专业技能训练2总结（推荐）
2020-03-03 03:07:50 来源：范文大全收藏下载本文
专业技能训练2总结
20101897
生物科学（1）班
刘春蓉
生物学是一门以实验为基础的自然科学，现代生物科学的发展尤其依赖科学实验。在生物教学中，实验、学习和观察等实践环节对我们掌握生物学知识、科学方法、培养我们的动手能力和形成科学素质都起到了至关重要的作用。正是因此，从我们开始接触生物这门学科开始，就不断有生物实验课程，锻炼我们各式各样的能力
本学期第十周到第十三周周末在欧阳老师的带领下进行了生物学实验专业技能训练。这次专业技能训练我们共做了6次实验，包括：植物细胞组织培养基的配制、动物细胞的观察和培养、植物基因组DNA的提取、PCR扩增分离DNA片段、载体质粒的抽提、电泳检测。
通过本次实验我进一步掌握了自己以前不熟悉的实验操作以及对细节的注重性以及实验操作过程中的注意事项。下面就通过以下几方面写一下该次实训的心得体会。
首先实验之前要做好充分的准备，认识听老师实验前的讲解，因为该过程有许多操作技能和注意事项。通过植物细胞培养基的配制掌握了配制培养基母液的基本技能，了解液体和固体细胞培养基的配制方法。在这次实验中一定要注意灭菌，使用高压蒸汽灭菌锅逃注意放气阀的开放。还有超净工作台的使用，要紫外灭菌和通风二十分钟，此时人要远离超净工作台。
通过动物细胞的观察和培养了解了传代细胞培养的基本方法以及在细胞培养过程中严格的操作程序。初步掌握无菌操作的基本原则。认识无菌操作在细胞培养中的重要性。学会利用显微镜观察细胞形态，对贴壁细胞进行传代，并掌握细胞计数方法。通过对这次实验我认识到显微镜使用的重要性，并不是说你会使用了就好了，而是要准确快速的使用。这就需要我们反复使用，在使用过程中掌握技巧。比如观看载玻片时要找到所要观察的细胞形态时就要熟悉熟悉操作步骤以及调焦等技能。如果我没有熟悉这些技巧那就会导致观察所需的时间比别的同学多甚至有可能找不到所要观察的目标。该次实验让我更进一步的掌握了显微镜的使用，已能够快速准确的找到所要观察的目标。
在PCR扩增分离DNA片段中了解多聚合酶链反应DNA扩增技术的基本原理和实验应用。对于PCR议的使用还不太熟练，但对于PCR扩增分离有了个初步的了解。
后来PCR成为实验最基本的一步了，但是发现在PCR中还是有许多需要注意的地方。PCR的第一步就是引物设计了。引物设计需要注意的地方很多，在大多数情况下，我们都是在知道已知模板序列时进行PCR扩增的。在某些情况比如构建文库的时候也会在不知道模板序列的情况下进行设计。这个时候随机核苷酸序列就与模板不是完全匹配。我们通常指的设计引物都是在已知模板序列的情况下进行。
设计的目的是在两个目标间取得平衡：扩增特异性和扩增效率。引物分析软件将试图通过使用每一引物设计变化的预定值在这两个目标间取得平衡。设计引用有一些需要注意的基本原理：
① 引物长度
一般引物长度为18~30碱基。总的说来，决定引物退火温度（Tm值）最重要的因素就是引物的长度。有以下公式可以用于粗略计算引物的退火温度。
在引物长度小于20bp时：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃
在引物长度大于20bp时：62.3℃+0.41℃(%G-C)-500/length-5℃
另外有许多软件也可以对退火温度进行计算，其计算原理会各有不同，因此有时计算出的数值可能会有少量差距。为了优化PCR反应，使用确保退火温度不低于54℃的最短的引物可获得最好的效率和特异性。
总的说来，每增加一个核苷酸引物特异性提高4倍，这样，大多数应用的最短引物长度为18个核苷酸。引物长度的上限并不很重要，主要与反应效率有关。由于熵的原因，引物越长，它退火结合到靶DNA上形成供DNA聚合酶结合的稳定双链模板的速率越小。
② GC含量
一般引物序列中G+C含量一般为40%~60%，一对引物的GC含量和Tm值应该协调。若是引物存在严重的GC倾向或AT倾向则可以在引物5’端加适量的A、T或G、C尾巴。
③ 退火温度 退火温度需要比解链温度低5℃，如果引物碱基数较少，可以适当提高退火温度，这样可以使PCR的特异性增加；如果碱基数较多，那么可以适当减低退火温度，是DNA双链结合。一对引物的退火温度相差4℃～6℃不会影响PCR的产率，但是理想情况下一对引物的退火温度是一样的，可以在55℃～75℃间变化。
④ 避免扩增模板的二级结构区域
选择扩增片段时最好避开模板的二级结构区域。用有关计算机软件可以预测估计目的片段的稳定二级结构，有助于选择模板。实验表明，待扩区域自由能（△G）小于58.6lkJ/mol时，扩增往往不能成功。若不能避开这一区域时，用7-deaza-2’-脱氧GTP取代dGTP对扩增的成功是有帮助的。
最后个实验室电泳检测，经过这个实验后我们了解到了核酸琼脂糖凝胶电泳的原理，学会其具体的操作程序；对提取的DNA进行检测，掌握紫外电泳图谱的观察分析方法。主要对电泳仪有了初步的认识，学会了电泳仪和电泳槽的使用，学会了对于荧光条带的简单分析。
在这次实训期间自身的能力有了全面的提高。不仅对理论知识有了进一步的了解更重要的事在实际操作过程中自己的动手操作能力得到了显著的提高。而且在整个实验过程中，我很高兴能认识亲爱的欧阳老师，（一个很耐心很细心的老师！) 欧阳老师会很体谅一些先开始忙活的同学，在黑板上写清他们实验大概会做到的步骤和注意事项，后面实验的准备物品和要求，然后开始在忙于实验而奔走中的同学之间巡视。观察我们的实验操作，或是时不时提点解释一下我们实验步骤的缘由;实验药品的作用;如何做会得到更好的结果;实验没有得到好的结果或是做的失败了的原因。
可是，随着实验的发展，后来更多的时候，是我们在看过书本上要求的实验步骤后，去缠着欧阳老师，围在她周围，问她关于实验的各种问题，就算同样的问题被问过许多次，欧阳老师依然是和蔼的笑着一一解答我们的疑问，她的平易近人，她的悉心教导，她的不骄不躁，她的耐性与笑容都深深的打动了实验中的每位同学。和欧阳老师一起做实验的时间不久，但是我能体会到她是一个有着严谨科学精神的学者和科研人员，她对我们认真负责，孜孜不倦，我们也学习的很是快乐。我由衷的感谢老师的支持与对我们的厚爱!谢谢！ 以上是我这个学期里，从现代生物技术综合实验技能实训里得到的一些心得。我希望在下个学期里，我能将自己从这里得到的心得，学习应用到其他的实验甚至是学习生活中去，扩充自己的知识，拓宽自己的视野，增厚自己的底蕴，加强自己的能力，不敢放言称自己要成为未来生物界中的一流人才，只能勉励自己成为一个不负众望的有用的人。
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