠和自制等渠道添置,以及科研课题合同内购买且属于学校产权的实验室仪器设备,其它属于学校产权的仪器设备。包括:仪器设备(含软件)、低值耐用品、易耗品。

第三条

仪器设备的管理分为技术和经济管理。

技术管理包括:实验项目方案论证与建设计划编制;仪器设备招标采购(包括验收、安装、调试);实验项目开发和技术改造;使用运行和日常管理(如维护、维修和安全管理等);仪器设备状态的技术鉴定等。

经济管理包括:资金的筹措与合理投向;仪器设备维修和改造资金的控制使用;仪器设备有偿使用和对外社会服务的管理;仪器设备的处置(如对外捐赠、出售、报废和报损)等。

第四条

学校鼓励和支持单位和个人利用科研和自筹经费购置仪器设备。 第五条

仪器设备的管理,应以满足学校教学、科研为主,兼顾对外服务需要,努力实现国有资产的保值增值,积极挖掘设备潜力,发挥资源效能,为学校发展提供保障。

第二章 管理体制

第六条

学校仪器设备管理实行校、系(部、处、中心)、实验室三级管理体制。由一位校领导分管仪器设备工作,实验室与设备处为学校仪器设备的主管部门,负责全校仪器设备的管理。各系部有一名行政领导负责本单位实验室设备管理工作;各实验室都要有一名设备管理员,具体负责本实验室设备管理工作。

第七条

实验室与设备处对仪器设备的管理职责

(一)编制全校仪器设备购置计划,管理设备费使用,负责组织全校仪器设备的采购;

(二)负责全校仪器设备的帐目管理,保证仪器设备国有资产完整;

(三)负责组织全校仪器设备维修和技术改造工作;

(四)负责仪器设备事故统计和处理工作;

(五)负责组织全校仪器设备的处置工作;

(六)负责800元(含)以上仪器设备的出入库管理;

(七)负责起草有关仪器设备管理文件,并监督各单位的执行。第八条

各系(部、处、中心)对仪器设备的管理职责

(一)编制本单位实验室仪器设备购置计划,参与相关仪器设备的采购,重点负责技术条款;

(二)负责本单位仪器设备帐目管理,保证仪器设备资产完整;

(三)负责组织本单位实验室仪器设备使用管理及维修和技术改造工作;

(四)负责报告并协助实验室与设备处,查明仪器设备事故原因,并负责提出事故处理意见;

(五)协助实验室与设备处处置相关仪器设备;

(六)负责800元(含)以下(低值耐用品、易耗品)出入库管理;

(七)负责制定本单位实验室仪器设备现场使用管理文件,并监督各实验室管理员执行。

第九条

各实验室设备管理员对仪器设备的管理职责

(一)参与相关仪器设备的采购,重点负责技术条款;

(二)负责本实验室仪器设备帐目管理,保证仪器设备资产完整;

(三)负责本实验室仪器设备使用管理及维修和技术改造工作;

(四)负责本实验室800元(含)以下(低值耐用品、易耗品)使用管理;

(五)负责培训本实验室其他仪器设备操作人员(如教师和学生等),监督有关仪器设备现场使用。

第三章

仪器设备的分类与管理

第十条

仪器设备分为一般仪器设备和专用仪器设备。

一般仪器设备是指办公和业务用通用设备、交通工具、通讯工具、家具等。 专用仪器设备是指各种具有专门性能和专门用途的设备,包括各种仪器和机械设备、医疗器械、文体设备等。

第十一条

使用期限在一年以上,一般仪器设备单台价值在500元(含)以上,专用仪器设备单台价值在800元(含)以上,能独立使用的教学、科研、生产及行政办公仪器设备(含软件),由学校统一建账管理。 其中,单台价值在人民币10万元(含)以上的仪器设备为省管贵重仪器设备。单价在人民币40万元(含)以上的仪器设备为教育部管贵重仪器设备。贵重仪器设备的管理执行学校《贵重仪器设备管理细则》。

第十二条

一般仪器设备单台价值在500元以下,专用仪器设备单台价值在800元以下的,由使用单位统一建账管理,并在实验室与设备处备案。管理办法执行学校《低值耐用品和易耗品管理办法》。

第四章

实验技术研究项目立项和管理

第十三条

学校鼓励和支持教师和实验技术人员自制教学科研仪器设备,具体办法执行学校《实验技术研究项目管理办法》。

第五章

仪器设备的采购

第十四条

仪器设备采购办法执行学校《仪器设备采购管理方法》。

第十五条

单价在5000元(含)以上的仪器设备,入库前必须交有关技术资料(使用说明书、图纸、装箱单、检测合格证等),由实验室与设备处统一存档,使用时借阅。常用的资料可复印,交使用单位保管。

单价在5000元以下的仪器设备的有关技术资料(使用说明书、图纸、装箱单、检测合格证等),由使用单位存档。

第六章

仪器设备的使用管理

第十六条

实验室与设备处应根据学校学科和专业发展需要,统一规划实验室建设,整合资源,优化配置,在充分进行分析论证的基础上,经主管校长批准,可以对学校仪器设备资源统筹调配。

第十七条

使用单位负责仪器设备的具体使用管理。主要工作包括:

(一)制定各项实验室及仪器设备现场使用管理制度,包括仪器设备安全操作规程等;建立仪器设备使用、维护和维修登记制度,并及时填写使用手册,存档管理;

(二)建立和管理在用仪器设备及备(附)件的台账及卡片;

(三)建立仪器设备管理责任人制度,做好仪器设备及备(附)件的领用管理;

(四)对仪器设备定期检查,做好维护和保养工作;发生故障和事故要及时报告并申请维修;

(五)落实实验室及仪器设备安全和环保措施;

(六)对操作人员进行技术业务和安全培训及考核。第十八条

学校实验室实行准入制度。实验技术人员、实验指导教师以及学生进入实验室操作设备,应了解仪器设备工作原理,掌握仪器设备安全操作规程,严格规范操作。

实验过程中实验技术人员要亲临现场。

第十九条

学校各单位之间借用仪器设备,必须填写《仪器设备外借单》,经实验室与设备处批准,办理借用手续;学校各实验室之间借用低值耐用品,由系部主任批准即可。

第二十条

学校仪器设备原则上不借予校外单位,以及校内自负盈亏经营单位。 学校鼓励实验室在完成教学、科研任务的前提下,开展对外服务工作,为地方经济建设和社会发展服务。开展对外服务必须保证国有资产的保值增值,执行学校有关规定。

第七章

仪器设备的故障报告与处理

第二十一条

由于器件的老化、元件失效、零件磨损以及产品自身品质缺陷致使设备在正常条件下工作时出现异常或不能工作视为故障。

第二十二条

故障的报告及处理程序

(一)故障发生后,操作人员应立即停止操作,并采取应急措施。若是一般性故障,在确实有把握的情况下,可以查明原因,排除故障,重新工作。故障及处理情况要向设备管理员报告。若是较大的故障,无法排除时,设备管理员应立即填写《仪器设备维修申请单》,经单位主管领导核实情况后,在48小时内报实验室与设备处申请维修。

(二)不论设备故障大小,设备管理员都要如实填写使用手册。

第八章 仪器设备的事故报告与处理

第二十三条

由于违章操作、工作环境不达标(电参数不符、潮湿、粉尘度高等)、跌落、撞击、丢失等人为原因造成的设备损坏或功能消失应视为设备事故。

第二十四条

事故的报告及处理程序

(一)事故发生后,操作人员应立即停止操作,采取应急措施,避免事故扩大,保护现场,并立即向单位主管领导和实验室与设备处报告。不得缓报和瞒报。设备管理员要如实填写使用手册。

(二)对事故的处理,要坚持“三不放过”的原则:不查清事故原因不放过,责任者及群众未受教育不放过,没有整改措施不放过。

(三)实验室与设备处应立即派人去现场了解情况,并组织专业技术人员分析事故原因。

(四)根据对事故的调查和分析,公正地确定主要责任者及连带负责人,由责任单位明确提出处理意见报实验室与设备处,实验室与设备处签署意见后报主管校长。

(五)责任单位和责任人要吸取教训,写出书面分析报告,提出整改意见。责任单位要加强管理,积极开展安全知识培训,教育职工牢固树立安全生产意识,掌握安全生产知识,养成安全生产习惯。

第二十五条

设备事故的处理

(一)对于事故责任人的处理,应根据损失价值、造成后果和本人态度等依学校有关规定给予批评教育或行政处分。

(二)对于客观反映事故情况并主动承担责任的,经济赔偿从轻处理,职工责任者赔偿30%的损失价值(除本条

(四)款规定外);学生责任者赔偿10%的损失价值。

(三)对于有隐瞒不报、弄虚作假、破坏现场、嫁祸于人等行为者,赔偿100%损失价值(含使用误时损失费)。

(四)对因工作需要并根据学校规定,职工个人领用的计算器、笔记本电脑、收录机、照相机、万用表等仪器设备发生丢失,赔偿100%损失价值。

第九章

仪器设备的维修与处置

第二十六条

仪器设备的维修办法执行学校《仪器设备维修管理方法》。 第二十七条

仪器设备处置办法执行学校《仪器设备处置管理方法》。

第十章

计算机软件管理

第二十八条

计算机软件的立项申请、审批、采购等参照仪器设备管理相关规定。

第二十九条

购置计算机软件应要求供应商提交下列材料:

(一)软件产品著作权归属的有效证明材料;

(二)提供包括产品服务期间和升级费用等后续服务能力的说明或承诺材料。

第三十条

使用单位要保护好正版计算机软件介质。原版计算机软件母盘要专门归档管理,通常可借用复制盘。 第三十一条

使用单位应严格执行《计算机软件保护条例》规定。若利用软件从事商业性技术开发或向他人提供有偿服务等,要遵守国家相关知识产权规定以及相关软件买卖合同约定。否则,若造成学校丧失软件合法版权,或给学校带来其他损失,将追究当事人和管理者的责任。

第十一章

附则

第三十二条

学校各单位行政办公仪器设备的管理参照本办法。 第三十三条

学校以前有关文件与本办法不一致的,以本办法为准。 第三十四条

本办法由实验室与设备处负责解释。

第三十五条

本办法自公布之日起施行,2003年4月14日印发《华北航天工业学院仪器设备管理办法》(华航院字[2003]027号)同时废止。

推荐第9篇:实验室装备工作计划

一、加强专项建设项目的建设与管理,确保2011年建设任务的完成

1、加强校级重点实验室建设,为我校打造科研特色、创建优势学科和专业提供的科研平台。

2、加强申报设备购置计划的时效性,根据经费计划,广泛调研、充分论证,及时制定和上报设备购置计划。

3、加强设备购置计划执行的严谨性,强化设备采购的过程管理,严格招投标制度。

4、加强设备购置过程中的后期管理,对购置的设备及时安装调试和合格验收,严格购置设备的质量标准,确保购置设备的质量。

二、实验室建设与管理

(一)加强实验室内涵建设,努力提高实验教学质量和水平

1、以基础、专业实验室合格评估要求为标准,创建示范性教学实验室建设,使我校实验室管理逐步实现标准化、规范化、制度化。

2、通过2011年实验室建设,为增加实验项目中综合性实验和设计性实验的开设比例创造条件。

3、为实验室开放创造硬件条件,丰富开放内容,积极探索研究性实验项目,充分发挥学生的科研精神和探索精神,让更多的学生在实验研究中得到锻炼和提高。

4、加强实验室环境建设和条件建设,创造文明整洁、安全健康的实验教学环境和条件。

5、加强实验室文化建设,营造严谨、科学、探求知识和真理的实验室文化氛围。

6、加强实验室使用的过程管理,建立健全实验室工作档案和基本信息资料。

(二)加强实验室制度建设,规范工作流程,进一步提高实验室管理水平

1、建立健全实验室管理岗位责任制,明确岗位职责和工作任务,使实验室建设和各项管理工作再上新的台阶。

2、做好实验室建设与设备管理各项规章制度的修订和完善工作。

3、制定、完善实验室各项操作规程和安全制度,规范实验操作过程,确保实验教学安全。

(三)进一步完善实验室布局结构,制定实验室建设规划

1、对各学校根据专业设置、学科建设和实验室发展规划,进一步论证和确定实验室设置和布局结构。对实验室设置和实验室名称的确立,力求科学,符合实验教学规律和要求,并且保持实验室设置的相对稳定。

2、规划实验室建设和发展的中长期建设目标,制定20

11、2011年我校实验室建设规划。

推荐第10篇:分子生物学实验室常用仪器及使用方法

实验一

分子生物学实验室常用仪器及使用

事实证明,在科学飞速发展的今天,无论从事哪个领域的研究,要想突破,除了有良好的理论基础外,更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外,还具有一些特殊用途的仪器,这些仪器一般较精密,价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。

一、冷冻离心机

低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术,心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型(上海安亭)×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。

1. 安装与调试

离心机应放置在水平坚固的地面上,应至少距离中,周围空气应呈中性,且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体,环境温度应在之间,相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门,用手盘动转轴,轻巧灵活,无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关,然后用手按住门开关,动后立即停止,并观察转轴的转向,若逆时针旋转即为正确,机器可投入使用。2. 操作程序

(1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。

(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。

(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。

(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。预先设定的值。

(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间)定的减速时间内降至零。

(6)按控制面板上的停止键,数码管显示机器已准备好下一次工作。

3. 注意事项

(1)离心机应始终处于水平位置,外接电源系统的电压要匹配,并要求有良好的接地线,机器不使用,要拔掉电源插头。

(2)开机前应检查转头安装是否牢固,机腔中有无异物掉入。

(3)样品应预先平衡,使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。

(4)挥发性或腐蚀性液体离心时,应使用带盖的离心管,并确保液体不外漏以免腐蚀机腔或造成事故。

在国内,有多个厂家生产冷冻离心机,,落地式。配有角式转头:10cm在预先设定的加速时间内,其运速升,离心机开始减速,其转速在预先设dedT,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时1

本实验6×50ml、120~30℃

至 因此低温冷冻离 以上且具有良好的通风环境再按运转键,转

(5)除工作温度、运转速度和运转时间外,不要随意更改机器的工作参数,以免影响机器性能。转速设定不得超过最高转速,以确保机器安全运转。

(6)使用中如出现0.00或其它数字,机器不运转,应关机断电,10秒钟后重新开机,待所设转速显示后,再按运转键,机器将照常运转。

(7)不得在机器运转过程中或转子未停稳的情况下打开盖门,以免发生事故。

(8)每次操作完毕应做好使用情况记录,并定期对机器各项性能进行检修。

二、电泳仪

电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要手段。带电泳大类,自由界面电泳不需支持物,泳目前已很少使用。区带电泳需用各种类型的物质作为支持物,纤维薄膜、非凝胶性支持物、是琼脂糖凝胶电泳。应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析,组份分析或单个组份提取制备。下面以为例介绍其使用方法。

1.使用方法

(1)按电源开关,显示屏出现“欢迎使用同时系统初始化,蜂鸣

U:

0V

U=

I:

0mA

I =

P:

0W

P=

T:

00:00

T=

其中:左侧大写Mode(模式):STD(标准

(2)设置工作程序。用键盘输入新的工作程序。例如,要求工作电压I限制在200mA以内,功率动关掉输出。则操作步骤如下:

①按“模式”键,将工作模式由标准(

凝胶性支持物及硅胶―4声,设置常设置。屏幕转成参数设置状态,见图一:

100V

50mA

50W

| 01:00

|U: I: P: T: );TIME(定时W限制在 电泳一般分为自由界面电泳和区如等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电G薄层等,分子生物学实验中最常用的DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)DYY-12型电脑三恒多用电泳仪„”等字样后,

Mode:

STD

中间部分显示程序的常设值);VH(伏时);STEP(分步)100W以内,时间T为3STD)转为定时(TIME)2

醋酸或将一定混合物进行 (预置值)。U=1000V,电流20分,并且到时间自常用的支持物有滤纸、

为电泳时实际值; 小时 模式。每按一下模式键,其工作方式按下列顺序改变:

STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先设置电压U,按“选择”键,先将其反显,然后输入数字键即可设置该参数的数值。按数字1000,则电压即设置完成。

③设置电流I,按“选择”键,先使I反显,然后输入数字200。

④设置功率P,按“选择”键,先使P反显,然后输入数字100。

⑤设置时间以按“清除”键,再重新输入。

⑥确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣至设置值。同时在状态栏中显示“压输出。在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒)

⑦每次启动输出时,仪器自动将此时的设置数值存入“要调用时可以按“读取”键,再按“出执行。

⑧电泳结束,仪器显示:

2.注意事项

(1)U、I、P三个参数的有效输入范围是:

(2)一般情况下,当的地方,可以用万用表的欧姆档逐段测量。

(3)如果输出端接多个电泳槽,则仪器显示的电流数值为各槽电流之和,此时应选择稳压输出,以减小各槽的相互影响。

(4)注意保持仪器的清洁,不要遮挡仪器后方进风通道。严禁将电泳槽放在仪器顶部,避免缓冲液洒进仪器内部。

(5)本仪器输出电压较高,使用中应不避免接触输出回路及电泳槽内部,以免发生危险。

(6)长期不用仪器,应放置在干燥通风的清洁环境中保存。

三、分析天平

分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要仪器,充分了解仪器性能及熟练掌握其使用方 T,按“选择”键,先使 4声,提醒操作者电泳仪将输出高电压,“No Load!时,首先应关机检查电极导线与电泳槽之间是否有接触不良

T反显,然后输入数字Run”,并有两个不断闪烁的高压符号,表示端口已有电0”键,按“确定”键,即可将上次设置的工作程序取END”,并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣。U:5 3

注意安全。3000V;I:320。如果输入错误,可之后逐渐将输出电压加 MO”号存储单元。以后需4~400mA P:4~400W. 。~ ; 法,是获得可靠分析结果的保证。分析天平的种类很多,有普通分析天平、半自动/全自动电光分析天平及电子分析天平等。目前实验室常规备用的是自动化程度较高的电子分析天平。下面介绍电子分析天平PL203/01型和AL104/01型 (METTLER-TOLEDO)的性能及使用方法。PL203/01型精密电子天平:最大称量210g;实际分度值0.001g;AL104/01型高分辨率电子分析天平:最大称量110g;实际分度值0.0001g

