心得体会听讲座
2020-03-01 17:30:11 来源：范文大全收藏下载本文
心得体会
王丹生院长所作的关于新西兰大白兔角膜内皮细胞质的建立的报告为失明的人带来了重见光明的希望，假如这种技术取得成功，将会具有跨时代的意义。从中我也对生物技术专业的无限潜力有了更深的了解，而且，对于学好这门专业，我也有了更大的信心。
角膜是一凸形的高度透明物质，直径大约12毫米，垂直方向要略小于水平方向，中央部分的厚度通常在0.5-0.6毫米之间。
角膜从结构上共分为5层：上皮层、前弹力层、基质层、后弹力层、内皮层。新西兰大白兔角膜内皮细胞的建立即使内皮层上的细胞。
1．上皮层: 角膜上皮厚约50微米，易与Bowman层相分离，由5-7层细胞组成，共有3种类型细胞：基底细胞、翼状细胞、扁平细胞。上皮细胞间以桥小体相接，构成致密的质膜，这层致密坚固的屏障可阻止大部分微生物的侵入，阻止泪液中液体和电解质进入基质层，使得角膜处于相对脱水状态。电镜观察上皮细胞的外层细胞膜，可发现一些指状突出物，称为微绒毛，这些微绒毛伸入泪液膜，能吸附泪液，防止上皮细胞干燥。角膜上皮细胞约每周更换一次,角膜上皮可以再生.与角膜上皮愈合有关的并发症有：a、疼痛 b.上皮延迟愈合 c、微生物性角膜溃疡 d、复发性角膜糜烂 e、与自身免疫性疾病相关的角膜溃疡 f、非病毒性角膜炎 . 2．前弹力层 :前弹力层位于上皮基底膜后面，厚约8-14微米。用光镜观察是一层相当均匀的非细胞层，但通过电镜观察，该层是类似基质的特殊层，并非真正的膜，而是表层基质的致密层，由胶原纤维组成，不能与基质层分离，只在灵长类可见。该层不能再生，损坏后会成为不透明的疤痕组织。该层上有小孔，角膜神经由此到达上皮。
3．基质层基质层占角膜厚度的90%，主要由胶原纤维、粘合物质和角化细胞组成。基质的胶原纤维很规则、均匀，胶原纤维束构成片状，层层紧密相叠，基质层的层状结构使角膜在剥离术中可以相当容易地分离。粘合物质由角朊硫酸盐、软骨硫酸盐组成，充盈纤维及细胞间隙。肿胀的角膜，粘合物质增加，胶原纤维大小无改变。
4．后弹力层：后弹力层由内皮产生，大约10微米厚，与Bowman层不同，Descemet 膜能轻易从基质层脱离，损伤后可以再生。
5．内皮层由一层六角形内皮细胞所形成，厚约5微米，宽18-20微米，直接与房水接触，这层细胞的再生是受限制的，内皮可用角膜内皮显微镜观察或拍摄。内皮细胞的密度随年龄增大而减低，同样，因损伤、炎症、眼部手术而引起的细胞丢失，通过增大细胞、减低细胞密度来代偿完成的。虽然部分细胞因年龄或疾病而增大，但是另一些细胞保持大小不变，这样均匀的内皮群落就会逐渐变得参差不齐。出生时内皮细胞密度约3000/mm2，随年龄的增大其密度逐渐下降，至
阶段细胞密度降为1400－2500/ mm2，同时，其细胞构型亦失去规则的六角形布局。角膜内皮细胞的屏障和主动液泵功能对于角膜保持正常厚度和透明性是极其重要的。眼球手术、创伤、药物毒性、炎症、高眼压和其它各种病理性刺激均可以使角膜内皮细胞大量死亡。一旦角膜内皮细胞密度低于维持内皮细胞生理功能的临界密度（400－700/ mm2），角膜将出现不可逆的病理性改变。
角膜内皮细胞的功能
角膜内皮细胞对角膜透明性有着至关重要的作用，角膜的高度透明是实现视觉器官正常生理功能的重要条件之一，而解剖形态完整和生理功能正常的角膜内皮层则是保持角膜透明的关键。
作为角膜最内层的内皮层是由单层内皮细胞所组成，它前附着于后弹力层，后与前房水接触，内皮从角膜中央到周边可被分为四个区：I区：占角膜中央8．6～91II111的大片区域；1I区：宽度仅150 ～500urn；m区：宽度50～150urn；1V区包括最周边部分，与角膜的小梁网毗邻，宽50～lOOum⋯ 。角膜内皮细胞是通过其主动的代谢性液泵作用，把房水与角膜基质隔开的生理屏障，其泵一漏系统可防止过多的水分和溶质通过，使角膜基质保持相对脱水的状态，维持其透明性。这一作用的实施，是通过角膜内皮细胞的的Na 一K 一ATP酶的活性，维持角膜内和房水内的Na 梯度。内皮细胞之间的复合连接结构，又起到防止水分渗入角膜内的屏障作用，从而保持角膜实质层的相对脱水状态。任何导致角膜内皮细胞损害的因素，均能使这一屏障功能受损，而导致角膜水肿，失去其透明性。
新西兰大白兔角膜内皮细胞系的建立
取活家兔角膜, 采用内皮面朝下进行贴板培养, 并利用时间梯度连续揭膜法筛选出仅含有纯净RCE细胞的培养孔, 收集纯一的RCE细胞悬浮于含有硫酸软骨素氧化降解物、牛眼生素、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、家兔角膜基质细胞培养液、羧甲基壳多糖、N-乙酰葡萄糖盐酸盐和氨基葡萄糖盐酸盐的DMEM/F12 培养液(20%胎牛血清)中, 置CO2 培养箱中启动原代培养.启动培养的RCE 细胞呈四角形或多角形, 3 周后即可长成单层.在随后的继代培养中, RCE 细胞的形状逐渐由多角形变为成纤维样.RCE 细胞生长状态稳定,现已被传至67 代, 已经建成了一个新的连续性RCE 细胞系.经鉴定, 该细胞系细胞的群体倍增时间约为53.8 h; 第67 代培养细胞的特征性染色体数目为44 条, 但出现了染色体的非整倍性.综合特征性染色体数目、抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体的免疫细胞化学染色、血管内皮生长因子(VEGF165)实验和形态回复实验的研究结果, 证明该细胞系确为家兔角膜内皮细胞系, 为哺乳动物角膜内皮细胞的理论研究及人造角膜内皮的研制奠定了基础.
作为一名大学生，能听到这次的讲座，我认为真的是很值得的，科学或许不是万能的，但离开科学却是万万不能的，学习生物技术不能只局限于某一方面，他在医学上的应用将会变得越来越突出，我应该为自己能够学到这些专业知识感到高兴，我会努力学好专业知识，早日得回报社会。
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