超声破碎仪

快速入门指南和操作步骤

我们建议您按照本指南中的步骤操作。 我们不鼓励在一开始就测试自行设计的协议，因为这样做会很耗时，并且可能会误导仪器的性能。

目的：安装EpiSonic。 请参阅用户手册中的第7页以获取完整的可视安装说明| 预计时间：15分钟

注意：开箱时请注意所有组件的位置，以便在运回时可以将所有组件快速重新包装到正确的位置。

样品处理喇叭组件：

1.将转换器连接到样品处理喇叭。

2.用扳手拧紧（手拧不够，会影响结果）。

3.将流量管连接到样品处理喇叭上的黑色接头。

4.将转换器电缆连接到转换器。 通过顺时针转动紧固机构来锁定连接。 再循环冷却器组件：

1.将电源适配器连接到循环冷却器。

2.将电源线连接到电源适配器。 将电源线插入接地的电源插座。 主要组装：

1.将流量管穿过隔音罩，并在转换器电缆穿过时将组装好的转换器放置在隔音罩的内座上。 确保电缆不被卡住。

2.将管架（或可选的板架）放入样品处理喇叭。

3.在每个流量管的裸露端装上白色配件。 然后将水释放连接器连接到一个白色配件。 将线路滤波器连接到其他白色配件。

4.将放水连接器连接到循环冷水机组的“电源”连接和管路过滤器，以再循环冷水机组的“返回”连接。

5.将转换器电缆连接到超声波发生器。 通过顺时针转动紧固机构来锁定连接。 6.将电源线连接至声波发生器。 将电源线插入接地电源插座。 验证：

目的：确保EpiSonic已经设置并正常工作| 预计时间：15分钟 1.将样品处理喇叭的容器填充到200毫升冷过滤水中。

2.打开循环冷却器。 让水流入管道。 在10分钟内确保冷水机的屏幕温度达到10°C。 关闭冷水机组。

3.打开超声波发生器。 手动运行振幅设置为20％的程序10秒钟。 如果瓦特的输出读数低于5瓦，那么您可能需要将转换器重新拧紧到超声处理喇叭。 操作 - 0.2毫升管 目的：按照给定的步骤剪切你的样品 预计时间：30-45分钟

需要外部材料

EpiSonic™0.2 ml带帽试管（Cat＃EQC-1000-X02） 感兴趣的DNA样品：

高质量的非降解基因组DNA 开始大小超过50kb 缓冲液：1×TE或Tris-HCl（10mM，pH8.0）+ EDTA（1mM）

注意：在任何形式的超声波处理过程中，偶尔溶液中的溶液可能会分离到管道或管道的内侧，这可能会影响剪切的DNA大小。 为了达到最佳效果，在进行每20次超声波处理循环后，可以将样品短暂离心或轻轻敲下，以恢复孔底部的样品体积，特别是当溶液分离到管盖或管壁两侧时。

要么; 染色质样品的兴趣

来自细胞系的高质量，未降解的染色质提取物 每管中30μlChIP缓冲液中含有4μg染色质 缓冲区：可以使用任何常见的ChIP缓冲区; EpiSonic™ChIP缓冲液（建议使用EQC-1000-CCB型号，以获得最佳效果。

注意：染色质的剪切结果可能受染色质数量，细胞/组织类型，剪切缓冲液的洗涤剂浓度和样品粘度的影响。 因此，用户可以根据实际情况进一步优化染色质剪切条件。 一般而言，样品粘度可能对超声处理结果具有显着的影响。 强烈建议在超声处理前和超声过程中仔细均匀化染色质样品。 为获得最佳结果，在超声处理过程中每20个工作循环执行一次后，应将样品短暂离心，以恢复管底部的样品体积，尤其是当溶液分离到管盖或管壁两侧时。

声音程序

1.将200毫升过滤水加入样品处理喇叭。 将管架放入样品处理喇叭。 放置管架，使指孔与样品处理喇叭的橡胶边缘上的流量管连接孔对齐。

2.将循环冷却器设置为目标温度至少4°C。 打开预冷几分钟，直到循环冷却器的读数温度读数为4°C。 确保水完全流入流量管。

3.按照超声波发生器的屏幕指示导航屏幕。 如有需要，请参阅用户手册第11页上的“操作”部分以获得进一步的帮助。

4.将起始幅度设置为30％（稍后可能需要在步骤6中进行调整）。 然后根据下表设置程序设置（阴影时间是需要输入到EpiSonic的设置）： DNA剪切：

对于染色质剪切：

* 1占空比= 1脉冲开启时间+ 1脉冲关闭时间 提示：如果碎片太长，则一次增加5个占空比

5.将条带帽切成单个帽，然后盖上每个样品管。小心地将样品管（1-12）插入管架。管中的样品应完全浸没在水中（水位应比管中样品高2-3mm）。

提示：为了在同时运行少于12个样品的情况下提高重现性，请插入仅包含相当于样品量的缓冲液的模拟管，用于剩余未使用位置。

6.关闭声音机箱的盖子。按下“STOP / START”键开始超声处理程序。 EpiSonic现在将在这些设置下运行。只要EpiSonic开始超声处理，快速调整幅度，直到它对应于约140瓦的平均功率输出。

7.一旦程序完成，拿出管。如果液体收集在管壁的一侧，则将液体简单地离心到底部。 DNA可以使用或以其他方式储存在-20℃。剪切后的染色质可用于ChIP测定或以其他方式储存于-80℃。 清理

预计时间：5分钟

1.关闭循环冷却器和超声波发生器。

2.从循环冷却器上断开放水连接器和线路过滤器释放连接器。

3.在水槽或烧杯顶部放下流量管，同时断开放水连接器和管路过滤器的虹吸出水。 确保它们尽可能地排水，因为残余的水会不适当地增加未来运行的水量。

4.从样品处理喇叭筒中取出所有的容器和容器架。 使用干净的布或纸巾彻底擦拭样品处理喇叭表面的多余水分。 让Sound Enclosure打开几个小时，让它干燥。

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