1. 使用方法

(1)检查并调整天平至水平位置。检查电源电压是否匹配(使用配置的稳压器),按天平仪器要求通电预热至所需时间

(2)打开天平开关“短时点亮,天平回零时,可进行正式称量。

(3)称量时将洁净称量瓶或称量纸置于称盘上,关上侧门,天平将显示该重量,点击“®O/T¬”键自动校对零,然后逐渐加入待称物质,直至所需重量为止。

(4)称量结束应及时除去称量瓶(纸)

2. 注意事项

(1)天平应放置在牢固平稳水泥台或木台上,室内要求清洁、干燥,同时应避免光线直接照射到天平上。

(2)称量时应从侧门取放物质,读数时应关闭箱门以免空气流动引起天平摆动。

(3)挥发性、腐蚀性、强酸强碱类物质应盛于带盖称量瓶内称量,防止腐蚀天平。

(4)电子分析天平若长时间不使用,则应定时通电预热,每周一次,每次预热确保仪器始终处于良好使用状态。

四、分光光度计

不同物质对不同波长入射的吸收程度各不相同,从而形成各具特征的吸收光谱原理,应用比色法可以对某些有色物质进行定性或定量分析。而且精度低,已远远不能满足高精度微量分析的要求。不断地更新换代,人们引进了分光光度法的概念,单色器、吸收池、接受器、显示屏幕所组成,它不仅适应于可见光区,同时还扩展至紫外光区及红外光区。光密度(而测定某一溶液对该单色光的吸收值。液定量和纯度的初步判断。下面介绍紫外可见光分光光度计的使用方法。该仪器除了能检测核酸样品浓度外,的测定,能检测低至几微升样品(

30min 。 on”,天平则自动进行灵敏度及零点调节。待显示屏上所有字段 ,关上侧门,切断电源,并做好使用情况登记。

随着科学技术不断发展,分光光度计随之应用。OD)是许多溶液中的溶质定量的指标之一,通过所产生的单色光分子生物学实验中常使用紫外分光光度计进行核酸溶还可进行蛋白质浓度以及细胞培养液浓度70µl和5~7µl),样品无需稀释,测量后还可全部回收。4

分光光度计由光源、GeneQantTM Pro

2h,以。根据这一分析仪器也Amersham)

但由于比色法仅限于可见光区,(使用方法

(1)打开电源开关(ON),等待数秒钟,显示屏上显示一系列数据,如本机型号、当前日期等,这些数据可以重新设置,当出现“instrument Ready”即可进入下一程序。

(2)在仪器面板上有许多功能键,其中包括检测base sep、Tm、DNA、RNA、oligo、Protein595aay、Protein280 meas、cell culture等。例如,欲检测DNA, 按DNA键,即进入DNA检测程序。在显示屏上:

以上为仪器预设置的参考数据,若按“新设定。

(3)取石英样品杯后放入仪器上的样品槽中,放入时注意样品杯的光学面朝前方。

(4)按“set ref”键,进行空白测试。显示屏上出现一系列数据均““Insert sample 中进行测定。

(5)一个样品测定完毕,按“

(6)取出样品杯,吸出样品,然后用高纯水洗几次,自然晾干。由于样品杯十分昂贵,使用时要小心操作。以至铬酸洗液(浓酸中浸泡不要超过

五、数字式酸度计

酸度计是实验室配置溶液必备的仪器。本实验室的酸度计为台式微电脑酸碱度计和温度计(Hanna

1. 使用方法

(1)将pH

70µl或5。将样品杯取出,吸干水分,稍干燥后,同样吸入待测样品,放入样品槽 ,测量pH范围为

Pathlengh

10mm

Units

µg/µl

Use 320nm

NO

Dilution Faotor 1

Insert reference,

enter”键,和“select”键可以将以上的参数进行重7µl ,容量大小根据需要。先用吸管吸高纯水入样品杯中,然 0.000”并提示插入样品stop”键,返回“Instrument Ready”。 可用温水或稀盐酸,乙醇15分钟),表面只能用柔软的绒布或拭镜头纸擦净。 0.00~14.00pH;温度为0.0~100.0℃;

~”不能用手指拿样品杯的光学面,用后要及时洗涤,)电极和温度探头与主机连接,主机与电源连接。

(2)取出电极保护套,如果有结晶盐出现,这是电极常见现象,浸入水后就会消逝。如果薄膜玻璃或透析膜发干,可在HI170300电极保存液中浸泡1小时。

(3)pH校准。将pH电极和温度探棒浸泡在所选的标准缓冲液内4cm(建议用pH6.8

6、7.01),缓冲液值可通过“D℃”或“Ñ℃”键来调节。按“CAL”键,仪器将显示“CAL”和“BUF”符号及“7.01”数据。当读数不稳定时,屏幕会显示“NOTREADY”;当读数稳定时,屏幕会显示“READY”和“CFM”,按“CFM”键确认校准值。确认第一校准点后,将pH电极与温度探棒浸泡在标准缓冲液内4cm(建议用pH4.0

1、9.

18、10.01);再按“CAL”键,仪器将显示“CAL”和“BUF”符号及“4.01”数据。按“CFM”键确认校正值。

(4)pH测量。校准完毕后,仪器自动进入溶液约4cm,停几分钟让电极读数稳定。

2. 注意事项

(1)由于pH211酸度计内装有可充电电池,在刚购买或长时间放置后,再使用时,通电校正测量完毕后,可将电源继续还插入电源插座,只需关闭开关,这样可以保证电池充电,是校正值得以储存,下次测量时无须校正即可进入精确测量。

(2)不可用蒸馏水、去离子水和纯水浸泡电极。如果读数偏差太大(±没有校正或电极变干。为避免电极受损,在关机前要将状态时,在电极浸入电极保存液前,电极要与机器分开。

(3)如仪器已测过几种不同的样品溶液,请用自来水清洗,样品清洗电极。

(4)温度会影响pH的读数,为测量准确的补偿,用HI7669/2W温度探棒浸入样品中,紧靠电极并停几分钟,如果被测溶液的温度已知或测量是在相同温度下进行,只需动手补偿,示温度读数伴有℃信号闪烁。温度可通过“

六、PCR仪

PCR仪,也称DNA热循环仪、基因扩增仪,它是使一对寡核苷酸引物结合到正负上的靶序列两侧,从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列三种不同温度进行DNA变性、引物复性、

PCR仪主要应用于基础研究和应用研究等许多领域,如基因分析、序列分析、进化分析、临床诊断、法医学等等。随着分子生物学的不断发展,因此了解PCR仪的性能,熟练掌握仪器的正确使用方法及使用过程中的注意事项,将是十分必要的。

现介绍PCR 扩增仪(Tl Thermocycler)的使用方法和注意事项。

pH测量状态,将电极与温度探棒浸泡在待测

pH电极从溶液中拿出。当处于关机 或在插入样品溶液前,用待测pH值,温度要在适合的范围内进行自动温度那么此时温度探棒是不用连接,Ñ℃”或“D℃”来调节。 DNA片段,它的每一循环包括在DNA聚合酶催化的延伸反应的三个过程。PCR扩增技术也得到普及推广应用, 6

1pH),则是由于屏幕上会显DNA链 1. 使用方法

(1)接通电源开关,仪器进入准备状态;在显示屏上记录了当前仪器的温度和盖子(Lid)的温度。若仪器正在运行时,须按“

B ”键(start/stop),才能退出运行并返回准备状态。

(2)编写程序段。在准备状态下按“

C ”键(programs)进入编程状态,选定一程序号,然后按“enter”键,进入下一程序;按 “A”(list)键后,选一文件号(empty program);再按“enter”键,进入下一程序;按“ABC”键,进入下一程序,用上下左右键号选择一个字母(A、B、C、D、„),然后按“enter”键,进入下一程序;按“name ok”键,完成文件命名。

(3)设定盖子的温度。性温度是95℃,那么盖子的温度就要设定为程序。

(4)设定变性温度、变性时间、延伸温度、延伸时间、退火温度、退火时间及循环总数等参数。从第一步依次按“间,全部参数设置完后,按“

(5)运行程序。检查设定是否正确,屏上可观察到系统运行的情况,按“

七、凝胶成像系统

本系统属全自动电脑控制影像分析系统,主要拍摄核酸的acrylamide电泳胶片。在与确定量,是分子生物学及生化蛋白试验的重要检测工具。像头,变焦镜,电脑以及专业凝胶图象采集及分析斑点测量、PCR密度的定量分析等。此外,还提供图像采集、标注、打印、数据和图像发送到Word、Excel、图像处理等功能。

1.使用方法

(1) 打开电脑,启动凝胶分析软件,进入用户界面。

(2)打开采集凝胶图像的暗箱装置电源开关,放入凝胶,打开紫外光源或白光光源,将采集装置与电脑上采集卡相连,然后选择“文件”菜单中的“图像采集”或工具栏的“图像采集”按钮,出现图像窗口:晰,可以调节暗箱上的变焦镜,使之清晰。可直接将图像保存起来,也可通过“图像处理”对图像进行旋转、裁剪、滤波、调节对比度„„方面的处理。

(3)对读入的电泳凝胶图像,可以启动电泳凝胶分析系统。在“功能选择”菜单中选择“电泳凝胶”或在工具栏上的“电泳凝胶”工具,将出现泳道分析工具栏,并在“图像显示”子窗口中出现一个红色的矩形框。还可进入“条带分析”系统,对条带 lid temp:

℃”enter”键进入,用四个移位键移动设定位置。先设定温度,后设定时pgm ok”键,所设定的程序自动被保存。

按“Stop”可停止运行。markers比较后,可精确计算样本的分子量,对核酸电泳也可准 “开始采集”105℃。待盖子预热后按“start”键,选择设定好的程序,开始运行。显示 agarose本系统包括暗箱,.软件(3.3版)。该软件提供对电泳凝胶、、“停止采集”、“采集图像”等。如果图像不清 7

10℃,例如变enter”键,进入下一 紫外透射仪,摄 进行编号,对“,盖子的温度一般比变性温度要高 电泳胶片,及蛋白质的二条以上的条带进行比较。

(4)采集图像结束后,关闭暗箱电源开关,从暗箱中取出凝胶,并将玻璃板清洗干净,晾干。

八、空气恒温摇床

摇床(振荡器)为实验室的常规设备。SHK-99-Ⅱ型台式空气恒温摇床,采用微电脑控制系统,温度范围:室温+5℃~60℃,精度±0.5℃;时间范围:1分钟~99小时59分钟;转速范围:60RPM~250RPM。

1.使用方法

(1)LED屏幕上各段数据:

000

00.0

屏幕上“1”表示第一段,如果是第二段则为“转速,“Time”表示时间,不设定时可自动累计时间一直运行。的值随时可以修改,随时按新值运行。

(2)工作程序设置。按“F1”键,进入设置状态。可在速度,温度,时间,运行等四部分之间切换。在每一部分按“F2”键输入数据,输入完十位数据,再输入个位数据,按“键,再按“F2”键,到小数位,再按“

(3)再按“F1”键,转回运行状态,按“

(4)按“End”键,结束系统运行。

2. 注意事项

(1)打开电源,系统开始自检,等待完毕,可以进行第2步参数设置。若屏幕出现:错误;b.“MOTOR ERROR”,表示电机部分有错误。

(2)运行过程可以打开箱盖,这样电机不运行,时间也停止,盖上盖接着运行。

(3)工作完毕,关闭电源。关机后,要等一段时间再开机。

九、水的净化装置

分子生物学实验对水的纯度要求越来越高, RPM

Temp

Time

00:00 2”,“Temp”表示温度,“RPM”表示每分钟“Temp”、“RPM”、F2”键,又到十位,以此循环。 Start”键,电机开始运行,时间开始计时。LCD屏幕出现“WELCOME”字样,系统自检a.“TEMP ERROR”,表示温度检测线路有

一般蒸馏水常常难以满足实验要求,大多要求要

Time”F2”

“ 进行第二次蒸馏(双蒸水),它可以去除水中的大部分有机杂质,但制作时间较长,而且无机杂质还是很多。许多实验还需要去离子水,这就需要阴阳离子交换树脂进行处理。目前,分子生物学实验室都使用高质量的超纯水。如美国微孔滤膜公司的Milli-Q超纯水制造系统所制造的超纯水适用于许多学科领域,如分子克隆、各种色谱分析、氨基酸分析、DNA测序、酶反应、组织和细胞培养等实验。下面介绍RO-MB壁挂式反渗透高纯水机性能及使用方法。RO-MB反渗透高纯水机(杭州永洁达)产水量(25℃)10L/H;产水水质:RO纯水:15MΩ.cm;可用自来水制成普通实验用水和高纯水,同时满足不同水质要求。在线电导率仪对产水水质连续检测,可保证产水质量。

1. 使用方法

(1)准备:先检测与纯水机相连的原水管路、废水管路连接是否正常,打开原水阀门。供电电源是否正常,检查按钮是否在关闭状态(按钮弹出状态)220V电源插座上。

(2)开机:依次按下电源开关,泵开关,纯水机启动产水,同时废水排出,指示灯亮起,并处于自动运行状态。

(3)取纯水:若打开阀门打开时,检测仪表显示高纯水电导率或电阻值。一杯水后再取新鲜水。

(4)关机:不用时可关闭个按钮停机,自来水进水阀门不必关闭,这时机子内部的进水电磁阀已自动切断水路。只要管路阀门不漏,也可使机子保持自动待机状态。

2.注意事项

(1)纯水机的正常使用环境温度为度不低于5℃。

(2)预处理滤芯一般三至六个月更换一次,实际使用寿命与自来水水质、总过滤量等有关。

(3)混床滤芯产高纯水约水中含盐量、总用水量等有关。天开机30分钟冲洗一次,冬季每隔

(4)使用过程若发现停机后泵仍频繁地每隔数分钟有规则地启动数秒钟又停机,此为管路漏水引起,需及时打开机箱加以解决。象,有利于冲洗和保护反渗透膜元件,

十、消毒设备

细菌和细胞培养以及核酸等有关实验所用的试剂、

RO纯水或高纯水出口阀门,则可获得相应水质的纯水。当高纯水出口 115~3吨,约二至四个月更换一次,2~3避免遭到微生物繁殖和减少污物沉积,。将电源插头插入带有接地线的为了获得高质量的高纯水,可以先放掉 35℃,产水量会随温度降低而下降,冬季保养温实际使用寿命与自来水水质、2天。必须注意定期冲洗维护。夏季宜每 乃属正常现尤其高温季节。 器皿及实验用具,应严格灭菌,有的实验

~设备停运时间超过天开机冲洗一次。若每隔半小时以上启动数秒钟又停机,还要求没有核酸酶的污染,故应将实验器械,试剂等进行高压消毒。对于经过导入DNA重组分子的菌株,操作后必须进行严格的高压消毒灭活处理。

大批实验物品、试剂、培养基等可以使用大型消毒器进行消毒。一些不能经受高压、高温消毒的试剂可用滤器滤膜除菌,器皿可用紫外线照射、75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸钠(SDS)浸泡消毒。所有的细胞培养、细菌培养的操作,都应在紫外线消毒后的超净工作台中进行。

下面介绍立式自动压力蒸汽灭菌器(LDZX-40BI)的使用方法。

1.使用方法

(1)开盖:转动手轮,使锅盖离开密封圈。

(2)通电:连接自动进水装置。接通电源,将控制面板上电源开关按至低(LOW)红灯亮,蒸发锅内属断水状态;缺水(

(3)加水:打开水源,水位达到低水位,控制面板上低水位红灯和缺水黄灯相继灭,加热(1-绿灯)亮,继续加水至高水位(

(4)堆放物品:需包扎的灭菌物品,体积不超过包装之间留有间隙,堆放在金属框内,这样有利于蒸汽的穿透,提高灭菌效果。

(5)密封高压锅:推横梁入立柱内,旋转手轮,使锅盖下压,充分压紧。

(6)设定温度:通电后数显窗灯亮,上层为红色,显示温度,下层为绿色,设定温度和时间。先按控制面板上确认键,绿色数显闪烁,进入温度设定状态。按一次移位键指相应位置闪烁,根据所需数据位置进行(单项循环)移位。按△增加键或所需温度设定。设定完毕,按二次确认键,进行温度确认。

(7)设定时间:按一次确认键,将温度设定切换成时间设定;再按一次移位键,所指相应位置闪烁,完毕,按二次确认键,定时器开始倒计时。

(8)灭菌:在加热初,将下排汽阀打开至垂直位置;下排汽阀待蒸汽冒出时,压力表显示指示为的15%为宜。安全阀设定数,超出压力部分,安全阀将自动泄压,并开始计数灭菌所需时间。灭菌完成,电控装置将自动关闭加热系统,伴有蜂鸣提醒;并将保温时间切换成控制面板上电源开关按至

(9)干燥:物品灭菌后需要迅速干燥,须打开放汽阀和下排汽阀,将灭菌器内的蒸汽迅速排出,使物品上残留水蒸汽快速挥发。 根据所需数据位置进行移位;进行时间设定确认。 ℃时,将下排汽阀推向水平关闭位置;留有微量蒸汽逸出,以控制总汽流量使用最高灭菌温度为OFF HIGH)绿灯亮,自动停止加水。按增加键或减少键,时间采用倒计时,124℃~126℃,

