中央广播电视大学社会实践报告 组织培养
2020-03-02 22:29:48 来源：范文大全收藏下载本文
关于植物组织培养的实习报告
植物的组织培养是以植物生理学为基础，近几十年发展起来的一项无性繁殖的新技术。广义上又叫离体培养，指将植物的离体器官、组织、细胞以及去除细胞壁的原生质体，通过无菌操作，在人工控制环境下，培养在人工配制的培养基上对其进行克隆，使其生长、分化并成长为完整植株的过程。
本人于2010年11月17日至2011年1月20日在北京太阳宫园林绿化有限公司牛栏山基地自行实习。我的实习内容主要包括MS培养基的制备，萱草、玉簪的增殖培养，草莓茎尖的诱导。具体实践过程如下：
一、MS培养基的制备
1.浓缩贮备液 需配制一系列的浓缩贮备液为Ⅰ大量元素（浓缩20x）、Ⅱ微量元素（浓缩1000x）、Ⅲ铁盐（浓缩100x）、Ⅳ除蔗糖之外的有机物质（浓缩1000x）。所有的贮备液都应贮存于塑料瓶中或玻璃瓶中，置冰箱中保存，其中铁盐贮备液必须贮存于琥珀色玻璃瓶中。
2.制备1LMS空白培养基 先量取贮备液Ⅰ50ml、贮备液Ⅱ1ml、贮备液Ⅲ10ml、贮备液Ⅳ1ml至量筒中加适量蒸馏水定容至1L，并倒入容器中加热；然后称取蔗糖30g/L，琼脂4.5g/L搅拌至完全溶解；再用NaOH和HCl调至 pH值为5.8，分装至玻璃瓶中（30ml/瓶），最后放入高压锅中灭菌，在压力为108kPa、温度121℃下灭菌20min即可。
二、萱草的增殖培养
将增殖培养出的丛生芽与愈伤组织一起，分割转接到MS+BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L的培养基上进行培养。培养室温度为25±2℃，光照强度约1200~1500LX，光照时间为10小时。经过20~30天芽与愈伤的不断增殖生长，即可分化出丛生芽。每隔30~45天，将分化的丛生芽切成2~3株再接种在增殖培养基上，每次可扩大5倍。
三、玉簪的增殖培养
将增殖分化出的丛生芽接种到MS+BA2.0mg/L+KT2.0mg/L+NAA0.05 mg/L培养基上进行增殖培养，培养室温度为25±2℃，光照强度约1500~2000LX，光照时间为12小时。每隔30~45天将分化出丛生芽切成单株再接种到增殖培养基上，每次可扩大4~5倍（淘汰增殖少而慢的材料）。增殖繁殖代数绿叶品种控制在24代以内，花叶品种控制在16代以内。
四、草莓茎尖的诱导
（一）外植体的选择与消毒
1.外植体的选择 草莓的组织培养以茎尖作为外植体效果较好，常用于草莓快繁脱毒技术。摘取基地中草莓红颜品种新抽出的健壮无病的匍匐茎4～5cm长作为外植体材料，进行丛生芽的诱导。
2.外植体的消毒 用自来水冲洗一小时，洗刷表面污物及绒毛，然后加入84消毒液与洗涤灵清洗10min，同时利用离心力转圈摇动瓶子使外植体表面的污染物被析出，最后用自来水冲洗数次，直到没沫为止将水倒掉。移置于超净工作台上，将冲洗后材料再截成2～3cm长，用75%酒精浸泡15~20s，用无菌水冲洗1次，然后用0．1％的升汞(HgCl2)溶液浸泡杀菌5~10min，再用无菌水冲洗5~6次，少量
多次，最后用无菌滤纸吸去外植体表面的水分，待接种。
（二）接种与培养
1.接种 在无菌条件下，将已经过消毒的匍匐茎外植体，用解剖刀剥取其微茎尖，接种到MS基本培养基中。刚接种的外植体需进行暗培养（3天）或是保持较低温度等措施，均可减轻材料褐化的发生；增加光照或延长光照时间都可降低材料玻璃化的产生。
2.培养 建立无菌体系得到无菌苗后，接种到MS+BA0.5mg/L+IBA0.1mg/L芽诱导培养基上培养，培养室温度为25±2℃，光照强度约2000~3000LX，光照时间为12小时。20d左右无菌苗增厚，切口有瘤状突起，即愈伤组织，继续培养即可由它分化出不定芽。将不定芽与愈伤组织一起，分割转接到MS+BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L增殖培养基上培养，经过15~20天芽与愈伤的不断增殖生长，即可分化出丛生芽。每隔20~30天将分化的丛生芽转接至增殖培养基上，每次可扩大8~10倍。
五、实习中发现的问题
我是从2010年6月份开始深层次接触植物组织培养这个行业的，在学校时虽然学习过组培的相关知识，但只是理论知识，实际操作方面接触并不多。这次的实习刚好是我在逐步熟悉组培这个行业的过程中进行的，使我更加深刻的发现了自身存在的一些问题，具体如下：
1.增强专业知识，学以致用 初入组培这个行业，经验不足，书本上的理论知识仍需与实际相结合。在专业知识上与自己本职工作需求还存在着一定的差距，需要不断增强自己的专业性知识，学以致用，并以书中所写为依据，根据实际情况适时变通。
2.熟练操作技术，提高速度 初接触时，由于操作技术不熟练，导致组培材料大量被污染，损失严重。因此在操作过程中越规范材料被污染的可能性就越小，再在此基础上提高速度，适应工厂化生产。
3.明确问题的实质与根本 在工作中缺乏新思维，对事物发展中存在的问题认识不够准确，把握不住发展的必然规律。对实习中遇到的困难和矛盾，有时把握不住主要矛盾和矛盾的主要方面，抓不住问题的实质和根本。
4.明确有效的目标或计划 像是周计划、月计划、学期计划等等。没有目标与计划就像是不知道方向的船，在海洋里任意漂游，最终会在海洋中消失。为自己制定明确的目标与计划，一步一步认真的按计划进行，实现目标。
六、总结
初学植物组织培养时，对于一切都很陌生的我感到了困惑，不知该从哪里入手，虽然之前也有看过相关的书籍，但毕竟与实际还是有差异的。这次的实习经历让我更加充分、更加深入的了解到植物组织培养的相关知识。每次看到经过自己动手接种、增殖后慢慢长大的组培苗，心里都会有小小的成就感。
通过这次综合性的实习，使我掌握了现代生物技术手段与运用能力，训练了实际操作技能。将我所学的基础理论、基础知识和基本技能运用于实践之中，将所学的知识转化为能力，培养实际工作能力、科研能力。这次的实习对于我来说受益匪浅，是不断学习、不断充实自己的一次机会，也是积极探索、逐步成长的一次经历，我会在不断增强自己专业知识的同时，利用现有的优越条件，理论与实际相结合，做到全面性发展。
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