ON处,若水位LACK)黄灯亮,电源已正常输入。

200mm×100mm×100mm为宜,各

所??减少键,进行 进行所需时间设定。设定当灭菌锅内温度达到设定温度,0.145Mpa~0.165Mpa范围内属于END显示;此时,将

100压力在处;关闭电源,停止加热待其冷却。

(10)将盖开启,取出已灭菌物品。关闭水源,打开下排水阀,排尽灭菌室的水与水垢,以备下次使用。

2.注意事项

(1)堆放灭菌物品时,严禁堵塞安全阀的出汽孔,必须留出空位保证其空气畅通,否则安全阀因出汽孔堵塞不能工作,造成事故。

(2)灭菌液体时,应将液体灌装在硬制的耐热玻璃瓶中,以不超过选用棉花纱塞,切勿使用未打孔的橡胶或软木塞,放蒸汽,必须待压力表指针回零位方可排放余汽。

(3)对不同类型,不同灭菌物要求的物品,切勿放在一起灭菌,以免顾此失彼,造成损失。

实验二

质粒DNA

一、实验原理

细菌质粒是一类双链、闭环的在于细胞质中、独立于细胞染色体之外的自主复制的遗传成份,于染色体外的游离状态,制而复制,并通过细胞分裂传递到后代。

DNA,大小范围从

在灭菌液体结束时不准立即释 至200kb3/4体积为好,瓶口随着染色体的复特别注意,的提取-碱裂解法1kb以上不等。各种质粒都是存通常情况下可持续稳定地处但在一定条件下也会可逆地整合到寄主染色体上,

一般分离质粒DNA的方法都包括3个步骤:①培养细菌,使质粒DNA大量扩增;②收集和裂解细菌;③分离和纯化质粒DNA。分离制备质粒DNA的方法很多,其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、SDS法、羟基磷灰石层析法等。在实际操作中可以根据宿主菌株类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途进行选择。本实验介绍碱裂解法提取质粒DNA。

碱裂解法提取质粒DNA是根据共价闭合环状质粒DNA和线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离质粒DNA。在pH值介于12.0-12.5这个狭窄的范围内,线性的DNA双螺旋结构解开而被变性,尽管在这样的条件下,共价闭环质粒DNA的氢键会被断裂,但两条互补链彼此相互盘绕,仍会紧密地结合在一起。当加入pH4.8乙酸钾高盐缓冲液恢复pH至中性时,因为共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链仍保持在一起,因此复性迅速而准确,而线性的染色体DNA的两条互补链彼此已完全分开,复性就不会那么迅速而准确,它们相互缠绕形成不溶性网状结构,而复性的质粒DNA恢复原来构型,保持可溶性状态。通过离心,染色体DNA与不稳定的大分子RNA,蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去,最后用酚氯仿抽提纯化上清液中的质粒DNA。

二、仪器及试剂

1.仪器及耗材:37℃恒温摇床、冷冻离心机、台式离心机、微量移液器、50 ml离心管、1.5 ml离心管管、枪头、各种规格的量筒、接种环、试剂瓶、100 l或者250 ml三角瓶、玻棒等。

2.试剂及配制:

LB培养液的配制:

酵母浸提物

5.0 g;

胰蛋白胨

10.0 g;

NaCl

10.0 g;

依次称量后加入800 ml去离子水后搅拌至完全溶解,用5 mol/L NaOH(约0.2 ml)调节培养液的pH值至7.0。再加去离子水将溶液定容至总体积为1000 ml,10磅高压灭菌20 min,冷却后4℃保存。

溶液 Ⅰ(GET缓冲液): 25 mmol/LTris-HCl(pH8.0), 10 mmol/L EDTA, 50 mmol/L 葡萄糖

配制:1000 ml

1 mol/L Tris-HCl(pH8.0)

25 ml

0.5 mol/L EDTA(pH8.0)

20 ml

20% Glucose(1.11mol/L)

45 ml

dH2O

910ml

将以上溶液混合装瓶, 10磅高压灭菌20 min,冷却后4℃保存。

溶液II(变性液):200 mmol/L NaOH , 1% SDS

配制: 500 ml

10% SDS

50 ml

2N NaOH

50 ml

取以上溶液,用灭菌去离子水定容至500 ml,充分混匀。室温保存,此溶液保存时间最好不超过一个月,最好现用现配。

注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。

溶液 III (醋酸钾液):3 mol/L 醋酸钾(KAc)缓冲液,pH 5.6。 5 mol/L 冰醋酸

配制:500 ml

醋酸钾

147 g

冰醋酸

57.5 ml

加入300 ml去离子水后搅拌溶解。待醋酸钾溶解后,再加去离子水将溶液定容至高温高压灭菌后,4℃保存。

10×TE缓冲液(pH 8.0):100 mmol/L Tris-HCl, 10 mmol/L EDTA

配制:1000ml

1 mol/LTris-HCl 缓冲液(pH 8.0)

100ml

500 mmol/L EDTA (pH8.0)

20 ml

加入约800 ml的去离子水,均匀混合。溶液定容至1 L。高温高压灭菌后,

苯酚/氯仿/异戊醇(25 : 24 : 1):将量取25 ml Tris-HCl(pH8.0)平衡苯酚,加入 13

500 ml。4℃保存。 24 ml 氯仿和 1 ml 异戊醇,充分混合后,移入棕色玻璃瓶中,4℃保存。

其它试剂:TE(pH8.0)、异丙醇、氯仿/异戊醇(24:1)、无水乙醇、70%乙醇、氨卞青霉素贮存液(50 mg/ml)

三、操作步骤

1.菌体的培养和收获

(1)将5~10 ml含有氨卞青霉素(后接入一单菌落,并保持通气良好,于接一次,于37℃ 220 rpm振摇培养 (2)吸取培养的菌液1.5 ml,转入弃上清,将离心管倒置,使液体尽可能流尽。

2.质粒DNA提取(碱裂解法)

(1)加100 ul 溶液Ⅰ 重悬细菌沉淀,用枪吹打直至混和均匀。

(2)加200 ul溶液 Ⅱ,盖紧管口,液变透明,粘稠)。

(3)加150 ul溶液 Ⅲ,轻微振荡混和

(4)12000 rpm离心6 min,取上清液至另一离心管(弃沉淀)

(5)加等量的酚/氯仿/异戊醇,旋涡混匀离心管。

(6)加1倍异丙醇,振荡混匀,静置倒置于吸水纸,将附于管壁的残余液滴除净。

(7)加200 ul 70%乙醇洗涤沉淀物,台式离心机在室温下晾干(或在50℃-60℃的烘箱中也可)

(8)沉淀加20μl TE, 反复吹打使质粒

四、常见问题及可能原因

1.提取的质粒DNA不纯:变性不充分;关键步骤反应时间过短;离心时间或速度不够。

2.提取的质粒DNA呈涂布状:操作过程中用力过猛,动作过大;操作系统内有污染。

AP)的LB培养基加入到容量为100ml的三角瓶中,然37℃ 220 rpm振摇过夜培养(约16h)后可以再转3~4 h。 的离心管中,用台式离心机以12000 rpm

轻缓上下颠倒离心管以混合内容物。室温静置10 sec,置冰上10 min (溶液出现白色沉淀。 1 min,12000 r/min离心6min,取上清液至另一10 min,12000 rpm离心6 min。弃上清液,将离心管 12000 rpm离心2 min,弃上清液,将沉淀。 DNA充分溶解,-20℃保存。 14

3 min。5 min(溶)。

1.5 ml离心 3.与染色体DNA分离不全:变性过程不完全;试剂配制有问题(成分,浓度或pH)。

实验三

琼脂糖凝胶电泳

一、实验原理

琼脂糖凝胶电泳是分离和纯化的多孔支持介质(琼脂糖凝胶)的样品孔中,并置于静电场上。由于架两侧带有含负电荷的磷酸根残基,分子的迁移速度取决于分子筛效应。因而可依据DNA可以分离相对分子质量相同,而构型不同的相对分子质量标准参照物和样品一起进行电泳而得到检测。以提供一个用于确定EB),其分子可插入下,呈桔红色荧光,因此也可对分离的

一般琼脂糖凝胶电泳适用于大小在胶的制备以及琼脂糖凝胶电泳在

二、仪器及试剂

1.仪器及耗材:

水平电泳槽、电泳仪、100 ml或250 ml锥形瓶、量筒、吸头等。

2.试剂及配制:

50×TAE缓冲液的配制:

配制1000 ml

DNA 片段的常用技术。把DNA样品加入到一块包含电解质DNA分子的双螺旋骨因此在电场中向正极移动。在一定的电场强度下,DNA具有不同的相对分子质量的DNA片段泳动速度不一样,DNA, 也DNA分子。在电泳过程中可以通过示踪染料或相对分子质量标准参照物相对可DNA片段大小的标准。在凝胶中加入少量溴化乙锭(ethidium bromide, DNA的碱基之间,形成一种络合物,在254~365nm波长紫外光照射DNA进行检测。 0.2kb~50kb范围内的DNA片段。本实验介绍琼脂糖凝

DNA片段分离中的应用方法。

凝胶成像分析系统、微波炉、微量移液器、透明胶带、点样板或parafilm、2 mol/L Tris-乙酸,0.05 mol/L EDTA(pH 8.0) 15 分子的大小来使其分离。凝胶电泳不仅可分离不同分子质量的

Tris

242 g

冰乙酸

57.1 ml

0.5 mol/L EDTA

100 ml

加入600 ml去离子水后搅拌溶解,将溶液定容至1 L后。高温高压灭菌,室温保存。

1×TAE缓冲液的配制:

称量20 ml的50×TAE缓冲液,再加入980 ml的去离子水。

溴化乙啶贮存液:10 mg/ml 溴化乙啶

配制:100 ml

称取1 g溴化乙啶,置于100 ml烧杯中,加入80 ml去离子水后搅拌溶解。将溶液定容至100 ml后,转移到棕色瓶中。室温保存。

6×上样缓冲液:0.25%溴酚蓝,0.25%二甲苯青FF,30%甘油。

配制:10 ml

溴酚蓝

25 mg

二甲苯青FF

25 mg

甘油

3 ml

用6×TAE缓冲液定溶至10 ml,分装成1 ml/管。-20℃保存。

其它试剂:DNA样品、DNA Ladder、琼脂糖、

三、操作步骤

1.制备1%琼脂糖凝胶(大胶用70ml,小胶用50ml):称取0.7 g中,加入70 ml(50ml)1×TAE,瓶口倒扣小烧杯。微波炉加热煮沸摇匀,即成1.0%琼脂糖凝胶液。

2.胶板制备:取电泳槽内的有机玻璃内槽(制胶槽)洗干净、晾干,放入制胶玻璃板。取透明胶带将玻璃板与内槽两端边缘封好,形成模子。将内槽置于水平位置,好梳子。将冷却到65℃左右的琼脂糖凝胶液混匀小心地倒入内槽玻璃板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层。室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拔梳子,取 16

0.5 g)琼脂糖置于锥形瓶3次至琼脂糖全部融化,并在固定位置放 (下胶带,将凝胶及内槽放入电泳槽中。添加1×TAE电泳缓冲液至没过胶板为止。

3.加样:在点样板或parafilm上混合DNA样品和上样缓冲液,上样缓冲液的最终稀释倍数应不小于1X。用10 ul微量移液器分别将样品加入胶板的样品小槽内,每加完一个样品,应更换一个加样头,以防污染,加样时勿碰坏样品孔周围的凝胶面。(注意:加样前要先记下加样的顺序)。

4.电泳:加样后的凝胶板立即通电进行电泳,电压60-100V,样品由负极(黑色)向正极(红色)方向移动。电压升高,琼脂糖凝胶的有效分离范围降低。当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约1cm处时,停止电泳。

(5)电泳完毕后,取出凝胶,用含有0.5 ug/ml的溴化乙锭1×TAE用清水漂洗10 min。

(6)观察照相:在紫外灯下观察,DNA存在则显示出红色荧光条带,采用凝胶成像系统拍照保存。

四、常见问题及注意事项

1.配琼脂糖时应使其完全熔化后方可制胶。

2.琼脂糖凝胶易于破碎,操作时要轻缓。

3.电泳时应注意电源线路,预防触电。

4.溴化乙淀具有致癌作用,配制及使用时应带乳胶或一次性塑料手套。并在专门的实验室内使用。

5.紫外线对人体有损伤作用,开灯时间不宜太长,注意防护。

6.DNA带形状模糊:DNA加样过多;电压太高;凝胶中有气泡。

7.质粒DNA的存在形式有3种,①共价闭环DNA(cccDNA),常以超螺旋形式存在;②开环DNA(ocDNA),此种质粒DNA的两条链中有一条发生一处或多处断裂,因此可以自由旋转从而消除张力,形成松弛的环状分子;③线状DNA,因质粒处断裂而造成。因此质粒DNA电泳的结果中有可能出现三条泳带,它们的泳动速度为:cccDNA >线状DNA >ocDNA。

20 min,再DNA的两条链在同一溶液染色约 DNA18

DNA

实验四

限制性内切核酸酶的酶切与鉴定

一、实验原理

限制性内切酶是一类能识别双链分子中特异核苷酸序列的水解酶,主要存在于原核生物中。根据限制酶的识别切割特性、催化条件及是否具有修饰酶活性可分为 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型三大类。其中Ⅱ类酶在分子克隆和基因操作中最为有用,是常用的分子生物学工具酶。

限制性内切酶识别序列长度一般为4~8个呈回文序列的特异核苷酸对。一般情况下,识别序列越长,在同一DNA分子中识别位点出现的频率就越小。许多限制性内切酶的酶切位点已被确定。例如EcoRl 酶的识别与切割序列为以下6个碱基对。

5′„„GAATTC„„3′

EcoR I以独特的方式识别并裂解这个顺序,形成两个 和

……G

这些末端为互补的,即粘性末端,并可在连接酶的催化下与由相连接。

限制性内切酶主要用于基因组基因片段的分离与回收以及单酶切、双酶切或部分酶切等不同方式。大量的酶切反应。小量酶切反应主要应用于质粒的酶切鉴定,DNA,大量酶切反应用于制备目的基因片段,体积为

本实验为EcoR I对质粒性内切核酸酶酶切位点。琼脂糖凝胶电泳进行鉴定酶切效果。

二、仪器与试剂

1.仪器:

水浴锅、离心管、移液器、吸头、

2.试剂:

质粒pUC

18、EcoR I限制性内切核酸酶、内切酶反应缓冲液、琼脂糖、电泳缓冲液、样缓冲液、溴化乙啶染液、无菌水等。

三、操作步骤

3′„„

……CTT AA DNA的片段化、重组DNA分子物理图谱的构建等。根据酶切目的和要求不同,可有pUC18的小量酶切。在用特定的限制性内切核酸酶对质粒进行酶切反应后,

CTT AAG„„ 5′

5′突出末端:

AATTC……

EcoR I产生的其它分子末端DNA分子的构建与鉴定、载体中目的可分为小量酶切反应和体积为20 μ50~100 μl,DNA

在质粒的双链环状DNA电泳设备等。

l, 含0.210通常可采用1 μg 30ug。 6×上

G……根据酶切反应的体积不同,~用量在~分子上有多个限制

19

1.限制性内切酶反应一般在灭菌的0.2或0.5ml PCR薄壁离心管中进行。

2.酶切反应体系(10ul):

酶解缓冲液(10×buffer)

1 ul

限制性内切酶

0.5 ul EcoR I(7.5U)

底物DNA(质粒)

灭菌ddH2O

限制性内切酶最后加入,手弹混匀或用吸头轻轻上下吹吸,混匀后离心15s。37℃水浴消化

3.酶切完毕,分子量标准物同时进行电泳以确定应,或加入适量酶后继续反应。

5.经电泳观察酶切反应完全后,将上述反应液置将剩余酶切产物保存于

四、注意事项

1.限制性内切酶需保存于

2.限制性内切酶溶液通常含有溶液底部,所以要充分摇匀。

3.加样时吸头垂直进入试剂管,避免碰到管壁,每加完一样要换一个吸头,同时在已加的样品前做个记号以防止错加或漏加,避免污染。

4.酶(置于冰盒上)应最后加入,尽量减少室温接触机会。加酶时吸头深入不可过深。

5.酶解消化反应温度及时间根据该酶使用说明书而定。

6.注意酶的用量,加入的酶量按的10%,以避免酶液中甘油干扰反应活性的可能,即在识别序列以外的位点进行切割。此外,反应体系中甘油的质量分数大于12%,以及缺少

五、相关问题

2h。 取5ul酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳, ?C20℃备用。 -20℃,操作时应将酶保持在冰浴中,避免长时间置于高温中。 NACL和存在M

x ul(依质粒浓度而定)

加至10 ul 鉴定酶切反应效果,DNA片段的大小。如果酶切不完全,可继续65℃水浴中10~15min,中止酶切反应, 50%甘油,加入反应管后,因密度较大,往往沉淀至

1-3U/ug DNA计算,酶的体积应低于反应总体积

。酶量过大(≥25U/ug DNA)时,有产生所谓星号 20

6000 r/min,DNA.酶解消化反

必须用 等情况下,都有可能出现星号活性。

1.酶的保存

不同的限制酶往往保存在大致相似的缓冲液中,这种特定配方的缓冲液能使酶活性维持较长时间。常用的保存缓冲液各组分作用如下:

Tris-HCl (7.4―7.8):

维持稳定的pH范围。

50-100mmol/L

NaCl或KCl:提供一定的离子强度。

0.1mmol/L EDTA:

1mmol/L

DTT:

200-500ug/ml BSA:

度,防止蛋白质分子浓度过低而导致酶分子变性。

50%的甘油:

1-5 g/L的Triton-100:

白质分子的表面变性作用。

2.酶单位的定义

限制酶的单位通常定义为:1U的酶能在约完成酶切1ug的λDNA。确定限制酶单位的具体操作方法是分别向列的酶(1U左右),当电泳观察到酶切片段的条带不再发生变化时说明已作用完全,割的最少酶量定为1U的酶量。

3.限制酶的作用条件

限制酶切割DNA的反应中,酶切条件是实验成功的重要因素,其中包括反应的温度、时间与反应的缓冲体系,除了这些条件外,只有在正确选择酶反应条件时才能达到最佳酶切效果。

(1)作用温度

早期的酶切反应都在37℃进行,这种方法虽然简单、统一,但却不能达到每个酶的最适反应温度。为了达到最佳酶切的效果,最好根据所选用的酶确定所需要的反应温度。

(2)缓冲体系

限制酶反应的缓冲体系大致相同,都含有以下组分:约作用是将酶反应体系的pH维持在7.5-8.5;约

络合掉能激活限制酶的镁离子。

保护酶分子上的还原性基团。

牛血清白蛋白提高溶液中蛋白质的浓

使酶液保存于-20℃不至冻结。

这是一种非离子型表面活性剂,能防止蛋50ul合适的反应缓冲体系中,在1ug的底物中加入一系DNA的纯度与浓度也会影响酶切效果, 100mmol/L10mmol/L的MgCl2,作用是为限制酶提供激

21

1h内完全切Tris-HCl,

的活因子;1mmol/L的DTT,作用是保护还原性基团;约150mmol/L的NaCl,作用是提供合适的离子强度。由于认识的局限性,早期的限制酶反应体系仅根据其中NaCl含量的不同分为高盐、中盐与低盐三种,这同样不能使每种酶获得最适反应条件。现在提供酶的很多厂商能提供4-10种缓冲体系,其中各必需成分之间只有很小的差别,目的是使每种酶都发挥最大的作用。

缓冲液一般配成10倍的浓度,使用时以1/10的比例加入,当然为了减小吸量误差也可自行配制5倍的缓冲液。

(3) 反应体积与时间

酶反应体积一般不宜小于20ul。因为过小的反应体积在加入各种成分时易产生误差,甘油含量易超过10%。在37℃保温可因水分蒸发而明显改变反应体系中各成分的浓度,从而影响酶活力。同时还要考虑反应完毕进行电泳时,所加样品中DNA的量能够在电泳中显出清晰的泳带。

常规的酶切反应一般控制在60min内进行,但也可以根据切割对象与所用的酶将保温时间延长至十几个小时。

(4) DNA的纯度与浓度

除了上述酶反应条件外,影响酶切效果的最主要因素是DNA的纯度。例如,样品中含有大量RNA杂质时会因减少了酶的有效浓度而影响酶切效果;某些杂蛋白未除净而结合在DNA时也会影响酶切效果。。至于抽提过程中未除净的各种影响因素就更多了,可能是微量的氯仿、SDS、EDTA、酚、EB、乙醇或是琼脂糖凝胶中的硫酸根离子等。

DNA纯度的另一个指标是不可含有微量的DNA酶。如果酶切后电泳结果显示出不清晰条带或成为一片红色(术语称Smear)时,可肯定系统中已经污染了DNA酶。

DNA样品中含有大量RNA时可用RNA酶处理;含有结合在DNA上的杂蛋白与DNA酶时都可用氯仿/异戊醇抽提;当样品中含有氯仿、SDS、硫酸根等抑制酶切的小分子物质时可以通过沉淀更换一个新的缓冲体系。当然,酶切失败时也不能排除除DNA外的一切因素,如无菌水,EP管,吸咀等的干净程度以及内切酶自身的酶活性情况。

除纯度外,DNA的浓度也会影响酶切效果,一般DNA质量浓度在1ug/20ul才能得到较好的酶切效果,质量浓度高达1.5ug/20ul时就可能发生酶切困难。

(5)终止酶切反应的方法

如果需对酶切片段进行连接或标记等操作时,首先要将限制酶灭活。灭活的方法可分为三种:第一种是向反应缓冲体系中加入终浓度为10-12.5mmol/L的EDTA,原理是络合掉酶反应中所需的镁离子。但这种方法会影响需镁离子的后续反应。所以一般加入EDTA后,要用乙醇沉淀法来更换缓冲体系,以除去EDTA,但这样就会造成DNA的损失。第二种方法是热失活:一般的酶如EcoRⅠ等在65℃保温60min即可;另一些酶如Hind Ⅲ等需在85℃保温 22 30min方能达到目的;极端的例子是Ttb Ⅲ甚至不能用加热的方法使之失活。热失活方法的特点是简单并且未向体系中引入任何物质,特别适用于连续进行几个酶切反应;热失活法的另一个特点是不用更换体系,所以不会造成DNA的损失。第三种方法是用酚和氯仿抽提使之失活,之后以乙醇沉淀DNA片段。这种方法的特点是处理条件剧烈,能使酶彻底失活(不像第一种方法中酶蛋白并未变性而只是没有激活因子而已)。

实验五

大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

23

一、实验原理

体外连接的重组DNA分子导入合适的宿主细胞中才能大量的进行复制、增殖和表达。研究发现,用含Ca2+ 的溶液处理大肠杆菌细胞会易于吸收外源DNA。大肠杆菌吸收外源DNA的过程被称为转化。细菌处于容易吸收外源DNA的状态称为感受态。用理化方法可以诱导细胞进入感受态,如电转化法、CaCL2法。

CaCL2法是目前实验室常用的制备感受态细胞的方法,其原理是使细菌处于0°C、CaCl2低渗溶液中,细胞膨胀成球形,细胞膜的通透性发生改变,外源DNA附着于细胞膜表面,经42°C短时间热冲击处理,促进细胞吸收DNA复合物。宿主细胞一般是限制―修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,而质粒载体携带有某一抗生素抗性基因,如抗氨卞青霉素的基因(AP+)。若将转化的细胞涂布与于含氨卞青霉素的平板上,则只有那些含有被转化质粒的细胞才能生存并生长增殖。从而可以筛选出哪个克隆含有质粒。

本实验以E.coli JM109菌株为受体细胞,受体菌使其处于感受态,然后与pUC18质粒共保温实现转化。将经过转化后的全部受体细胞进行适当稀释,在含有氨卞青霉素的平板培养基上培养,只有转化体才能存活,化的受体细胞则因无抵抗氨卞青霉素的能力而死亡。转化子经过扩增后,可将转入的质粒DNA分离提取出来,用于电泳分析、限制性内切酶图谱的制作以及

二、仪器及试剂

1.仪器:

恒温摇床、电热恒温培养箱、电热恒温水浴锅、超净工作台、分光光度计、高速冷冻离心机、台式离心机。

2.材料

E.coli JM109受体菌、质粒pUC18。

3.试剂:

LB培养液(1L):

胰蛋白胨

10g

酵母粉

5g

NaCl

10g(高盐)或

氨苄青霉素(Ampicillin)

100mg/ml

24

用CaCl2处理而未有转DNA测序等实验。 5g(低盐) 在三角瓶中将胰蛋白胨 10g,酵母粉 5g以及 NaCl 5g溶于1L的重蒸水中并高压灭菌。待冷却至55℃,向溶液中加入1.5ml 100mg/ml 的氨苄青霉素。然后贮存于4℃备用。

LB平板培养基:

胰蛋白胨

10g

酵母粉

5g

NaCl

10g

琼脂

13g

在三角瓶中依次将上述配方加入1L的重蒸水中并高压灭菌。待培养基降温至养基并轻轻旋转以使溶解的琼脂均匀分布于整个培养基溶液中,根据需要加入氨苄青霉素,然后可直接从三角瓶中倒出培养基铺制平板。90mm直径的培养皿约需培养基完全凝结后,倒置平皿并贮存于4℃备用。

其它试剂:

0.1M CaCl2溶液、灭菌蒸馏水

三、操作步骤

1.感受态细菌的制备:

(1)用接种环从E.coli JM109菌平板上挑取一单克隆菌落,培养基的试管中中,37℃ 220 rpm振荡培养过夜(12~16h)。

(2)取0.5 ml过夜菌液接种到装有50ml LB液体培养基三角瓶中中,振荡培养2-3h,隔20-30min测量OD600值,至OD600值为转至1.5ml 离心管中,每管1ml菌液,按需要决定管数。

(3) 4℃,12000 rpm,离心2 min,以回收细菌。

(4)倒净上清液,倒置离心管于滤纸上1min,使残留的痕量培养液流尽。冰预冷的0.1mol/L CaCl2悬浮细胞,冰浴30 min 。

(5)4℃,12000 rpm,2 min。

(6)倒净上清液,倒置离心管1min,使残留液流尽。每管加CaCl2重新悬浮细胞(重悬时操作要轻),即成感受态细胞悬浮液。

2.细菌转化:

(1)取3只灭菌的Ep管,分别编号

1、

2、

3、分别加入以下各组分:加入

25

5g , 30接种于装有0.3-0.4。无菌条件下将细菌100 ul冰预冷的 50℃,取出培50ml培养基。5ml LB液体37℃,220 rpm每管加1ml0.1 mol/L 10~20ng

或 ~ 质粒DNA(体积小于10ul),同时做两个对照组:

1号:受体菌对照组:

100ul感受态细胞悬浮液+2ul无菌ddH2O

2号:质粒DNA对照组:100ul 0.1mol/L CaCl2+2ul pUC19

3号:正常转化组:100ul感受态细胞悬浮液+2ul pUC19

(2)轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴30min,促进DNA分子在感受态细胞表面的吸附。

(3)转入便于DNA分子的吸附进入,提高转化率。

(4)迅速转入冰上冷却

(5)使受体菌恢复正常生长状态,并且表达

(6)取200ul37℃恒温培养箱倒置培养可将之置于37℃恒温培养箱继续培养,100ul左右,用移液器吹打重悬,再全部涂于含

(7)观察并记录转化子出现的数目,计算转化率。

四、注意事项:

1.实验中所用的器皿均要灭菌,以防止杂菌和外源

2.实验过程中要注意无菌操作,溶液移取、分装等均应在无菌超净工作台上进行。

3.必须设对照组,以检验实验过程中是否有污染。

4.整个实验过程均需置于冰上。

5.选用对数生长期细胞,

42℃水浴2min,通过热刺激增强CaCL2的作用, 2min,修复细胞膜。 600u无抗生素lLB液体培养基,摇匀后于37℃,Ampicillin抗性基因。 Ampicillin的LB平板,将平板置于无菌台直至液体被吸收,12-16h后观察结果,其余保存于4℃。如果平板上没有长出菌落,同时将剩下的500ul菌液离心,Ampicillin的LB平板上,置 DNA

OD600不应高于0.6。 26

使细胞膜产生通道,220 rpm,振荡倒掉大部分上清,37℃培养。 60min。留 加菌液涂在含 的污染。

实验六

动物组织细胞基因组

一、实验原理

真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,质、脂类和糖类等分离,又要保持组织细胞在含仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的

蛋白酶K在匀浆后提取EDTA则抑制细胞中分子完整地分离出来。

二、仪器及试剂

1.

恒温水浴锅、台式离心机、紫外分光光度计(离心管(灭菌)

SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶DNA的反应体系中,Dnase

、吸头(灭菌) DNA提取 因此,制备DNA分子的完整。提取KDNA溶液经乙醇沉淀使SDS和EDTA(乙二胺四乙酸二钠)存在下保持很高的活性。SDS可破坏细胞膜、活性;而蛋白酶K可将 27

DNA的原则是既要将DNADNA核膜,并使组织蛋白与蛋白质降解成小肽或氨基酸,GeneQuant)DNA。真核生物DNA与蛋白 DNA分离,使DNA 的一般过程是将分散好的的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯从溶液中析出。的重要特性是能在的 仪器:、移液器、玻璃匀浆器、

2.试剂:

(1)细胞裂解缓冲液:

Tris (pH8.0)

100 mmol/L

EDTA (pH 8.0)

500 mmol/L

NaCL

20 mmol/L

SDS

10%

胰RNA酶

20ug/ml

(2) 蛋白酶K:

称取20mg蛋白酶k溶于1ml灭菌的双蒸水中,?C20℃备用。

(3)TE缓冲液(pH 8.0):高压灭菌,室温贮存。

(4)酚?氯仿?异戊醇(25:24:1)、

(5)异丙醇、冷无水乙醇、70%乙醇、灭菌水。

三、操作步骤

1.取新鲜或冰冻动物组织块0.1g(0.5cm3),尽量剪碎。置于玻璃匀浆器中,加入1ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见组织块,转入1.5ml 离心管中,加入蛋白酶K (500ug/ml)20μl,混匀。在65℃恒温水浴锅中水浴30min,也可转入37℃水浴12~24h,间歇振荡离心管数次。于台式离心机以12000 rpm离心5min,取上清液入另一离心管中。

2.加2倍体积异丙醇,倒转混匀后,可以看见丝状物,用100ul 吸头挑出,凉干,用200ul TE 重新溶解。(可进行PCR反应等,需要进一步纯化的按下列步骤进行)

3.加等量的酚?氯仿?异戊醇振荡混匀,离心12000 rpm,5min。

4.取上层溶液至另一管,加入等体积的氯仿?异戊醇,振荡混匀,离心12000 rpm,5min。

5.取上层溶液至另一管,加入1/2体积的7.5mol/L乙酸氨加入2倍体积的无水乙醇,混匀后室温沉淀2min ,离心12000 rpm ,10min。

6.小心倒掉上清液,将离心管倒置于吸水纸上,将附于管壁的残余液滴除掉。

7.用1ml 70%乙醇洗涤沉淀物1次,离心12000 rpm , 5min。

8.小心倒掉上清液,将离心管倒置于吸水纸上,将附于管壁的残余液滴除掉,室温干燥。

28

9.加200ul TE重新溶解沉淀物,然后置于4℃或?C20℃保存备用。

10.吸取适量样品于GeneQuant上检测浓度和纯度。

四、常见问题

1.选择的实验材料要新鲜,处理时间不易过长。

2.在加入细胞裂解缓冲液前,细胞必须均匀分散,以减少

3.提取的DNA不易溶解:不纯,含杂质较多;加溶解液太少使浓度过大。沉淀物太干燥,也将使溶解变得很困难。

4.电泳检测时DNA成涂布状:操作不慎;污染核酸酶等。

5.分光光度分析DNA应加入SDS至终浓度为

6.酚/氯仿/异戊醇抽提后,其上清液太黏不易吸取:含高浓度的的量或减少所取组织的量。

A280/A2600.5%,并重复步骤 DNA团块形成。 1.8;不纯,含有蛋白质等杂质。在这种情况下,2~8。 DNA,可加大抽提前缓冲液29

的小于

实验七

DNA的定量

一、

实验原理

核酸分子(DNA或RNA)由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键,在260 nm的紫外吸收峰,其吸收强度与核酸的浓度成正比,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。

1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml,DNA 33 ug/ml和RNA 40 ug/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。

紫外分光光度法不但能确定核酸的浓度,还可通过测定260nm和280nm的紫外线吸收值的比值(A260/A280)估计核酸的纯度,纯的DNA制品的比值为1.8,RNA的比值为DNA高于1.8,则可能有RNA污染,低于1.8则有蛋白质污染。

对于很稀的核酸溶液,可用荧光光度法进行测定。DNA 本身并不产生荧光,但在荧光染料溴化乙锭(EB)插入DNA 的碱基对平面之间并与之结合后,DNA样品能在紫外光的激发下产生桔红色荧光。荧光强度与被结合的EB的量成正比,而被结合的EB的量又与核酸分子长度和含量成正比,使用一系列已知的不同浓度DNA溶液作标准对照,可比较出被测DNA溶液的浓度。灵敏度可达1~5ng。由于是基于目测,所以是估计水平。简便,但准确性较低。

二、仪器及试剂

1.仪器:Amersham

GeneQantTM Pro 紫外可见分光光度仪,琼脂糖凝胶电泳设备。

2.试剂及配制:

5×上样缓冲液:

配制10 ml

30

2.0, 波长处有特异若 该方法经济

0.5 mol/L EDTA(pH8.0)

2 ml

10% SDS

50 ul

50% 甘油

2.5 ml

0.2% 溴酚蓝

10 mg

0.2% 二甲苯青FF

10 mg

加去离子水至10 ml

其它试剂:0.1×TE、DNA标准液,EB储存液(10 mg/ml),

三、实验步骤

1.紫外分光光度法

(1)用0.1×TE对待测DNA样品按1:20或合适的倍数稀释。

(2)开机,仪器会自动对光路及分析软件进行检测,待显示屏上出现“instrument Ready”时,进入核酸测定窗口

(3)调零。先用0.1×TE缓冲液注入样品杯,放入样品槽,关闭盖板。点击“set ref”键,仪器自动校正零点。将样品槽内的样品杯取出,换上待测样品。

(4)吸70 ul已稀释的DNA样品转入石英样品杯,放入样品槽,关闭盖板。如果样品很少,可以用5~7ul的石英样品杯。点击“enter” 键,仪器即进入分析状态。窗口同时显示260和280nm处的光密度(OD值)及260/280nm和280/260nm的比率以及DNA样品的浓度等。

(5)打开盖板,取出石英样品杯,吸出样液,用高纯水清洁石英样品杯,风干后,再加入下一个待测样品。

(6)DNA纯度:以OD260/ OD280比值来反映。当OD60 /OD80比值 2.0,说明样品存在RNA污染,可以用RNA酶处理样品去处RNA。

2.EB荧光分析法

(1)琼脂糖凝胶的制备。

31

(2)样品的准备。把待测DNA样品进行1:2连续稀释,并准备一份DNA标准液作对照。

(3)上样。稀释样品与上样缓冲液按1:5混合均匀后上样。

(4)电泳。用100V稳压电泳至溴酚蓝指示剂迁移到凝胶的3/4处停止电泳。

(5)取出凝胶,入EB荧光染液中作用20min,取出后清水漂洗干净,然后紫外检测。肉眼可见到的最高稀释度约含DNA 80ng。此法也可用于了解核酸样品中的严重污染干扰核酸紫外线吸收物质的情况。

四、常见问题

1. 紫外分光光度法不能区分三种构型,也不能区分染色体染色体DNA、以及偏高。

2.OD320值是背景,若溶液盐浓度越高,

3.的光面以避免干扰测定。

DNADNA和DNA解链的增色效应等因素的影响,因此测得的数据往往比实际浓度 RNA等。由于测定吸收光度OD320也越高。要小心不要摔破,32

DNA分子的超螺旋、开环、线状A260时,难以排除 持杯时也不要接触透明RNA、分子的构型,如质粒测样品时使用的石英样品杯比较贵,

实验八

PCR基因扩增

一、实验原理

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一种体外核酸扩增系统,其原理类似DNA分子的天然复制过程,是将在待扩增的DNA片段和与其两侧互补的两个寡聚核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,生物学中一种有助于DNA克隆及基因分析的必需工具。

PCR的工作程序实际上是一个在模板种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应。扩增的特异性取决于引物与模板DNA的结合。整个扩增过程分三步:①变性,加热使模板裂而形成两条单链;②退火,突然降低温度后模板存在两条模板链之间的结合,但由于引物的高浓度、物与模板之间;③延伸,在DNA聚合酶及镁离子等的存在条件下,从引物的结合单核苷酸,形成与模板链互补的新的循环,样本中的DNA量就增加一倍,新形成的40个循环后,DNA 可扩增106~109倍。

二、仪器及试剂

1.仪器:PCR仪、台式离心机、移液器及吸头、

2.试剂:

10X PCR 缓冲液配制(部分随Taq

250~500 mmol/L

100~500 mmol/L

15~20 mmol/L

0.5%

1mg/L

其它试剂:模板DNA、dNTP 混合液、凝胶、等

DNA扩增 DNA、一对已知序列的寡核苷酸引物和四DNA引物按碱基配对原则互补结合,也结构简单等特点,DNA链。完成以上三步为一个循环,每经过一个DNA链又成为下一轮循环的模板。 现用图示说明PCRPCR薄壁管、电泳仪等: KCl Tris-Cl(pH8.4)

MgCl2

Tween-20

BSA Taq聚合酶、上游和下游寡核苷酸引物、琼脂糖33

2n 倍。该技术已成为分子DNA主要的结合发生在引: 3 ′端开始,经过25~ 双链间的氢键断 原理酶提供)

三、操作步骤

1. PCR 体系(40ul):

4ul

10XPCR 缓冲液

4ul

25mM MgCl2(根据不同公司PCR 缓冲液的不同而定)

Xul

模板DNA ≥50ng

1ul

上游引物(50-100ng)

1ul

下游引物(50-100ng)

1ul

dNTP Mixture(终浓度

0.4 ul

Taq聚合酶

加ddH2O至40ul

视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。

2.将上述试剂依次加入PCR薄壁管。加样后用手轻弹混匀,使反应成分集于管底。

3.PCR反应热循环程序设置:

(1) 95℃

300s

变性

(2) 94℃

45s

变性

(3) 55℃

45s

退火(根据不同引物可能有不同退火温度)

(4) 72℃

45s

延伸(每分钟可延伸

重复步骤2-4共 30 循环

(5) 72℃

600s

延伸

反应结束后短暂离心,吸取少量(10ul)进行分析,其余置

4℃保存备用。

4.琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物。

34

20-200uM) 1kp) 6000 rpm 15 sec

离心

四、注意事项:

1.PCR 体系所加成分的实际用量应根据实验者选用的该成分的终浓度及所拥有的贮备液浓度进行核算。

2.加样时要认真,吸头垂直进入试剂管,每加完一样要换一个吸头,同时在已加的样品前做个记号以防止错加或漏加,避免污染。

3.Taq聚合酶(置于冰盒上)应最后加入,尽量减少室温接触机会。加酶时吸头深入不可过深,酶量不能过多。

五、影响PCR的主要因素

1.模板DNA

单链、双链DNA白水解酶等的污染。模板用量依具体实验而定,PCR反应时模板变性要充分。

2.PCR引物

PCR引物设计是否成功是能否获得高质量应用时,需注意以下重要环节:

(1)PCR引物的长度约为以使它们在相近的温度下与其互补序列结合。随机的,应避免连续出现4个以上的单一碱基,否则会使引物在G+C富集序列区错误引发。引物免选用T ,尤其应避免连续出现

(2)一般来说,PCR引物长度选择24bp左右为宜。

(3)要避免引物分子自身序列互补,否则会形成发夹样二级结构。两个互之间的3,末端序列不能有明显的互补性,以免形成引物二聚体。

(4)引物的熔点温度(引物的GC/AT应与要扩增的模板

(5)引物的3,末端必须与模板严格互补,而

(6)目前在引物选择中已广泛应用计算机软件,从基因序列,并对设计的引物在引物二聚体形成、自身互补性及特异性等方面进行分析评价。 PCR

18~30个核苷酸,并且成对引物间的2个以上T500bp时,引物长度选择 Tm值)要适当。DNA相当或略高些。一般熔点温度以大于DNA样品尽量纯净,不能有核酸酶、蛋一般为100ul反应液有105-106个目标分子。PCR产物最关键的因素之一。在设计和G+C含量应相似。G+C含量应为45%~55%之间。碱基分布是尤其是不应在其3,端出现3个连续G或C,3,端碱基最好选用A、G、C,尽可能地避16-18bp;PCR产物≥5kb时,PCR引物相 Tm值与引物的碱基组成和长度有关;PCR55℃为宜。 5,末端的要求可灵活些。 EMBL或Genebank中查找有关

35

均可作为的模板,。 产物≤

(7)用于亚克隆的引物,常在引物的5,端加上限制性内切酶位点。为了保证内切酶有效酶切扩增产物,一般在酶切位点的5,端再加上几个额外的碱基。

(8)引物的浓度,在终浓度为0.2~1.0 umol/L的范围内产量基本相同,低于0.2 umol/L时会影响产量。但过高时一乃不经济,二则会出现非特异扩增及增加引物二聚体的产生。

3.热稳定DNA聚合酶(如Taq DNA聚合酶)

一般用量为2.5 U/100uL 反应体积。酶量过多易导致非特异性产物的产生。适温度为75℃,在低温下仍保留相当高的活性,易引起不完全配对的引物伸及引物二聚体的扩增延伸,所以应注意防止非特异性产物的出现。

4.dNTPs

PCR常用的dNTP浓度在50-200umol/L。四种

低则反应速度下降,过高则特异性下降,可根据具体实验来确定最适的

5.PCR缓冲液

因PCR反应中的dNTP能与Mg2+结合,影响反应液中游离应按不同条件,确定合适的Mg2+浓度。一般在标准的Mg2+浓度约为1.5mmol/L。Mg2+离子浓度可显著影响出现非特异扩增,过低则酶活性显著下降。应用无核酸酶的及5mmol的二硫苏糖醇(DTT)对酶有一定的保护作用。

6.PCR循环的温度

预变性:起始变性的时间应该长些,以使变性充分。一般为不完全时,DNA双链会很快复性,影响PCR反应,但若变性温度太高(不宜超过会影响Taq酶的活性。

变性:一般为94℃ 30s或95℃ 20s。

引物退火:应根据具体反应中引物与模板的碱基配对情况及实验的目的确定。一般为50-72℃。退火温度增高会增强对不正确退火引物的识别,还能降低引物酸的错误延伸。

延伸:一般为72℃ 60-90s。最后一个循环后应在物合成的完整性。

7.平台效应和PCR循环的次数

36

dNTPsPCR反应中(PCR的产量及产物特异性。BSA 72℃保留该类酶的最-模板的非特异延

dNTP浓度。 Mg2+的浓度,所以dNTP浓度200umol/L),浓度高则Tween-20(0.05%~0.1%)94℃ 3-5min。变性95℃),3,端不正确核苷5min,以保证PCR产应等当量。浓度、

在PCR基因扩增的后期,由于产物的堆积,将使原来产物以指数增加的速度变为平坦曲线,即所谓平台效应。它的出现是由于PCR原料的不断消耗、酶的稳定性的降低、终产物的阻滞效应及非特异性产物等多种因素造成的,所以选择合理的循环次数,既能得到足够量的PCR产物,又不要无意义地增加循环次数。

8.操作环境

避免环境污染和交叉污染,如核酸酶的污染、非目标DNA的污染等。

37

实验九 琼脂糖凝电泳分离与纯化目的

一、实验原理

不同大小的片段分离位于不同的位置,的片段。有许多型号的低熔点琼脂糖可在双链DNA的解链温度高于收DNA片段。该法的优点是可直接在熔化的凝胶中进行各种酶反应,如合成同位素探针、进行限制酶切割和连接反应等。

二、仪器及试剂:

1.仪器

电泳仪、凝胶成像系统、移液器、离心管、吸头等。

2.试剂:

低熔点琼脂糖、待纯化的

三、操作步骤:

1.配制1%的琼脂糖凝胶,在适当的位置切一条与加样槽平行的槽,换低熔点琼脂糖凝胶。

2.加样,100V

DNA DNA酶切片段是基因工程中常用的手段。在电泳过程中切下目的片段并采用低熔点琼脂糖回收法即可获得目65℃时熔化成液体,在65℃,所以可以熔化凝胶而 DNA、凝胶回收试剂盒、去离子水或38

30℃时凝固成凝胶。由于DNA并不变性,在凝胶成液态时回TE(pH7.6)

分离和纯化

电泳,观察所需片段是否移至低熔点胶内。3.在紫外灯下切含有DNA的低熔点胶,置1.5 ml离心管中,于70℃热水中熔化。

4.按凝胶回收试剂盒说明书操作。

12.取适量纯化好的目的DNA在 GeneQuant 中检测,确定纯度和浓度,其余样品于-20℃保存。

四、注意事项:

1.配凝胶的三角瓶、电泳槽和配胶板要先冲洗干净

实验十

DNA重组

一、实验原理

外源DNA与载体分子的连接就是DNA重组,这种重新组合的DNA在体外的连接重组是基因工程操作的核心技术之一,其本质是一个酶促反应过程。即在一定的条件下,DNA连接酶催化两个双链DNA用,形成磷酸二酯键的过程。常用的DNA连接酶有两种:菌DNA连接酶。其中T4噬菌体DNA连接酶对底物的要求低,能更有效地连接末端,应用更广泛。

T4噬菌体DNA连接酶催化DNA连接反应分连接酶通过ATP的磷酸与连接酶的赖氨酸的氨基形成酶―随后从赖氨酸残基转移到DNA一条链的5¹端的磷酸基团上,形成磷酸―磷酸键。③链3¹端的羟基被活化,取代ATP后与DNA5¹端的磷酸根形成磷酸二酯键,完成DNA之间的连接。T4噬菌体DNA连接酶需要镁离子和温度和pH条件下进行连接反应。

二、仪器及试剂:

1.仪器:

台式离心机、移液器、吸头、恒温水浴锅等。

2.试剂:

T4 DNA连接酶、10×T4 DNA连接酶缓冲液、载体

三、操作步骤

1.外源DNA片段和载体DNA的连接

39

DNA5¹端磷酸和3¹端羟基之间相互作T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆3步:①首先,ATP与T4ATP复合物。②被激活的并释放出ATP作为辅助因子, DNA、外源DNA。 DNA的平DNAAMPDNAAMP,在一定的 叫做重组子。片段的噬菌体

取1只无菌Ep管、用微量进样器按下列顺序加入各成分。

10×T4 DNA Ligase Buffer

2.5 ul

酶切后的DNA片段

*1

约0.3 pmol

酶切后的载体DNA *2

约0.03pmol

T4 DNA Ligase

ddH2O

*1 DNA片段的摩尔数应控制在载体

*2 相同末端的载体与DNA自身环化。

2.盖好盖子,用手指轻弹Ep

3.将反应管放入16℃过夜反应(

4.取出约25ng的DNA连接液进行琼脂糖凝胶电泳,片段和酶切DNA片段作电泳。

5.用0.1×TE将连接混合物稀释至

四、注意事项

1.连接产物经鉴定后应迅速做转化实验。

2.根据具体情况调节酶的用量。平端连接或接头连接都比黏端连接慢得多,而且酶的用量也增大。

3.单价阳离子或低浓度的聚乙二醇可提高平端连接的效率。

4.防止载体DNA自身环化,常用碱性磷酸酶处理线性载体,去掉载体的DNA片段的自身环化。

5.正确调整载体DNA和外源

五、相关问题

1.连接反应的影响因素

1ul

加至 25ul DNA摩尔数的3-12~16h)。 鉴定连接结果, 50ul,使用10~20ul DNA之间的比例有助于获得高产量的重组产物。40

10倍。 2s 以集中溶液。 以未经连接的质粒 5¹?CDNA

片段进行连接时,应首先将载体进行去磷酸化处理,以防止其管数次,并于台式离心机离心转化大肠杆菌感受态细胞。 磷酸以抑制

除了载体、供体的浓度及其比例等因素外,影响连接反应的因素还有很多,如缓冲液组分、连接温度与时间、酶浓度、DNA浓度及片段末端的碱基序列等。

(1)连接缓冲液的影响

不同的公司提供的连接缓冲液可能有所不同,但大体上都含有以下组分:20-100mmol/L的Tris-HCl,较多用50mmol/L,pH的范围在7.4-7.8,较多用7.8,目的是提供合适酸碱度的连接体系;10mmol/L的MgCl2,作用是激活酶反应;1-20mmol/L的DTT,较多用10mmol/L,作用是维持还原性环境,稳定酶活性,25-50ug/ml的BSA,作用是增加蛋白质的浓度,防止因蛋白浓度过稀而造成酶的失活。与限制酶缓冲液不同的是连接酶缓冲液还含有0.5-4mmol/L的ATP,现多用1mmol/L,是酶反应所必需的。

(2)pH的影响

一般将缓冲液的pH调节到7.4-7.8,较多用7.8。有实验表明,若把pH为7.5-8.0时的酶活力定为100%,那么体系偏碱(pH为8.3)时仅为全部活力的65%;当体系偏酸(PH为6.9)时仅为全部活力的40%。

(3)ATP浓度的影响

连接缓冲液中ATP的浓度在0.5-4mmol/L之间,较多用1mmol/L。研究发现,ATP的最适浓度为0.5-1mmol/L,过浓会抑制反应。例如,5mmol/L的ATP会完全抑制平末端连接,黏端的连接也有10%被抑制;还有报道,当ATP的浓度为0.1mmol/L时,去磷酸载体的自环比例最大。由于ATP极易分解,所以当连接反应失败时,除了DNA与酶的问题外,还应考虑ATP的因素。含有ATP的缓冲液应于-20℃保存,溶化取用后立即放回。连接缓冲液体积较大时最好分小管贮存,防止反复冻融引起ATP分解。与限制酶缓冲液不同的是,含ATP的连接缓冲液长期放置后往往失效,所以也可自行配制不含ATP的缓冲液(可长期保存),临用时加入新配制的ATP母液。

(4)连接温度与时间的影响

因为黏性末端的DNA双链间有氢键的作用,所以温度过高会使氢键不稳定,但连接酶的最适温度又恰为37℃。为了解决这一矛盾,在经过综合考虑后,传统上将连接温度定为16℃,时间为4-16h。现经实验发现,对于一般的黏性末端来说,20℃ 30min就足以取得相当好的连接效果,当然如果时间充裕的话,20℃ 60min能使连接反应进行得更完全一些。对于平末端是不用考虑氢键问题的,可使用较高的温度,使酶活力得到更好的发挥。

(5)酶浓度的影响

根据New England Biolabs公司对T4 DNA连接酶的定义,1U的酶可在16℃ 30min内连接20ul体系中Hind Ⅲ酶切片段(黏性末端为0.12umol/L 5,末端,此时DNA质量浓度约为300ng/ul)的50%。日常使用的DNA浓度比酶单位定义状态低10-20倍,连接平末端时酶用量要比连接黏端大10-100倍,厂商为了满足这一要求,又往往提供高浓度的酶(几百个 41 单位/ul),所以进行黏末端连接时需先行稀释。除了立即用于反应的部分可用酶反应缓冲液稀释外,其余都应使用厂商提供的稀释液。稀释液的成分与酶保存缓冲液相同或类似,稀释液中的酶能在长时间保持活力,也便于随时取用。

(6)DNA浓度的影响

尽管有的实验手册上推荐使用0.1-1nmol/L的DNA浓度,但考虑到用质粒作为载体克隆时,最后要求得到环化的有效连接产物,所以DNA浓度不可过高,一般不会超过20nmol/L。相比较而言,以噬菌体、cosmid质粒为载体的克隆过程最后要求线性化的连接产物,所以,DNA的浓度可以高些,至少是接近推荐的浓度。此外,在用大质粒载体进行大片段克隆时,以及在双酶切片段的连接反应中,DNA浓度还应降低,甚至是DNA的总浓度低至几个nmol/L。另据研究,T4 DNA连接酶对DNA末端的表观Km值为1.5nmol/L,所以,连接时DNA浓度不应低于1nmol/L。即应具有2nmol/L的末端浓度。

2.三种连接酶单位定义

(1)Wei单位

连接酶单位最早是1968年由Wei提出的Wei单位,现也称PPi单位。他的单位定义为:37℃ 20min内将1nmol的32P从焦磷酸根上置换到ATP分子上所需的酶量。现在大多数厂商仍使用这种单位。

(2)d(A-T)环化单位

由于Wei单位定义中测试的是T4 DNA连接酶中除连接功能外的另一种磷交换功能,并且测试温度高达30℃,与实际连接反应相比无论在哪一方面都有一定的差距,于是,1970年Modrich与Lehman提出了真正度量连接功能的d(A-T)环化单位,又称外切酶抗性检测。d(A-T)环化单位的定义为:30℃ 30min 内将100nmol/L的d(A-T)(约2kb长)转化成抗外切酶的形式。

(3)黏性末端单位

与Wei单位相比,d(A-T)环化单位更接近实际,但仍有一定的问题,例如,环化单位测试中用的是纯AT片段,与实际连接中4种碱基随机排列不符;再说,如果连接酶将片段连接成多聚体而末环化时,仍可能被外切酶组所切;除此之外,与实际上大多数连接反应使用的温度16℃相比,30℃仍显得偏高。为了衡量实际连接条件下的酶活力,New England Biolabs公司提出了最实用的黏性末端单位,它的单位定义为:16℃ 30min内将5,末端浓度为0.12umol/Lλ-HindⅢ 酶切片段的50%连接上。

42

实验十一 动物组织细胞总RNA的提取

一、实验原理

RNA是基因表达的中间产物,存在于细胞质与核中。对中占有重要地位。获得高纯度和完整的RNA 是很多分子生物学实验所必需的,如杂交、cDNA合成及体外翻译等实验的成败,在很大程度上取决于内的大部分RNA是以核蛋白复合体的形式存在,所以在提取质变性剂,迅速破坏细胞结构,使核蛋白与RNA分离,释放出机溶剂处理、离心,使RNA与其他细胞组分分离,得到纯化的总抑制内源和外源的RNase活性,保护RNA分子不被降解。中进行。可使用RNase抑制剂,如DEPC是RNase的强抑制剂,常用来抑制外源性。提取缓冲液中一般含SDS、酚、氯仿、胍盐等蛋白质变性剂,也能抑制并有助于除去非核酸成分。

本实验介绍异硫氰酸胍法和TRIzol法提取动物组织总

二、仪器和试剂

1.仪器:

超净工作台、高速冷冻离心机、电泳仪、紫外分光光度计、吸头、Ep管、玻璃匀浆器、试管、

玻璃器皿洗净后置180℃烘烤8h;不耐高温的器皿(如塑料制品)应用2h,70~80℃烘烤干燥,120℃高压20min,再70~80

2.试剂:

(1)细胞裂解液:

异硫氰酸胍

4mol/L

柠檬酸钠(pH7.0)

25mmol/L

十二烷基肌氨酸钠

0.5%

43

RNA进行操作在分子生物学NorthernRNA的质量。由于细胞RNA时要利用高浓度的蛋白RNA。再通过酚、氯仿等有RNA。在提取的过程中要RNase的环境RNase活RNase活性。RNA并通过电泳 进行鉴定。 振荡器、移液器、0.1% DEPC浸泡 因此提取必须在无凝胶成像系统、℃烘烤干燥方可使用。

β-巯基乙醇

0.1mol/L

称取柠檬酸钠0.64g,十二烷基肌氨酸钠0.415g,吸取β-巯基乙醇0.7ml,用无Rnase的蒸馏水溶解,定容至50ml。然后取以上配制的溶液(CBS液)33ml,异硫氰酸胍 25g,混合,完全溶解后4℃保存备用。

(2)10×凝胶缓冲液:

吗啉代丙璜酸(MOPS)(pH7.0)

200mmol/L

NaAc

EDTA(pH 8.0)

过滤除菌后避光保存。

(3)5×变性上样缓冲液:

水饱和的溴酚蓝

500mmol/LEDTA(pH 8.0)

甲醛(37%)

甘油

甲酰胺

10×凝胶缓冲液

加无RNase水至10ml,4℃可保存

(4)TRIzol RNA抽提试剂

(5)2mol醋酸钠

(6)0.1% DEPC

(7)平衡酚:氯仿:异戊醇(

(8)平衡酚、氯仿

(9)无水乙醇、70%乙醇、异丙醇

100mmol/L

10mmol/L

16μl

80μl

720μl

2ml

3084μl

4ml 3个月。 25:24:1)

44

(10)无RNase水

三、操作步骤

(一)异硫氰酸胍法(PLT)

1.取新鲜动物组织0.1~0.2g置于组织匀浆器中,加入预冷的细胞裂解液1ml,在冰浴中迅速匀浆15~30s,以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一试管中。

2.加入2mol醋酸钠(pH4.0)120μl,充分混匀。

3.加入1.2ml酚:氯仿:异戊醇,充分混匀摇振10s,冰浴15min。

4.将混合物转移至1.5ml Ep管中,4℃,离心10 000r/min,20min.

5.移取上层水相至另一Ep管中,加入等体积的异丙醇,静置?C20℃,30min沉淀RNA.

6.4℃,离心12 000r/min,15min.

7.弃上清液,加入70%乙醇400μl,洗涤RNA沉淀物;如果RNA沉淀物被悬浮,则4℃离心10 000r/min,10min。

8.弃上清液,自然干燥,但应避免沉淀完全干燥,否则RNA难以溶解。

9.加入100μl无RNase水重悬RNA,或加1ml无水乙醇和1/10体积3mol醋酸钠(pH4.0),?C70℃保存。

(二)TRIzol试剂提取RNA

1.取新鲜动物组织0.1~0.2g置于组织匀浆器中,加入预冷的Trizol液 1ml 于玻璃匀浆器中,在冰浴中迅速匀浆15~30s,以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一1.5ml Ep管中,于室温下静置5min。

2.加入200μl氯仿,剧烈振摇15s混匀后,室温静置3min。

3.4℃,10 000r/min离心15min,RNA分布于水相中。

4.将上层无色水相转移到另一Ep管中,加入500μl 异丙醇,室温静置10min。

5.4℃,10 000r/min离心10min。

6.弃上清液,用1ml 75%乙醇洗涤RNA沉淀物,4℃,7500r/min离心5min。

7.弃上清液,室温干燥15min.

45

8.向干燥过的沉淀物中加入200μl DEPC处理水(无核水)溶解沉淀物,于-20℃保存备用。

(三)RNA检测

1.在紫外分光光度计上检测RNA浓度及纯度。

方法同实验四,用DEPC处理水校正零点;用DEPC处理水稀释RNA样品;读取OD260、OD280值及OD260/OD280的比值。

2.琼脂糖凝胶甲醛变性电泳检测

(1)制备凝胶(1.2%)。称1.2g琼脂糖,加72ml DEPC处理水,加热熔化。冷却至60℃,在通风橱内加入10×凝胶缓冲液10ml,甲醛(37%)18ml,混匀后,倒胶。

(2)制备样品。在离心管中,将RNA样品与5×变性上样缓冲液以4:1温育5~10min,迅速在冰上冷却5min,离心数秒。

(3)上样前凝胶须预电泳5min,随后将样品卷入上样孔。以5V/cm的电压电泳2h.。

(4)待溴酚蓝迁移至凝胶长度的2/3~4/5处结束电泳。将凝胶置于溴化乙啶溶液μg/ml,用0.1mol/L乙酸胺配制)中染色约30min。

(5)在凝胶成像系统观察并分析。

四、注意事项

1.RNA是极易降解的核酸分子。因此提取总RNA必须在无RNase 环境中,戴口罩、手套、使用无RNase污染的试剂、材料、容器。

2.所有溶液应加DEPC至0.05%~0.1%,室温处理过夜,然后高压处理或加热至小时或60℃过夜,以除去石油残留的DEPC。

3.所用的化学试剂应为新包装,称量时使用干烤处理的称量勺,所有操作均应在冰浴中进行,低温条件可减低RNA酶活性。

4.根据RNA样品的紫外吸收OD值,可计算出RNAd 浓度。

单链RNA [RNA]=40×(OD260-OD310)×稀释倍数

纯RNA OD260 / OD280比值通常在1.7~2.0。若比值低于1.7,说明有蛋白质等污染,/氯仿在抽提。若比值低于2.0,表明有盐、胍、糖可用LiCL选择沉淀RNA以除去杂质。

46

65℃1.5~(0.570℃ 1 应用酚 混匀。

5.RNA样品电泳后,可见28S、18S及5S小分子RNA条带,则说明完整性好。若有降解可能是操作不当或污染了RNase.。28S和18S RNA比值约为2:1,表明RNA无降解。如比值逆转,则表明RNA降解。电泳中如果在28S 后方还有条带,表明有DNA污染,应用DNase处理后再进行纯化。

主要参考书:

1..金冬雁等译.分子克隆实验指南. 第二版.北京:科学出版社,1995

2.子颖等译.精编分子生物学实验指南

3.周俊宜编.分子生物学基本技能和策略

4.姜泊等编.分子生物学常用实验方法

5.刘进元等编.分子生物学实验指导

.科学出版, .

科学出版社 .北京:人民军医出版社,.北京:清华大学出版社,47

1996.2002.

第11篇:.2实验室及仪器管理工作计划

实验室及仪器管理工作计划

(2016—2017学年度第二学期) 为了进一步对我校实验室和实验仪器管理,发挥实验教学和实验室在我校素质教育中的重要作用。为进一步提高小学实验的管理水平和能力,以及实验室材料实现科学化、分类、分档、档案管理,加强实验水平和实验效果,更好,更全面地实施素质教育,推进教育发展。

一、基本情况及目标

我校现有实验仪器保管室一间,实验室一间,配备的小学实验仪器、药品已分类存放。实验教学由学校主任宴红负总责,张 锦为实验仪器管理员。按国家教委颁布的教学大纲开齐开足实验教学课程,实验开出率达到100%。引导学生基本能亲手完成各个实验,形成一定实验技能,培养科学的实践,实验,观察能力。

二、课程安排

本校共六个年级18个班,每周每班两节实验科学课。担任科学课的教师有张锦担任

五、六年级,李能兴担任

三、四年级。

三、具体工作措施

1.实验室工作由主任直接管理,实验室设专门管理员及实验员,具体管理实验室工作。

2.科学实验教师必须爱岗敬业,模范遵守和执行实验室的一切规章制度,并严格要求学生遵守相关纪律制度。

3.实验教师对分管的仪器设备和药品实行科学化、规范化管理,做到依类定柜,柜内定点,帐物清楚。

4.上课教师拟订实验目录,及时收回并整理好实验登记表。

1 5.上课教师实验前要认真准备,上好实验课。实验完毕,认真检查、清点好仪器并填好实验登记表并及时交回管理人员处。

6.师生共同遵守操作规程,定期保养实验仪器;严防火灾、触电、中毒、锈蚀、盗窃等事故发生。

7.充分保持实验室、仪器室内外整洁。8.上课教师积极引导学生自制教具。 9.必须做好实验仪器借还登记表

四、管理措施

1.任课教师必须提前将“实验通知单”填好后交管理人员处,便于及时准备仪器。

2.实验过程中,要求教师和学生都要按照正确的操作步骤进行。3.在实验室,师生都要爱护环境卫生.4.上课教师要认真填写好各类表册。

5.教师必须按时按质按量完成本学期实验,否则按学校相关规定处理。

6.损坏仪器按《贵州省中小学学校实验仪器设备损坏赔偿制度》和《贵州省中小学学校实验室仪器设备报损报废制度》处理。

7.其他相关工作

做好与实验室及实验室管理相关的一系列工作。

2017年3月

第12篇:实验室设备及装备采购规范

2012实验室设备及装备采购规范

本采购规范仅提供参考

第一章 总则

为加强对实验室仪器设备的采购管理,规范采购行为,提高资金的使用效益,根据《中华人民共和国采购法》、《中华人民共和国招标投标法》等相关法律法规的规定,结合学校实际情况,特制定本办法。

第一条凡使用学校管理的资金采购实验室仪器设备的,均适用于本办法。

第二条实验室与设备管理部是经学校法定代表人授权的仪器设备采购的执行机构,负责实验室仪器设备采购活动的组织与实施。

第三条学校可根据不同专项资金的特殊要求,另行制定相应的专项资金实验室仪器设备采购规范。

第二章实验室设备及装备采购审批与论证

第四条

(一)3万元人民币以下的实验室设备及装备需负责人审批。

(二)3万元人民币(含)以上的实验室设备及装备需由主管负责人审批后由实验室与设备管理部负责人审核。

第五条

(一)购置预算单价在20万以上的实验室设备及装备均应填写《申请购置大型实验室设备及装备可行性论证报告》,并按《大型实验室设备及装备管理办法》分级进行可行性论证。

(二)在论证前,项目单位应对供应商情况进行调研,在条件许可的情况下应选择多个供应商并了解其技术能力、资信状况及售后服务等综合情况。

第六条论证必须采取相关有效的论证措施:

(一)向供应商发出邀请,并填写回执,供应单位必须提供准确的时间及地点(或相关展会),对所需采购的仪器提供展示、演示。

(二)校方组成三人以上的观摩团,按其指定的地点进行观摩考察,考察后呈报《论证报告》。

(三)观摩团应配备视频设备,对所考察的全程应做好记录及备案工作与《论证报告》一并提交。

第七条论证通过后,购置预算单价在20万元(含)—80万元(不含)人民币的,由实验室与设备管理部负责审批后进入采购阶段。购置预算单价在80万元(含)人民币以上的,由主管校长进行审批后开始采购。

第三章实验室设备及装备的采购

第八条实验室设备及装备采购方式分为:招标采购、非招标采购(集中采购、学校采购、自购或参加展会采购)。

第九条招标采购,单台或批量的仪器设备总价在20万元人民币以上的,由学校统一组织招标采购,具体实施细则详见《学校实验室设备及装备招标采购管理办法》。

第十条非招标采购

(一)集中采购:属于集中采购目录范围内的仪器设备的采购,按照集中采购办法执行。

(二)学校采购:不在集中采购范围内的,或在集中采购范围内,但因价格等因素造成采购成本不合理的仪器设备,可在实验室与设备管理部提供的协议供货厂商名单范围内采购。凡上述采购范围之外的仪器设备,由实验室与设备管理部负责采购。

(三)自购:专业性较强或本应采取集中采购的仪器设备,如用户因特殊要求需自购的,用户需向实验室与设备管理部提出书面申请并获得批准后,方可自购。

(四)各部门应大力推广展会采购:尽可能利用设备仪器比较集中的大型展会,在展会现场多方比对、多方询价,对学校节省采购成本。

(五)需到厂家自购设备的必须由学校批准,自购形式应以中立的采购模式为主,例如展览或企业自发的演示及展示会议活动。

第四章实验室设备及装备采购合同

第十一条

(一)凡实验室设备及装备的购置,原则上都应签订合同,作为买卖双方的法律依据和保障。1万元人民币、以上的必须签订采购合同。

(二)3万元人民币)以上的实验室设备及装备采购合同,须由实验室与设备管理部会同申购者签订购货合同,并加盖实验室与设备管理部合同章,方为有效。

第十二条合同内容由双方当事人约定,包括以下条款:当事人名称或姓名和地址、设备名称、数量、价款、技术指标验收标准、交货期限、地点和方式、售后服务条款、违约责任以及解决争议的方法等。 第十三条实验室与设备管理部经授权代表学校对外签订实验室设备及装备购置合同,负责监督合同的执行、处理相关的合同纠纷并对采购合同书进行管理及存档。

第五章实验室设备及装备采购监督

第十四条学校实验室设备及装备采购工作接受财务等部门的监督。任何单位和个人对采购活动中有违法行为,有权向学校监察部门反映情况。

第十五条各相关人员必须严守纪律、严格执行规定程序和制度,主动接受有关部门的监督检查。对于在采购活动中的违规违纪行为,学校将根据有关规定追究其责任,构成违法犯罪的,移送国家有关部门处理。

第六章附则

第十六条本办法由实验室与设备管理部负责解释。自发布之日起施行。

第13篇:科学实验室仪器管理、实验教学工作总结

2012学年

科学实验室仪器管理、实验教学工作总结

一学年的工作即将接近尾声。 在过去的一年里,我校围绕我区仪器站工作计划内容,继续加强学校科学实验室建设、仪器配备、管理和使用,不断提高服务水平,使实验教学工作进一步规范。下面将我校一年来的工作总结如下:

一、实验室仪器装备管理工作:

1、学校领导非常重视实验教学工作,按上级业务部门要求,制定一系列规章制度,并照章落实于工作中。

2、配齐工作人员,立了工作领导小组。

3、彻底清查了教学仪器器材,做到帐物相符。所有仪器按要求贴有分类标签和仪器标签,并归类存放,对更新的仪器标签和分类标牌标签进行及时更换。

4、学校实验室工作管理水平不断提高。实验室利用率高,实验教学做到了实验仪器准备及时,授课规范,促进了实验教学的开展。

5、严格管理制度。对实验室工作进行规范化管理。化学危险品专柜存放,实行严格使用管理,严格使用登记制度,保证实验室的安全。做到各种帐簿齐全、规范。借还手续严格,借出归还严格执行登记制度。

6、各种实验器材存放整齐、有序,符合摆放要求。

7、档案管理科学规范,各种账目档案齐全,做到 电子帐、报废申请单和实物帐一一对应,帐物相符。

8、清查了科学、数学、音、体、美、英语六科仪器,按上级要求重新录入省仪器帐。

9、2012年12月20日,实验室各项工作顺利通过验收。

二、实验教学工作。

1、充分利用实验仪器开足实验课,发挥仪器在课堂教学中的作用,认真开展好实验教学,充分发挥器材在教育教学中的效用。本学年,根据教材要求,开足每一节实验课。本学年实验开出率达100%。

2、认真开展自制教具和实验教学改进工作,对教材实验教学中出现的问题和疑问进行研救,改进实验方法,力求实验教学方案最优化。认真进行自制教具研制工作,弥补实验教学不足,实现实验教学的科学性、趣味性、可视性。

三、实验教师的自身建设:

1、实验教师能够做到认真钻研业务,不断提高工作能力和业务水平,以适应新形势下的工作要求。

2、加强服务意识培养,实验教师做到提前做好实验准备工作,保证课堂实验教学顺利进行。

3、专任落实工作职责,明确工作任务,做到科学教学工作不失误,及时完成上级安排的各项工作任务。

4、责任教师及时上报各种信息、数据。按时、保质完成各项上报工作任务。

5、加强科学教师培训工作。加强实验教师仪器使用培训工作,实验教师能够做到熟练的使用器材上课。认真参加教学和培训活动,不断提高自身素质,不断提高科学的教学水平。

第14篇:马场小学实验室、仪器室工作总结

马场小学实验室、仪器室工作总结

拟写人:章仁军

本学期在学校各级领导——特别是新任领导及其他教师的关心、配合下,学校实验室管理工作取得了一些成绩,在很多方面走上了更高的台阶,作为实验管理员个人来说,也在从思想到行动、从理论到实践等方面较好地完成了自己的任务。努力做到了管理工作和和教学工作的紧密结合,有力地促进了实验教学的顺利进行。

具体工作总结如下:

1、开学初就认真制定了2010—2011学年度第二学期工作计划和实验室课程计划。并对实验室的所有仪器进行了盘存工作。

2、开学初期就排出了三年级的四个班的固定的实验室座次表,并制订了由小组为单位的组长负责制。使学生进入实验室后,有序就做,并在实验后由课代表和小组长进行清点、整理、清洁工作。

3、打了一场漂亮的攻坚战! 学校规范化验收的进程其实就是一场艰苦卓绝的战争。那一个多月的工作量和工作压力是用任何语言也难以表述的。在那些“暗无天日”的日子里,上班和下班没有什么界限,白天和夜晚没有什么区别,最可怕的是自己兼任的两个科技班的教学工作成了我“误人子弟”的的追悔和尴尬,一个多月没有休息一天,一个多月的激烈拼杀,一个多月的殊死搏斗,一个多月的梦魇生活,一个多月(对

1、2班)的痛心疾首,成了我教学工作中一个永远的缺憾和忏悔„„要知道每个晚上整理档案我都要忙到十

一、二点,哪里来得及钻研教材和周密备课。不说了,一切都已告一段落,况且自己作为行为客体本来就是身不由己的。

4、继续加强仪器室和实验室的安全保卫工作

5、继续做好实验室物理仪器的科学管理工作,努力做到仪器存放系列化和保管科学化,并做好仪器的保养、防腐、防潮、防尘、防蛀等工作。

6、实验教学是一个系统过程,教学时既要重过程,也应该注重结果,为此,我们在本学期依据中考的要求继续组织了初四年级的实验操作考核模拟练习,首先我在器材和其它事项上做了充分的准备,然后我和程老师分工,一个一个地、讲解、指点、把关,从而使得操作考试的进行基本做到了有条不紊。以力争继续蝉联前几年的实验操作成绩的冠军宝座。

7、拓展途径,兼顾其它

实验室工作与其它工作一样,同样是促进学生全面发展地一个主阵地。为促进学生的全面发展,培养学生创新精神和实践能力,本学期我对初三的三个班实施了定时开放活动,并大力提倡开展课外科技实践活动,如定期进行了小制作评比活动和小发明评比活动,努力为学生搭建一个提高实践操作能力的平台,使部分学生的科技创新能力上升到一个更高的层次。

8、继续实践着实验器材的“节约”行为 一些自己能够制作和组装的器材,我不惜花费时间和精力进行自制和组装工作,比如这学期我自己接了约150根导线。其它的工作依然杂碎而繁多,仪器的保养工作,日常的卫生扫除,仪器的归类摆设,帐簿的及时盘整和填写„„在仪器橱的摆放布局上也费了一番思索,下了一番工夫。

有一些现况仍然是令人遗憾的:仪器室不方不圆,仪器橱破旧不堪:样式不

一、颜色不

一、厚薄不一,好在我在冥思苦想后找到了更好的摆设方案。仪器数量不多,鸡肋不少。墙皮也因为多年没有粉刷而导致墙皮脱落严重。防盗门锈蚀严重。仪器室的窗户依然是原始框架。所有这些都影响和动摇了我抢胜夺优的信心和决心。

在看到成绩的同时,我也深感在不少方面还存在问题,反思一学期来的工作,认为存在的问题主要有:器材、资料的进出记录不及时,有时临时借用不记账且不按时归还,而自己碍于颜面又不好意思多说。另外,对个别仪器的使用方法,特别是不少旧仪器,因找不到对应的说明书而处于空白状态,各种科技活动及自制教具工作因经费问题根本不上档次,等等。

面对着教学工作和实验准备及仪器保管双重任务,我的感受真切而又自私:身不由己!“既得抓紧教学,还要维护、管理好两室,绞尽劲脑汁地想着如何让实验室再上点儿档次,因而常常是忙得一塌糊涂,工作生活也倍感压力。举一个最简单的例子:有时候我上午因上课找不到一点空闲,但又不能耽搁下午的实验,特别是初四的操作考核实验,我不得不利用放学后的时间来完成自己应该做的一切,因而常常在中午12点以后才拖着疲惫不堪的身躯踏上回家的路途。

不过,我也要衷心的告知每位领导和教师:实验室地处一个偏僻的角落,平时你们是很少光顾的,所以你们到实验室的时候所看到的只是结果。有谁知道两室的管理在操作过程上也需要一丝不苟的作风和废寝忘食的劳作。你以为那些仪器永远是听话的乖孩子吗?你认为那些仪器永远是那么健康而不需要诊治吗?你认为准备实验就仅仅只是简单地把仪器从厨子挪到提盒或搬到实验桌上吗?你认为那三十多个档案盒和五薄两单是像罗马一样在一夜之间建成的吗?你认为那些个自制教具是随意拼凑的吗?你认为实验室中的那些特殊气味不会影响到人的健康吗?你认为实验室的卫生工作„„

实验室是学生非常喜爱的探究场所,也是学生成长过程中的一个必需环境,会为学生的成才带来很大的帮助。因此,在接下来的时间里,我会继续将她建设好,管理好,让她在实验教学中发挥更大的功能和作用。

让管理工作不再有所疏忽——为什么要摆出这样一个题目,其实我的用意就在字里行间,我要用这个概念反复地告诫自己,要履行好自己的管理职责,就不要让任何疏漏从自己的眼皮底下晃过,毕竟,实验室的管理工作更需要精雕细琢。

2011-7-10

第15篇:医学装备、仪器档案管理制度

医学装备仪器档案管理制度

一、医学装备档案工作属于科技档案管理范畴,是医院综合管理的重要组成部分。

二、负责对医院购进的仪器设备进行开箱验收、安装调试、使用维修、技术改造、运行情况、报废等情况作真实记录。

三、负责对已形成的设备档案进行分析提炼、整理、详细分类、摆放整齐,方便查阅。

四、负责档案的完整性,随机附有的图文技术文件及其它有保存价值的材料,应全部收齐存档。为设备的操作、维修提供资料,为医院的宏观管理提供参考。

五、负责对设备档案的管理,保证档案的严肃性和保密性,不随意涂改档案内容,不随意泄漏、外传档案内容,维修需要的技术资料,需办理借阅登记手续,重要资料(如合同、合同附件、协议等凭证文件)的查阅需经批准,原则上不得外借、外传,特殊需要时,需经院领导批准才予办理借阅及复印手续。

第16篇:常用实验室仪器使用方法

常用实验室器材使用方法

包括加热装置,搅拌器,压缩气体钢瓶,玻璃仪器,玻璃仪器的干燥,旋转蒸发仪,气压计,真空泵等实验室常用器材的介绍及使用方法,注意事项等。

加热

为了加速化学反应,以及将产物蒸馏、分馏等,往往需要加热。但是考虑到大多数有机化合物包括有机溶剂都是易燃易爆物,所以在实验室安全规则中就规定禁止用明火直接加热(特殊需要除外)。

为了保证加热均匀,一般使用热浴进行间接加热。作为传热的介质有空气、水、有机液体、熔融的盐和金属等,根据加热温度、升温的速度等需要,常用下列手段:

(1) 水浴和蒸汽浴

当加热的温度不超过100℃时,最好使用水浴加热较为方便。但是必须指出(强调):当用到金属钾、钠的操作以及无水操作时,决不能在水浴上进行,否则会引起火灾或使实验失败,使用水浴时勿使容器触及水浴器壁及其底部。由于水浴的不断蒸发,适当时要添加热水,使水浴中的水面经常保持稍高于容器内的液面。电热多孔恒温水浴,使用起来较为方便。

(2) 油浴

当加热温度在100~200℃时,宜使用油浴,优点是使反应物受热均匀,反应物的温度一般低于油浴温度20℃左右。常用的油浴有:

1)甘油 可以加热到140-150℃,温度过高时则会炭化。

2)植物油 如菜油、花生油等,可以加热到220℃,常加入1%的对苯二酚等抗氧化剂,便于久用。若温度过高时分解,达到闪点时可能燃烧起来,所以使用时要小心。

3)石蜡油 可以加热到200℃左右,温度稍高并不分解,但较易燃烧。

4)硅油 硅油在250℃时仍较稳定,透明度好,安全,是目前实验室里较为常用的油浴之 一,但其价格较贵。

使用油浴加热时要特别小心,防止着火,当油浴受热冒烟时,应立即停止加热,油浴中应挂一温度计,可以观察油浴的温度和有无过热现象,同时便于调节控制温度,温度不能过高,否则受热后有溢出的危险。使用油浴时要竭力防止产生可能引起油浴燃烧的因素。 加热完毕取出反应容器时,仍用铁夹夹住反应器离开油浴液面悬置片刻,待容器壁上附着的油滴完后,再用纸片或干布檫干器壁。

搅拌器

搅拌器也是有机化学实验必不可少的仪器之一,它可使反应混合物混合得更加均匀,反应体系的温度更加均匀,从而有利于化学反应的进行特别是非均相反应。 搅拌的方法有三种:人工搅拌、磁力搅拌、机械搅拌。人工搅拌一般借助于玻棒 就可以进行,磁力搅拌是利用磁力搅拌器,机械搅拌则是利用机械搅拌器。

磁力搅拌器由于磁力搅拌器容易安装,因此,它可以用来进行连续搅拌尤其当反应量比较少或在反应是在密闭条件下进行,磁力搅拌器的使用更为方便。但缺点是对于一些粘

稠液或是有大量固体参加或生成的反应,磁力搅拌器无法顺利使用,这时就应选用机械搅拌器作为搅拌动力。磁力搅拌器是利用磁场的转动来带动磁子的转动。磁子是在一小块金属用一层惰性材料(如聚四氟乙烯等)包裹着的,也可以自制:用一截10# 铁铅丝放入细玻管或塑料管中,两端封口。磁子的大小大约有10mm、20mm、30mm长,还有更长的磁子,磁子的形状有圆柱形、椭圆形和圆形等,如图2.5,可以根据实验的规模来选用。

机械搅拌器机械搅拌器主要包括三部分:电动机、搅拌棒和搅拌密封装置。

电动机是动力部分,固定在支架上,由调速器调节其转动快慢。搅拌棒与电动机相连,当接通电源后,电动机就带动搅拌棒转动而进行搅拌,搅拌密封装置是搅拌棒与反应器连接的装置,它可以使反应在密封体系中进行。搅拌的效率在很大程度上取决于搅拌棒的结构,图2.6介绍的老式搅拌棒是用粗玻璃棒制成的。根据反应器的大小、形状、瓶口的大小及反应条件的要求,选择较为合适的搅拌棒。

气压计

气压计的作用是指示系统内的压力,通常采用水银气压计。在厚玻璃管内盛水银,管背后装有移动标尺,移动标尺将零度调整在接尽活塞一边玻璃管B中的水银平面处,当减压泵工作时,A管汞柱下降,B管汞柱上升,两者之差,表明系统的压力。使用时必须注意勿使水或赃物侵入测压计内,水银柱中也不得有气泡存在,否则将影响测定压力的准确性。封闭式水银测压计的优点是轻巧方便,但如有残留空气或引入了水或杂质时,则准确度受到影响。这种测压计装入水银时要严格控制不让空气进入,方法是先将纯净汞放入小圆底烧瓶,然后与测压计相连的高效油泵抽气至13033Pa(10-1mmHg)以下,并轻拍小烧瓶,使泵内的气泡逸出,用电吹风微热玻璃管使气体抽出,然后把水银注入U形管停止抽气放入大气即成。开口式水银测压计装汞比较方便,比较准确,所用玻璃管的比度要超过760mm。U形管两臂汞柱的高度之差即为公共压力与系统中压力之差。

真空泵

根据使用的范围和抽气效能可将真空泵分为三类:

(1) 一般水泵,压强可达到1.333~ 100kPa (10~760mmHg)为“粗”真空。

(2) 油泵,压强可达0.133~133.3 Pa(0.001~1mmHg)为“次高”真空。

(3) 扩散泵,压强可达0.133 Pa以下,(10-3 mmHg)为“高”真空。

在有机化学实验室里常用的减压泵有水泵和油泵两种,若不要求很低的压力时,可用水泵,如果水泵的构造好且水压又高,抽空效率可达1067~3333 Pa (8~25mmHg)。水泵所能抽到的最低压力理论上相当于当时水温下的水蒸气压力。例如,水温25℃、20℃、10℃时,水蒸气的压力分别为319

2、239

4、1197Pa(8-25mmHg)。用水泵抽气时,应在水泵前装上安全瓶,以防水压下降,水流倒吸;停止抽气前,应先放气,然后关水泵。

若要较低的压力,那就要用到油泵了,好的油泵能抽到133.3Pa(1mmHg)以下。油泵的好坏决定于其机械结构和油的质量,使用油泵时必须把它保护好。如果蒸馏挥发性较大的有机溶剂时,有机溶剂会被油吸收结果增加了蒸气压,从而降低了抽空效能,如果是酸性气体,那就会腐蚀油泵,如果是水蒸气就会使油成乳浊液而抽坏真空泵。因此使用油泵时

必须注意下列几点:

在蒸馏系统和油泵之间,必须装有吸收装置。

蒸馏前必须用水泵彻底抽去系统中有机溶剂的蒸气。

如能用水泵抽气的,则尽量用水泵,如蒸馏物质中含有挥发性物质,可先用水泵减压抽降,然后改用油泵。

减压系统必须保持密不漏气,所有的橡皮塞的大小和孔道要合适,橡皮管要用真空用的橡皮管。磨口玻璃涂上真空油脂。

抽真空步骤及注意事项

首先检查真空容器所处状态,处于真空下或者处于大气中。决定了两种启动真空设备的程序:第一种,真空下操作程序。第二种,大气状态下操作程序。注意:第一次启动要先打开ESP—A总控电源,总控电源上面三个灯表示三相电,三灯全亮表示正常。

1、如果容器处于低真空状态下,不能立即打开闸板阀以免引起真空油的回流。正确的操作步骤是先打开水龙头,然后打开机械泵(注:按下机械泵的启动键),同时打开ZDF—IV真空计电源,观察真空计读数到达30Pa左右时,再打开分子泵(注:先按下FDK—600K总电源,然后按下启动键),看到分子泵的工作频率达到50Hz左右时方可打开闸板阀。

2、如果容器处于大气下,首先要做的是检查大漏,即关闭容器大门和放气阀。然后打开水龙头,闸板阀,机械泵,ZDF—IV真空计电源,观察真空计读数到达30Pa左右时,再打开分子泵(注:先按下FDK—600K总电源,然后按下启动键)。

3、等到分子泵正常工作后(工作频率稳定在450Hz),按下真空计中电离计单元的启动键对真空度进行观测。

4、在真空达到Pa时可以打开离子泵,此时先关闭分子泵处的闸板阀,但不要关闭分子泵,等到离子泵的电压达到4000V时(离子泵稳定工作后)再关掉5410~10−−

分子泵,机械泵。

5、如果不需要维持真空时,先关掉真空计电源,后只需要把离子泵的闸板阀关闭即可,不关闭离子泵,而是让离子泵处于工作状态保持其内部环境。(注意:烘烤与离子泵不能同时打开,烘烤的目的是为了让离子泵更好的工作,需要时可先烘烤,关闭烘烤后在打开离子泵开关。一般不需要打开烘烤。)

压缩气体钢瓶

在有机化学实验中,有时会用到气体来作为反应物。如氢气、氧气等,也会用到气体作为保护气,例如氮气、氩气等,有的气体用来作为燃料,例如煤气、液化气等。所有这些气体都需要装在特制的容器中。一般都是用的压缩气体钢瓶。将气体以较高压力贮存在钢瓶中,既便于运输又可以在一般实验室里随时用到非常纯净的气体。由于钢瓶里装的高压的压缩气体,因此在使用时必须严格注意安全,否则将会十分危险。

有机化学实验室里常用的压缩气体压强一般接近200个大气压。整个钢瓶的瓶体是非常坚实的,而最易损坏的,应是安装在钢瓶出气口的排气阀,一旦排气阀被损坏,后果则不堪设想,因此为安全起见,都要在排气阀上装一个罩子。除此之外,这些压缩气体钢瓶应远离火源和有腐蚀性的物质,如酸、碱等。

实验室里用的压缩气体钢瓶,一般高度约160cm,毛重约70到80公斤。对于如此庞大的物体,如果不加以固定,一旦倒下来肯定会砸坏东西或砸伤人,且不说还会有高压气体本身带来的危险。因此,也是从安全考虑,应当将钢瓶固定在某个地方,如固定在桌边

或墙角等。

为了转移方便,一般选用特制的推车。 如何正确识别钢瓶所装的气体种类,也是一件相当重要的事情。虽然,所有的气体钢瓶外面都会贴有标签来说明瓶内所装气体的种类及纯度,但是这些标签往往会被损坏或腐烂。为保险起见,所有的压缩气体钢瓶都会依据一定的标准根据所装的气体被涂成不同的颜色。氢气瓶为绿色,氧气瓶为天蓝色,氮气瓶为黑色。 高压气瓶的漆标志

氧气瓶颜色为淡酞蓝(天蓝),字样“氧”,字颜色为黑色,当压力为20Mpa,为白色环一道,当压力为30Mpa,为白色环二道;

氢气瓶颜色为淡绿色,字样“氢”,字颜色为大红,当压力为20Mpa,为淡黄色环一道,当压力为30Mpa,为淡黄色环二道;

氨气瓶颜色为淡黄,字样“液氨”,字颜色为黑色; 空气瓶颜色为黑色,字样“氧”,字颜色为白色,当压力为20Mpa,为白色环一道,当压力为30Mpa,为白色环二道;

氮气瓶颜色为黑色,字样“氮”,字颜色为淡黄,当压力为20Mpa,为白色环一道,当压力为30Mpa,为白色环二道;

氯气瓶颜色为深绿,字样“液氯”,字颜色为白色;

溶解乙炔气瓶颜色为白色,字样“乙炔不可近火”,字颜色为大红; 二

氧化碳气瓶颜色为铝白,字样“液化二氧化碳”,字颜色为黑色,当压力为20Mpa,为黑色环一道;

液化石油气气瓶颜色为银灰,字样“液化石油气”,字颜色为大红

玻璃仪器

化学实验室玻璃仪器可分为普通玻璃仪器和磨口玻璃仪器。

标准接口玻璃仪器是具有标准化磨口或磨塞的玻璃仪器。由于仪器口塞尺寸的标准化、系统化、磨砂密合,凡属于同类规格的接口,均可任意连接,各部件能组装成各种配套仪器。与不同类型规格的部件无法直接组装时,可使用转换接头连接。使用标准接口玻璃仪器,既可免去配塞子的麻烦手续,又能避免反应物或产物被塞子玷污的危险,口塞磨砂性能良好,使密合性可达较高真空度,对蒸馏尤其减压蒸馏有利,对于毒物或挥发性液体的实验较为安全。

标准接口玻璃仪器,均按国际通用的技术标准制造,当某个部件损坏时,可以选购。标准接口仪器的每个部件在其口塞的上或下显著部位均具有烤印的白色标志,表明规格。常用的有10,12,14,16,19,24,29,34,40等。

有的标准接口玻璃仪器有两个数字,如10/30,10表示磨口大端的直径为10mm,30表示磨口的高度为30mm。

使用标准接口玻璃仪器应注意以下几点: (1)磨口塞应经常保持清洁,使用前宜用软布揩拭干净,但不能附上棉絮。 (2)使用前在磨砂口塞表面涂以少量凡士林或真空油脂,以增强磨砂口的密合性,避免磨面的相互磨损,同时也便于接口的装拆。 (3)装配时,把磨口和磨塞轻轻地对旋连接,不宜用力过猛。但不能装得太紧,只要达到润滑密闭要求即可。 (4)用后应立即拆卸洗净。否则,对接处常会粘牢,以致拆卸困难。 (5)装拆时应注意相对的角度,不能在角度偏差时进行硬性装拆,否则极易造成破损。 磨口套管和磨塞应该是由同种玻璃制成的。

玻璃仪器的干燥

有机化学实验室经常需要使用干燥的玻璃仪器,故要养成在每次实验后马上把玻璃仪器洗净和倒置使之晾干的习惯,以便下次实验时使用。干燥玻璃仪器的方法有下列几种:

(1)自然风干是指把已洗净的玻璃仪器在干燥架上自然风干,这是常用而简单的方法。但必须注意,若玻璃仪器洗得不够干净时,水珠不易流下,干燥较为缓慢。

(2)烘干是指把已洗净的玻璃仪器由上层到下层放入烘箱中烘干。放入烘箱中干燥的玻璃仪器,一般要求不带水珠,器皿口侧放。带有磨砂口玻璃塞的仪器,必须取出活塞才能烘干,玻璃仪器上附带的橡胶制品在放入烘箱前也应取下,烘箱内的温度保持105℃左右,约0.5h,待烘箱内的温度降至室温时才能取出。切不可把很热的玻璃仪器取出,以免骤冷使之破裂,当烘箱已工作时,不能往上层放入湿的器皿,以免水滴下落,使热的器皿骤冷使之破裂。

(3)吹干有时仪器洗涤后需要立即使用,可使用吹干,即用气流干燥器或电吹风把仪器吹干。首先将水尽量晾干后,加入少量丙酮或乙醇摇洗并倾出,先通入冷吹风1-2min,待大部分溶剂挥发后,再吹入热风至完全干燥为止,最后吹入冷风使仪器逐渐冷却

旋转蒸发仪

旋转蒸发仪,主要用于在减压条件下连续蒸馏大量易挥发性溶剂。尤其对萃取液的浓缩和色谱分离时的接收液的蒸馏,可以分离和纯化反应产物。旋转蒸发仪的基本原理就是减压蒸馏,也就是在减压情况下,当溶剂蒸馏时,蒸馏烧瓶在连续转动。结构:蒸馏烧瓶可是一个带有标准磨口接口的梨形或圆底烧瓶,通过一高度回流蛇形冷凝管与减压泵相连,回流冷凝管另一开口与带有磨口的接收烧瓶相连,用于接收被蒸发的有机溶剂。在冷凝管与减压泵之间有一三通活塞,当体系与大气相通时,可以将蒸馏烧瓶,接液烧瓶取下,转移溶剂,当体系与减压泵相通时,则体系应处于减压状态。使用时,应先减压,再开动电动机转动蒸馏烧瓶,结束时,应先停机,再通大气,以防蒸馏烧瓶在转动中脱落。作为蒸馏的热源,常配有相应的恒温水槽。

第17篇:小学实验室仪器管理制度

高阳中心小学“竹之韵”乡村学校少年宫

小学实验室仪器管理制度

一、仪器室由专人管理,实行管理人员负责制,无关人员,未经许可不准进入仪器室。

二、仪器应及时请购(或领取)、验收、登帐。任何时候都要做到仪器室、学校,二级账册相符和账册实物相符。

三、仪器按分类编号,定室、定橱、定位存放,布局规范、陈列美观、整齐清洁。做好防尘、防潮、防压、防挤、防变形、防热、防晒、防磁、防震等工作。

四、一切仪器的领用、外借、归还必须通过管理人员,必须办理登记手续,并检查仪器完好情况。教师领用必须提前填写《实验使用仪器通知单》,便于准备。使用完毕,应进行清理并及时归还、注销。外单位或个人借用一律须经学校分管领导批准后,方可办理借用手续。

五、仪器在使用过程中如有损坏,应及时查明并予登记。学生实验因违章操作造成不应有的损坏,除做出检讨外,并酌情赔偿。外单位或个人借用如有损坏的照价赔偿

六、仪器要经常维护,及时保养,同时做好防锈、防腐、防尘、防霉等工作,出现故障要及时修理,报损报废仪器要严格按审批手续办理。

七、仪管员应工作调动或其他原因离开学校,必须办理移交手续,移交时由教导处、总务处派人监督,既要点清数量,也要检查质量。

八、完善保存好仪器帐册、产品说明书、实验使用仪器通知单、实验记载表等有关档案资料。

九、做好安全用电、防火、防盗、防毒、防爆、防污染等安全防范工作,危毒药品必须专柜放置,严格取用制度,要保证人员和仪器安全。

小学实验室安全防护管理制度

1、实验室由专人负责实验室设备及人身的安全。

2、加强四防(防火、防盗、防水、防事故)。

3、来实验室工作的人员,必须有实验室工作人员在场或经过上机操作培训与考核。

4、实验前要全面检查安全,实验要有安全措施。若仪器设备在运行中,实验人员不得离开现场。

5、易燃、易爆物品必须存放在安全处,严禁带电作业。

6、如遇火警,除应立即采取必要的消防措施灭火外,应马上报警,并及时向上级报告。火警解除后要注意保护现场。

7、如有盗窃和事故发生,立即采取措施,及时处理,不得隐瞒,应及时报告主管和保卫部门,并保护好现场。

8、实验工作人员在检测前必须熟悉检测内容、操作步骤及各类仪器的性能,严格执行操作规程,并作好必要的安全防护。

9、进行有毒、有害、有刺激性物质或有腐蚀性物质操作时,应戴好防护手套、防护镜。

10、实验室内使用的空调设备、电热设备等的电源线,必须经常检查有否损坏,移动电气设备,必须先切断电源。电路或用电设备出现故障时,必须先切断电源后,方可进行检查。

11、实验室应配有各类灭火器,按保卫部门要求定期检查,实验室人员必须熟悉常用灭火器材的使用。

12、实验室内不准吸烟和吃食物。

13、下班前,实验室人员必须检查操作的仪器及整个实验室的门、窗和不用的水、电、气路,并确保关好。

14、与实验室无关的易燃、易爆物品不得随意带入实验室。

小学实验教师岗位职责

1、执行学校实验教学计划,按照教材规定的实验内容,积极配合有关教 师完成各项实验教学任务。

2、熟悉各种教学仪器的规格、型号、技术标准、工作原理和使用方法、维修办法等。

3、熟悉全部演示实验和学生分组实验的有关理论实验方法、注意事项, 能熟练指导学生实验,处理学生实验中遇到的各种疑难问题。

4、按照实验教学计划和实验通知单,准备学生实验和演示实验所需的仪器、试剂和器材。实验完毕整理、清洗、回收入柜。

5、不断总结经验,积极创造条件,组织学生开展课外科技活动和进行开放性实验。

6、加强和各科教师联系,积极开展实验教学研究、教学仪器研制和自制教具活动。

高阳中心小学“竹之韵”乡村学校少年宫

小学学生实验守则

1、学生必须按规定的时间参加实验课,不得迟到早退或无故缺课。

2、实验前必须认真预习实验内容,明确实验目的、原理、方法和步骤,准备接受指导教师提问,没有预习或提问不合格者,须重新预习,方可进行实验。

3、学生进入实验室必须衣着整洁,保持安静,遵守实验室各项规章制度,严禁高声喧哗、吸烟、随地吐痰或吃零食,不得随意动用与本实验无关的仪器。

4、实验准备就绪后,须经指导教师检查同意,方可进行实验。实验中应严格遵守仪器设备操作规程,认真观察和分析现象,如实记录实验数据,独立分析实验结果,认真完成实验报告,不得抄袭他人实验结果。

5、实验中要爱护实验仪器设备,注意安全,节约水、电、药品、试剂、元件等消耗材料,凡违反操作规程或不听从指挥而造成事故、损坏仪器设备者,必须写出书面检查,并按学校有关规定赔偿损失。

6、实验中若发生仪器故障或其他事故,应立即切断相关电源、水源等,停止操作,保持现场,报告指导教师,待查明原因或排除故障后,方可继续进行实验。

7、实验完毕后,应及时切断电源,关好水、气,将所用仪器设备、工具等进行清理和归还,经指导教师同意后,方可离开实验室。

8、应按实验要求及时、认真完成实验报告。

第18篇:小学仪器实验室工作计划

芹菜小学实验室工作计划

为了充分发挥实验室的作用,为了适应新课程改革中实施的新课程标准,为了切实使学生充分重视、学好科学这门基础学科,引起学生对学科学,用科学的兴趣,提高自然科学任课老师业务水平,本学年制定工作计划如下:

一、指导思想

以先进的科学教育教学思想为指导,坚持科学发展观,深化教育改革,深入推进素质教育,适应新课程改革中实施的新课程标准。加强制度建设,夯实管理基础。在科学教学中贯彻素质教育,贯彻学校新学期工作计划与教学计划,提高自然科学任课老师的师德水平和业务能力,创造适合学生发展的空间,张扬学生个性,全面提升学生的科学素养。进一步让自然科学教学成为实施素质教育的重要阵地。重点培养学生创新精神、自主探究、实践等能力,切实使学生充分重视、学好科学这门基础学科,引起学生对学科学、用科学的兴趣。

二、工作任务

为了实现实验室实践教学管理工作的科学化、规范化和制度化,建立良好的教学秩序,提高教学质量,顺利完成本学期各项实践教学任务,结合本实验室实际情况,本学期实验室将从下几个方面开展工作:

1、明确实验的目的意义。在提高认识的基础上,努力做到建设符合标准;装备综合配套;管理科学规范;使用注重实效。

2、按照省标准化实验室的要求和《甘肃省小学教学仪器设备配备目录》,着重添置配备能满足现行教材所需的实验仪器设备、设施。凡与现行教材配套的仪器、器材要配齐配足,做好课堂教学和课外科技等活动的服务工作。

3、仪器保管责任到人。加强实验室仪器设备、低值耐用品与低值易耗品的管理,要做到:

(1)定期检查、核对、统计实验室仪器设备,做到帐、物、卡相符;对丢失、损坏、报废的要进行登记备案并上报;存放定位存放,取用方便,尽量做到科学、整齐、美观。

(2)实行仪器设备等入帐、借用登记制度,凡丢失或损坏的要酌情处理。

(3)实行易耗品入库、领用登记,严格控制易耗品在使用上的浪费。

(4)经常维护保养实验仪器设备,保证仪器设备完好率,做好使用与维修记录。

4、学科是推动社会生产力向前发展的基础学科。因此,一定要加强对实验教学的工作的领导。学校实验教学有分管校长负责,主要领导经常检查,自然科学教师的配备要相当集中、相对稳定,另外要配备业务能力强、有责任心的老师当兼管员。

5、执行好自然实验室守则、借还赔偿制度、安全保卫制度等。

6、配合组织教师开展活动,认真钻研教材,研究教法,上好公开课,提高科学学科的教学质量,并撰写论文。

三、具体措施

1、进一步完善实验室管理的各项规章制度并认真贯彻执行。搞好实验室安全与日常清洁卫生工作。

2、认真学习省标准化实验室的标准要求,逐项对照、认真改正,形成共识,加强对实验室建设和管理的意识,进一步完善实验室各项工作。加强科学教学的常规管理,促使教师上好实验课,在实验课上大力提倡学生自主设计实验方法,以此培养学生创新意识。学期初认真做好各实验室内设备的检查维修工作,使设备能够正常运转,保证实验课正常开出。

3、加强请示汇报,及时向领导汇报教育教学工作中的疑难问题,取得领导支持。

4、加强现有人员的业务学习,注重自身的提高。由专职教师组织全体自然科学老师学习科学新课程标准,明确科学课程的要求,重视科学的重

要性,上好自然科学课。开展对实验仪器使用的培训学习,充分利用仪器设备,充分利用电教设备和电教材料(如多媒体、光盘资料等),开足、开全实验课。组织自然科学老师间相互听课、外出听课,借鉴其他学校的先进经验来弥补自身不足,取得科学教育教学工作的最佳效益。

5、教师撰写学科论文,积极参与各项竞赛。

6、鼓励教师自制教具,丰富教学材料,充实实验设施。

7、辅导学生开展第二课堂活动(写小论文、小制作)。

8、做好期末工作小结,清点仪器、设备、药品,制定采购计划。

芹菜小学实验室工作总结

2012年上学期

实验室工作是培养学生素质的一个重要方面,我校实验室在本学期的工作中,由于有校领导的直接领导和具体指导,全体实验教师的共同努力,顺利地完成了本学期预定的工作目标。

1、实验室工作规范化

学校制定了一整套实验管理规则。如实验教师岗位职责、仪器管理制度、安全卫生制度、赔偿制度并张贴在墙,实验教师在实施过程中都能严格按以上的制度执行。教学使用时都有进出登记。我们特别注意做好安全防护工作,注意做好危险药品的保管工作。注意防火、防水、用电安全。保持经常性的清洁卫生,对公用物品进行维护,坚持了勤俭办学的原则。

2、仪器管理有序化

实验室管理有序,每个柜都有反映内容的目录卡,帐物相符、物卡相符、帐物卡相符。期末清点仪器设备数目,检查损坏程度。

3、教学仪器维护、保养经常化

根据仪器不同的要求做好通风、防尘、防潮、防锈、防腐蚀工作,生物标本采取防潮、防鼠、防蛀等措施,对损坏的仪器及时维修,及时做好损坏维修记录,使实验仪器处于可用状态。经常教育学生要积极实验,勤俭实验,保护仪器,尽量不浪费;我们还教育学生规范实验操作程序,防止不必要的损坏,杜绝实验事故。

4、实验教学与研究方面

为提高实验室的使用率,期初订好科学教学实验计划,凡教学大纲与教材规定做的演示与分组实验,我们都想办法给学生开出。分组实验的材料有四个来源:(1)、仪器室内分组实验盒,(2)、学生下发的实验耗材;

(3)、自制自购分组实验材料。(4)、发动学生平时注意收集各种废旧物品。积极安排好实验所需用品、药品,,提前根据教学进度准备好,演示和分组实验努力开足开全。本学期实验开出率达100%。实验教学做到规范化,

每次演示与分组实验都预先写好实验通知单,课堂上的演示、分组实验有仪器配备、使用情况、过程等整体效果记录。实验完毕后的仪器进行全面的检查后整理收放原处,以便下次使用。 以保证仪器设备的充分使用,体现管理为教学服务,为师生服务。实验教学活动纳入学校教研活动中,经常组织科学教师外出听课,学习好经验,不断使我校的实验教学综合水平得到提高和完善。

第19篇:学校实验室仪器管理制度

学校实验室仪器管理制度

1、实验室是师生进行实验教学的场所,实验室内一切设备,必须经常保持良状态。仪器设 备不得挪作他用,更不得据为已有。

2、实验室仪器室由专人管理,实行管理人员负责制。管理人员有权对违反规章制度的人和事进行批评和提出处理意见。

3、仪器装备应及时补充,及时验收、登记。任何时候都要做到仪器室、学校上级主管部门帐册相符和帐册实物相符。

4、仪器设备按分类编号,定位存放、布局规范、陈列美观、整齐清洁。做好防尘、防潮、防压、防挤、防变形、防热、防晒、防磁、防震等工作。

5、一切仪器设备的领用、外借、归还必须通过管理人员,必须办理登记手续并检查仪器完好情况。教师领用必须提前填写“实验通知单”便于准备,使用完毕,及时归还、注销。外单位借用必须经学校主管领导批准。

6、经常维护,及时保养,做好防锈、防腐、防虫、防毒等工作,尽量减少仪器损耗。

7、爱护仪器设备,出现故障要及时修理,损坏仪器要及时查明,并根据情节及时处理。严格报废审批手续。开展自制教具、学具和课外科技活动。

8、建立和健全仪器设备和实验教学档案制度,妥善保存好仪器帐册、产品说明书、使用登记册、实验情况记载表等有关资料。

9、严格按有关安全规则操作实验,做好安全用电、防火、防盗、防毒、防爆、防污染等安全防范工作,危毒药品必须专柜放置,严格取用制度,要保证人员和仪器设备安全。

lo、一般药品与腐蚀性、易燃、易爆、有毒等危险品要定厨、定位存放,做到“物清、帐清、资料清、标志清”。并嘱咐学生未经许可不得擅自动手,做好防患工作。

11、在实验中违反操作规则而造成仪器设备损坏的,应照价赔偿,遵守实验操作规则发生损坏的,酌情处理。每次实验课结束后,实验教师要认真核对仪器设备数量与完好情况,并做好相关记录。

12、学期初,实验教师要根据课程标准拟定学期实验计划,完成大纲规定的全部演示实验和学生实验。实验室要对全体师生开放,充分发挥仪器设备的使用效益。

13、定期对在教学过程中损坏的仪器设备进行维修,无修复价值的应办理报损登记注销手续,并注明损耗程度及原因。学期末,实验教师要对实验仪器设备进行整理清点,拟报填补计划。

第20篇:实验室仪器使用制度

1.任课教师必须预先将所需仪器通知仪器管理员,示教器材在使用前三日写书面通知单交仪器管理员,学生分组实验材料,使用前一周写书面通知单交仪器管理员。

2.仪器管理员准备好的仪器材料放在提盒式仪器车上,教师项事前检查。

3.示教仪器应于当回归还,如需注目使用者可事前声明,不予拆散,如需较长时间使用。可适当延期,归还时须经仪器管理员检查。

4.仪器使用时损坏,归还时应向仪器管理员说明,以便随时登记,并与科组长研究处理办法。因工作造成损失不予赔偿,由于使用中不接操作规程或粗心大意造成的损失,必须照价赔偿。

《实验室仪器及装备销售工作总结.doc》
实验室仪器及装备销售工作总结
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